替米考星的免疫調節(jié)機制和在人工感染放線桿菌胸膜肺炎豬體內(nèi)的藥代動力學研究.pdf

1、本文利用細菌脂多糖(LPS)誘導小鼠RAW264.7巨噬細胞-單核細胞(RAW)和外周血單核細胞(PBMC)過度表達細胞因子和致炎因子而構建的體外炎癥模型，研究了畜禽專用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素替米考星的免疫調節(jié)作用。通過血漿急性相蛋白(C反應蛋白，CRP；血清淀粉樣蛋白，SAA)和前致炎細胞因子(IL-6；TNF-α；IFN-γ)含量的檢測，并結合傳統(tǒng)的疾病臨床診斷指標(如體溫，呼吸頻率，白細胞計數(shù)，X光診斷和病理學指標等)，對構建的豬放線桿

2、菌胸膜肺炎模型進行評價，同時研究了替米考星(口服)在人工感染放線桿菌胸膜肺炎豬體內(nèi)的藥代動力學。 目前的體內(nèi)和體外實驗研究證實，人用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對免疫反應和炎癥反應均具有調節(jié)作用。本文利用建立的體外炎癥模型，研究了替米考星和泰樂菌素對細胞因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，白介素-1β(IL-1β)，IL-6和IL-10以及致炎因子一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)是否具有免疫調節(jié)作用。與5μg/ml的藥物濃度相比

3、，10和20μg/ml濃度的替米考星和泰樂菌素顯著的抑制6-keto-PGF1α，PGE2，NO，TNF-α，IL-1β，IL-6的合成，促進IL-10的分泌，并抑制環(huán)氧合酶-2(COX-2)和誘導型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表達。上述結果說明，在炎癥過程中，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素可能通過調節(jié)細胞因子和致炎因子的合成而發(fā)揮抗炎作用。 在豬的感染性疾病中，生物學指標的監(jiān)測可為各種抗生素的臨床療效提供客觀的評價依據(jù)。本文通過血清中急性

4、相炎癥蛋白(CRP，SAA)和前致炎細胞因子(IL-6,TNF-α和IFN-γ)含量的檢測，結合疾病診斷中傳統(tǒng)的臨床評價指標，對構建的豬放線桿菌胸膜肺炎模型進行了評價。試驗豬隨機分為三組，兩感染組氣管內(nèi)注射接種血清2型胸膜肺炎放線桿菌，對照組注射無菌生理鹽水。一個感染組在接種16小時后經(jīng)口一次性給予替米考星粉(20mg/kg)。豬接種胸膜肺炎放線桿菌后，體溫，呼吸頻率顯著升高。經(jīng)X光檢查確診，感染后12和24小時，豬肺部出現(xiàn)纖維素性滲出

5、的特征。病理剖檢和組織學檢查證明，接種豬肺部呈明顯的放線桿菌胸膜肺炎病變特征。接種豬血清CRP，SAA和IL-6的水平隨著疾病進程逐漸升高，而給予替米考星能有效降低血清CRP和SAA的水平和持續(xù)時間。因此，通過血清CRP，SAA和IL-6的含量的檢測可以有效的判斷疾病的狀態(tài)，并且CRP和SAA可以用作評價抗生素療效的生物學指標。 本文采用2×2雙因子交叉實驗設計，利用反相高效液相色譜法研究了替米考星(口服)在人工感染放線桿菌胸膜

6、肺炎豬體內(nèi)的藥代動力學，并通過小劑量緩慢靜脈滴注給藥(1.5mg/kg，10分鐘，速率為0.15mg·ml·min)研究了替米考星在正常豬(n=3)體內(nèi)的藥代動力學。數(shù)據(jù)采用3p97藥代動力學程序軟件處理。替米考星靜脈滴注給藥的藥代動力學符合二室模型?？瞻讓φ战M的豬口服替米考星后藥代動力學符合一級吸收二室開放模型，藥代動力學參數(shù)Cmax=1.40±0.09μg/ml，Tmax=3.11±0.54h，t1/2α=2.59±0.42h，t1