水稻bZIP類基因OsNIF1和OsNIF2的功能初步研究.pdf

1、bZIP基因家族廣泛參與種子成熟和萌發(fā)、花的誘導發(fā)育、光的形態(tài)建成、壓力和激素信號及抵御生物脅迫和非生物脅迫的反應等。在水稻基因組中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了89個bZIP轉錄因子,其中16個OsbZIP轉錄因子的作用特點已經(jīng)被確定,大多與耐干旱、高鹽的能力和對ABA的敏感性等抗逆反應有關。本研究在前期研究的基礎上,對13個抗病相關OsbZIP基因進行了表達分析,然后對表達變化差異顯著的OsNIF1和OsNIF2基因功能進行了初步研究,主要結果如下:<

2、br>　　(1)bZIP基因在植物抗逆反應方面具有重要作用,本研究通過實時定量PCR,比較了13個OsbZIP基因在Pi36介導的抗性反應中的表達差異性,結果表明OsNIF1和OsNIF2二個基因在抗病品種中的表達量明顯高于感病品種。說明這兩個基因可能參與稻瘟病抗性基因Pi36介導的抗病反應;
　　(2)為了進一步探究bZIP基因在水稻抗稻瘟病中的功能,選擇差異表達的OsNIF1和OsNIF2基因為研究目標,分別構建相應的干涉載體

3、和超量表達載體。經(jīng)過遺傳轉化,將載體分別轉化到水稻品種 Q61并得到相應的轉基因植株。T0代植株的表達量分析表明干涉轉基因苗中OsNIF1和OsNIF2的表達量分別都有下降,而在超量表達的轉基因植株中明顯上調(diào)。對T1代利用稻瘟病無毒菌株RB11進行接種鑒定,結果表明OsNIF1和OsNIF2基因在Pi36介導的抗性反應中沒有明顯作用,初步說明Pi36介導的抗性反應可能不依靠OsNIF1和OsNIF2信號途徑。
　　(3)為了分析O

4、sNIF1和OsNIF2基因超量表達之后,是否激發(fā)植物的基礎抗性,對超量表達轉基因植物基因表達上調(diào)的株系進行防衛(wèi)相關基因PBZ和PR1b,以及水楊酸標記基因WRKY45的表達分析。結果說明,OsNIF1和OsNIF2組成型超量表達之后,激發(fā)了水楊酸信號途徑,可能參與了植物的基礎防衛(wèi)反應。
　　(4)為了探究OsNIF1和OsNIF2基因是否參與水稻抗旱反應,在本實驗中測量了干涉和超量表達的轉基因幼苗的失水率,結果表明二個基因超量表