金黃色葡萄球菌血清8型莢膜多糖的提取純化及其偶聯(lián)物免疫學(xué)特性的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、分類號(hào)S852.3學(xué)校代碼10129UDC11.220學(xué)號(hào)2009201088慢性瘤胃酸中毒對(duì)瘤胃發(fā)酵功能及乳酸代謝菌的影響金黃色葡萄球菌血清8型莢膜多糖的提取純化及其偶聯(lián)物免疫學(xué)特性的研究StudytheextractionpurificationofCP8theimmunogenicityofconjugateinCP8fromStaphylococcusaureus申請(qǐng)人：王姝懿學(xué)科門(mén)類：農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向：獸醫(yī)微生

2、物與免疫學(xué)指導(dǎo)教師：郝永清教授論文提交日期：二〇一二年五月StudytheextractionpurificationofCP8theimmunogenicityofconjugateinCP8fromStaphylococcusaureusAbstractStaphylococcusaureusisoneofthemostsignificantpathogenswhichcausesthebovinemastitis.weconsid

3、erdthemajvirulencefactsiscapsularpolysacideadhesinofS.aureus.WhenS.aureusinvasionofthebodyitcan’tbeclearedeasilybyphagocyticcellbecauseofresistingthephagytosisofcapsularpolysacide.Furthermethebacterialadhesinrecognisedad

4、heredtotheganizationdefinitemoleculeofcell.Theinfectionishardtocontrolwhenbacteriumproduceenzymestoxinsafterthesuccessofcolonization.IntheexperimentCouplingthecapsulepolysacideadhesintopreparetheconjugatesthroughchemical

5、method.SoitlaidthetheeticalexperimentalbasisofthedivalentvirulencefactsvaccineofCPadhesininS.aureus.WeaddeddifferentnutrientsinColumbiasolidmediumindertooptimizethecultureconditionsofS.aureusinthetext.Usingthemethodofplu

6、senzymetoextractedCP8fromS.aureus.WepurifiedCPusingthroughcolumnchromatographymethods.ItscontentsweredetectedbythemethodofPhenolvitrioliccolimetry.OnthebasisofgetthepurifiedCP8wechoseADHasbridgeEDCasthecouplantthepurifie

7、dClfAFnBPBascarrierproteintobideCPClfAFnBPBtogetherindertoprepareconjugates.Inthecoupingprocesstodeterminethebestmassratioofconjugate.SecondlytheuseofUVabsbancePhenolvitrioliccolimetrymethodtoqualitativequantitativeanaly

8、siscalculatethecouplingratio.FinallytheBalBcmicewereimmunizedwiththeconjugatesELISAmethodmousetoxicitytestwerechosentodetectantibodylevelsprotectiveeffectofCPconjugates.TheresultshowedthatCP8S.aureushadthemostvigousgrowt

9、hinColumbiasolidmediumwhichadded1﹪lactose2﹪NaCl10﹪fetalbovineserum.Weusedtheseconditionstoculturedstrainswhichextractedcapsularpolysacide.ThepurityofthecruedCPwas34.43﹪thepurityoftherefinedCPwas79.68﹪.Thenucleinicacidpro

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