微生物發(fā)酵法對(duì)菜粕脫毒及蛋白品質(zhì)改良的研究.pdf

1、菜籽粕是我國(guó)最豐富的植物源蛋白之一，其蛋白質(zhì)含量在28％-44％。菜粕中氨基酸組成平衡，因此可作為蛋白質(zhì)飼料，應(yīng)用于畜禽日糧中，替代大豆粕，以降低飼料及飼養(yǎng)成本。但菜籽粕中存在的硫甙、單寧及纖維素等有毒物質(zhì)和其它抗?fàn)I養(yǎng)因子嚴(yán)重影響了菜粕飼用價(jià)值。本研究采用微生物發(fā)酵法去除菜籽粕中的硫甙等有毒物質(zhì)，同時(shí)利用微生物生長(zhǎng)代謝所產(chǎn)生的各種蛋白酶，將菜籽蛋白分解為更易被畜禽吸收利用的多肽物質(zhì)，從而提高菜籽粕的利用率和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
　　 課題

2、從實(shí)驗(yàn)室分離保藏的79株菌株出發(fā)，定向篩選出對(duì)硫甙有較好降解作用的ndt、Br、Zf1等8株優(yōu)良菌株；同時(shí)從44株對(duì)纖維素有一定降解作用的菌株中，篩選得到具有高纖維素酶活的菌株Z4。
　　 優(yōu)化組合上述復(fù)篩得到的9株菌，確定最佳的混菌發(fā)酵組合為：ndt+Br+Zf1，其中ndt為枯草芽胞桿菌（Bacillus subtilis）、Br為蠟質(zhì)芽胞桿菌（Bacillus cereus）、Zf1為干酪乳桿菌（Lactobacillus

3、 casei）；通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定了3菌的最佳接種比例Zf1：Br：ndt為3：2：1。在發(fā)酵條件單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，通過(guò)4因素3水平正交實(shí)驗(yàn)，得到最佳的混菌發(fā)酵條件：料水比1：0.8，pH自然，溫度30℃，時(shí)間48 h。試驗(yàn)還研究了添加外源物質(zhì)對(duì)菜粕混菌發(fā)酵的影響，其中添加0.2％FeSO4和10％棉粕對(duì)菜粕混菌發(fā)酵有促進(jìn)作用。
　　 以硫甙降解率、粗蛋白含量和小肽含量提高率3個(gè)指標(biāo)為因變量，以棉粕添加量、發(fā)酵溫度、料水比、發(fā)酵時(shí)

4、間為自變量，設(shè)計(jì)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)（Response serface method，RSM），分別得到各自的最佳發(fā)酵條件。5次重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果表明：粗蛋白含量為40.91％，較發(fā)酵前提高了13.5％；小肽含量較發(fā)酵前提高了403.12％；硫甙降解率達(dá)到70.28％；單寧降解率達(dá)31.16％。對(duì)提取后的菜籽蛋白Tricine-SDS-PAGE分析表明，發(fā)酵后的蛋白組分分子量絕大部分均小于20 kD；發(fā)酵后小分子量蛋白組分明顯增多；輔助凝膠過(guò)濾結(jié)果后發(fā)