鴨源巴氏桿菌的分離鑒定及致病性研究.pdf

1、禽霍亂是由禽多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida，P.m)引起的在雞、鴨等禽類中發(fā)生的一種急性、接觸性、敗血性傳染病。該病以呼吸困難、腹瀉、肝臟表面白色壞死點、心包積液、肺出血等為主要特征。廣泛流行于世界各地，對養(yǎng)禽業(yè)產(chǎn)生巨大危害。加強對多殺性巴氏桿菌致病性的研究，對保護養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。
　　 本研究是從疑似病料中分離，經(jīng)過形態(tài)特征、培養(yǎng)特性、生化鑒定為多殺性巴氏桿菌，而且從分子生物學水平得到

2、進一步驗證。動物回歸試驗結果表明，1.2109CFU/mL的菌液10倍系列稀釋后，接種11日齡健康雛鴨后，該分離菌株對11日齡健康雛鴨的LD50為104-4.5。攻毒后引起發(fā)病雛鴨精神不振，呼吸困難，腹瀉等變化。主要病變以心包積液、心外膜、心冠脂肪出血、肺出血和肝臟白色壞死點等為特征，并且從雛鴨體內分離出形態(tài)特征完全一致的菌落。藥敏試驗結果顯示，該分離菌株對頭孢曲松鈉、阿莫西林、氨芐西林、利福平、氧氟沙星較敏感。本試驗為禽巴氏桿菌病的診

3、斷與防治提供了科學的理論依據(jù)和病變模型。
　　 利用鴨源多殺性巴氏桿菌強毒株分別經(jīng)口服和滴鼻接種途徑人工感染雛鴨，觀察鴨的發(fā)病情況，于接種后不同時間內隨機剖殺試驗組鴨和對照組鴨，采集肝臟、肺臟、心臟和脾臟等組織固定、H.E.染色，觀察各器官組織學變化，并進行病理組織學研究。試驗結果表明：雛鴨感染后的發(fā)病率和死亡率均為100％，對雛鴨致病力很強。病理組織學變化以十二指腸絨毛斷裂、脾臟脾小梁變細，血竇擴張，淋巴細胞密度升高、肝細胞脂

4、肪變性、心肌纖維斷裂等為特征。試驗結果說明經(jīng)口服和滴鼻接種途徑人工感染雛鴨后，滴鼻感染的病理進程比口服感染途徑提前出現(xiàn)。
　　 以分離菌株純化后免疫清潔的新西蘭白兔制備第一抗體，以FITC標記的山羊抗兔IgG作為第二抗體，通過反應條件的優(yōu)化，建立了間接免疫熒光染色法(IFA)檢測石蠟切片中鴨源多殺性巴氏桿菌的方法。試驗結果表明：一抗的最佳稀釋度為1:50,感作時間為4℃過夜，二抗的最佳工作濃度為1:100,感作時間為37℃1h，