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文檔簡介
1、為建立高效實用的水稻胚乳外源基因特異刪除系統(tǒng),本研究首先通過含有載體p1300ActRedTnos和p1300Gt1RedTnos的轉基因水稻,驗證外源紅色熒光蛋白(DsRed2)在水稻各組織特別是胚乳中的表達情況,證明了應用DsRed2檢測水稻胚乳外源基因刪除與否的可行性。
根據水稻遺傳密碼子的偏好性改造并重新合成了重組酶基因Crein、CreM和Flp,由水稻胚乳特異啟動子Gt1調控,以融合的LoxP/Frt序列為識別
2、位點,DsRed2為報告基因分別構建了用于自刪除途徑的表達載體6個和雜交刪除途徑的表達載體5個,并獲得相應的轉化植株。轉p1300LF-ART-GFT植株(刪除后胚乳不表達DsRed2,其他器官表達DsRed2)和轉p1300ART-LF-GFT植株(刪除后胚乳表達DsRed2,其他器官不表達DsRed2)的T0代種子的RFP檢測結果都表明,胚乳中有刪除作用發(fā)生,初步判斷重組酶Flp可以介導胚乳中外源基因的剔除。但外源基因刪除是否完全以
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