β-防御素-5 mRNA在荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞中的表達(dá).pdf

1、奶牛乳腺炎是一種復(fù)雜的綜合性乳腺疾病。它病因復(fù)雜，可由多種病原微生物侵入乳腺而引起，所以防治不易。目前，關(guān)于β-防御素的抗乳房炎作用的研究很少。
　　本研究首先采用膠原酶消化法和胰蛋白酶選擇消化法，對(duì)荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行了分離、培養(yǎng)和純化，并利用形態(tài)學(xué)、核型分析和熒光定量RT-PCR檢測(cè)α-酪蛋白等方法對(duì)所培養(yǎng)乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行了鑒定。隨后，通過添加代表大腸桿菌為主要侵染力的脂多糖（LPS）建立了實(shí)驗(yàn)性乳房炎的乳腺上皮細(xì)胞模型

2、，并采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)乳腺上皮細(xì)胞中細(xì)胞因子IL-6、IL-12、TNF-α及α-酪蛋白和β-防御素（BNBD5）mRNA的表達(dá)水平。研究結(jié)果顯示，添加LPS后乳腺上皮細(xì)胞中炎性因子IL-6、IL-12和TNF-α的mRNA表達(dá)量與空白對(duì)照組相比顯著增加（p<0.01），并且α-酪蛋白mRNA表達(dá)量顯著降低（p<0.01），說明添加LPS誘發(fā)上皮細(xì)胞產(chǎn)生了一定的炎性。并且添加LPS刺激乳腺上皮細(xì)胞后，乳腺上皮細(xì)胞中BN