我國香菇主栽品種分子圖譜庫的構(gòu)建.pdf

1、香菇(Lentinula edodes)是一種重要的食用菌，我國香菇產(chǎn)量占全世界的70％左右。同時我國菌種混亂，同物異名、同名異物現(xiàn)象嚴(yán)重，為了加大食用菌菌種的管理，近些年國家出臺了一系列的菌種保護(hù)和菌種真實性鑒定法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，在鑒定工作中，鑒定任何一個樣本，需要將全部已有品種做參照樣本才能進(jìn)行，導(dǎo)致新品種的遺傳特異性鑒定工作量越來越大。
　　 本文以通過國家認(rèn)定的25個香菇品種為材料，應(yīng)用SSR分子標(biāo)記進(jìn)行遺傳學(xué)分析，以探究SS

2、R技術(shù)在香菇品種認(rèn)定中遺傳特異性鑒定的可用性，同時建立現(xiàn)有主栽香菇品種遺傳特異性分子指紋圖譜，力求為香菇品種認(rèn)定和良種使用奠定分子生物學(xué)基礎(chǔ)，同時為其他食用菌的認(rèn)定工作提供方法和標(biāo)準(zhǔn)。實驗結(jié)果如下：
　　 1.本研究從自行設(shè)計的36對引物和來自于文獻(xiàn)的12對引物，總共48對引物中篩選到了14對具有多態(tài)性的SSR引物，其中自行設(shè)計的引物10對，來自于文獻(xiàn)中的引物4對。
　　 2.以通過認(rèn)定的25個香菇(Lentinula

3、edodes)品種為材料，使用篩選到的14對引物進(jìn)行SSR分析，引物的多態(tài)性為100％，每對引物產(chǎn)生的等位基因數(shù)為2-9個，平均5.0個，基因型數(shù)為2-12個，平均6.3個。
　　 3.選取慶元9015和它的四個單孢菌株：809(A1B2)、810(A2B1)、811(A2B2)、812(A1B1)作為實驗材料，隨機(jī)選取Paa-1和F7這兩對引物進(jìn)行SSR分析。最終結(jié)果證明，對于香菇來說，SSR分子標(biāo)記也是共顯性標(biāo)記，同植物和動

4、物以及其他的微生物一樣。
　　 4.對SSR結(jié)果進(jìn)行遺傳學(xué)參數(shù)分析，表觀雜合度為0.0400-0.9200,平均表觀雜合度為0.4857；預(yù)期雜合度為0.1151-0.8131，平均預(yù)期雜合度為0.6126；PIC值為0.1064-0.7736，平均PIC為0.5541。綜合分析表明除了S4和S15引物的區(qū)分度較差，其他12對引物區(qū)分度較高，同時14對引物綜合使用能表現(xiàn)出很高的區(qū)分度。
　　 5.根據(jù)條帶信息，使用POP

5、GENE ver.1.32軟件計算25個香菇供試菌株之間的遺傳距離，結(jié)果表明，申香10號和申香12號之間的遺傳距離最小，為0.0000；香九和L9319之間的遺傳距離最大，為2.3885；25個供試菌株之間的平均遺傳距離為0.6407。
　　 25個品種中，除申香10號和申香12號不能區(qū)分外，對其他23個品種清晰鑒別。最終利用14對引物的擴(kuò)增圖譜構(gòu)建了我國香菇已通過認(rèn)定的栽培菌株的指紋圖譜，本圖譜可以成為重復(fù)性良好、試驗室間可比