仔豬胃腸道中FcRn表達的定量檢測及基因片段分析.pdf

1、為了探索FcRn在出生至斷奶后仔豬肝臟和胃腸道組織中的表達規(guī)律及其與仔豬腸道IgG轉運的相關性，本文以長白雜交二元仔豬為研究對象，對豬FcRn基因進行克隆與序列分析，并采用RT-PCR法對不同日齡二元仔豬胃腸道中FcRn水平進行了定量檢測。主要結果如下： 1．豬FcRn基因的克隆與序列分析：提取十二指腸組織總RNA，利用Primer 5．0引物設計軟件設計一對PCR引物，然后利用設計的引物進行RT-PCR，PCR產物與pMD-1

2、9T載體連接后轉化JM109感受態(tài)細胞，篩選陽性克隆并測序；FcRn陽性克隆兩條序列在NCBI上比較，顯示序列同豬FcRn （AY740682．1）同源性都為99％?？寺×素iFcRn基因的序列和其剪接變體序列，其剪接變體序列已在GenBank上注冊（Accession． EU852582）。 2．仔豬胃腸道組織FcRn mRNA的定量檢測：根據GenBank公布的豬FcRn重鏈mRNA基因保守序列自行設計PCR引物和熒光探針，并

3、以β-actin為管家基因，對仔豬胃腸道組織中FcRn的表達進行了定量檢測。結果表明，F(xiàn)cRn mRNA表達量隨日齡的變化規(guī)律為：出生當天表達水平較低，未吃初乳（0 w）和已吃初乳（0 y）沒有顯著差異（P>0．05）；1d時表達水平顯著升高（P<0．05），隨后維持在較穩(wěn)定的水平直至21 d時有所下降；28 d時FcRn在胃腸道各部位表達均有顯著升高（P<0．05）；35 d時則普遍回落到與前期相近的水平。FcRn在仔豬胃腸道組織中平