青海省主栽春油菜品種指紋圖譜構(gòu)建和純度鑒定技術(shù)的研究.pdf

1、我省低海拔地區(qū)主要種植甘藍(lán)型油菜，品種多達(dá)7個，其中包括雜交種6個雜交種和 常規(guī)種1個常規(guī)種。品種真?zhèn)渭半s交種種子純度鑒定，對于打擊假冒偽劣，維護育種者的權(quán)益和保護農(nóng)民的利益具有重要的意義。品種純度的鑒定，傳統(tǒng)的方法是采用田間種植鑒定，該方法可提供的檢測指標(biāo)有限，且準(zhǔn)確性差。近年來發(fā)展的分子標(biāo)記技術(shù)，能直接反映基因組水平的差異，已廣泛應(yīng)用到農(nóng)作物品種指紋圖譜構(gòu)建和品種鑒定中，并成為雜交種真?zhèn)舞b定的有效手段。本研究應(yīng)用SSR分子標(biāo)記對我省

2、目前廣泛推廣的甘藍(lán)型油菜品種的指紋圖譜及青雜系列雜交種種子純度的快速鑒定技術(shù)進行了研究，得到以下結(jié)果：
　　 (1)從140對SSR引物中篩選出13對多態(tài)性較好的引物用于指紋圖譜的構(gòu)建，發(fā)現(xiàn)同時采用P013、P052這2對引物組合或同時采用P086、P027和P021這3對引物組合，可以將14份供試材料(包括6個雜交種品種、7個親本材料及1個常規(guī)種)完全區(qū)分開來。這些指紋可用于親本材料和雜交種真?zhèn)蔚蔫b別。
　　 (2)篩

3、選出在各品種中具有共顯性標(biāo)記的引物:青雜2號(P019、P027),青雜3號(P013、P027、P052)，青雜4號(P027、P052、P086)，青雜5號(P030、P085)。
　　 (3)利用獲得的共顯性引物對2008年大田生產(chǎn)雜交種的純度進行鑒定，同時也采用傳統(tǒng)田間種植的方法對雜交種進行純度鑒定。實驗室檢測各雜交種純度分別為：青雜2號純度：83.41％(P027)、83.90％(P019)；青雜3號純度：87.02％

4、(P027)、86.54％(P052)、86.06％(P013)；青雜4號純度：70.67％(P027)、69.23％(P052)、68.75％(P086)；青雜5號純度：85.37％(P030)、82.93％(P085)。田間鑒定各雜交種純度分別為：青雜2號88.29％、青雜3號91.35％、青雜4號72.12％、青雜5號87.80％。實驗室分子標(biāo)記檢測結(jié)果與田間種植鑒定結(jié)果趨勢基本一致。但實驗室分子標(biāo)記檢測結(jié)果均較田間鑒定結(jié)果偏低，

5、造成這種差異的原因主要是田間鑒定以育性為依據(jù)，即田間表現(xiàn)可育為真雜種、田間表現(xiàn)不育為假雜種，而分子標(biāo)記檢測不僅可以區(qū)分可育與不育單株，而且還可以將可育株中的真雜種和恢復(fù)系單株、保持系單株及雜單株區(qū)分開。
　　 (4)將田間表現(xiàn)為可育而分子標(biāo)記檢測為父本帶型(推測為恢復(fù)系)、田間表現(xiàn)為可育而分子標(biāo)記檢測為母本帶型(推測為保持系)的單株分別與不育系測交，并自交，在云南鑒定測交F1和自交種的育性，結(jié)果表明推測為保持系單株的測交F1全為