2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、尼莫克?。∟emadectin)是一種十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,由藍(lán)灰鏈霉菌Streptomyces cyaneogriseus sp. Noncyanogenus經(jīng)發(fā)酵過程生產(chǎn)。作為米爾貝霉素族的一員,尼莫克汀主要用于合成活性更強的農(nóng)藥獸藥莫西克?。∕oxidectin)。本論文運用推理選育的方法篩選尼莫克汀高產(chǎn)菌株,然后運用正交設(shè)計方法對培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,確定了適合于高產(chǎn)菌株的發(fā)酵參數(shù),為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供參考。
   首

2、先對尼莫克汀產(chǎn)生菌原始菌株進(jìn)行兩次純化,使遺傳性狀穩(wěn)定,以純化后的菌株N-03-16為出發(fā)菌株,經(jīng)紫外誘變進(jìn)行推理選育。根據(jù)尼莫克汀的生物合成途徑和代謝調(diào)節(jié)機(jī)理,選擇乙酸鈉、纈氨酸、纈氨酸氧肟酸和2-脫氧葡萄糖作為篩選壓力,結(jié)合分離純化,得到菌株N-09-20,產(chǎn)量達(dá)到77 mg/L,比原始菌株提高了4倍。同時對比了內(nèi)源性前體誘導(dǎo)和結(jié)構(gòu)類似物耐受的篩選效果。之后經(jīng)過鏈霉素抗性篩選得到菌株N-11-37,產(chǎn)量達(dá)到99 mg/L,較出發(fā)菌株

3、N-09-20提高了28.6%,由此建立了鏈霉素篩選模型。以N-11-37為出發(fā)菌株,經(jīng)過4次自身代謝產(chǎn)物耐受,篩選得到高產(chǎn)菌株N-16-19,產(chǎn)量達(dá)到172 mg/L,比原始菌株提高了10倍,成功的應(yīng)用了自身代謝調(diào)節(jié)突變篩選模型。對菌株N-16-19進(jìn)行了遺傳穩(wěn)定性試驗,經(jīng)過5次傳代后,結(jié)果表明該菌株有良好的遺傳穩(wěn)定性。
   對高產(chǎn)菌株N-16-19的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定了一系列發(fā)酵工藝。經(jīng)過配方優(yōu)化之后,確定了新的斜面

4、培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基組成。在新的斜面培養(yǎng)基上,孢子形態(tài)為青灰色,圓形,菌絲產(chǎn)黃綠色色素。優(yōu)化后的發(fā)酵配方為(g/L):葡萄糖20、乳糖30、麥芽糊精40、玉米淀粉20、蛋白胨2、黃豆餅粉4、棉籽餅粉8,CaCO3 3,Ph 7.0,使用自來水配制。在新的發(fā)酵配方下,尼莫克汀的產(chǎn)量達(dá)到236 mg/L,比原始配方提高了67%。同時,確定了菌齡、接孢量、種齡、移種量和發(fā)酵溫度等發(fā)酵過程參數(shù),同時對溶氧要求進(jìn)行考察,得知該菌株對溶氧水平要求很高

5、。通過短鏈脂肪酸前體和氨基酸前體的添加,考察了尼莫克汀產(chǎn)生菌對前體的利用情況,并且確定在72 h、120 h、168 h分3次添加總量為0.2%的乙酸鈉,以及在48 h、96 h、144 h分3次添加總量為0.3%的纈氨酸時,尼莫克汀的產(chǎn)量有大幅度增加。
   研究了在新的發(fā)酵工藝下尼莫克汀產(chǎn)生菌發(fā)酵過程中的產(chǎn)素變化,以及生物量、Ph、總糖、還原糖和氨基氮的代謝變化。確定了發(fā)酵過程中,72 h開始產(chǎn)素,在96 h發(fā)酵液由棕黃色漸

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