大葉藻提取活性物質(zhì)對仿刺參“腐皮綜合癥”病灶優(yōu)勢菌及白脊藤壺幼體附著抑制研究.pdf

1、本文主要研究了大葉藻(Zotera marina L)提取物對仿刺參(Apostichopus japonicus)“腐皮綜合癥”致病菌(C6)及病灶優(yōu)勢菌(TB、BP4、4)的抑菌活性及白脊藤壺(Balanus albicostatus Pilsbry)金星幼體附著的抑制作用。大葉藻采自青島海域，將大葉藻洗凈、陰干、粉碎、過40目篩絹得大葉藻粉末，用150ml95％的乙醇提取大葉藻粉末得粗提物，粗提物經(jīng)乙酸乙酯及去離子水萃取得提取液A

2、水相及提取液A乙酸乙酯相，配制0.1g/mL溶液用于繼續(xù)研究。 提取液A水相及乙酸乙酯相對仿刺參“腐皮綜合癥”致病菌(C6)及病灶優(yōu)勢菌(TB、BP4、4)進行抑菌活性研究，經(jīng)雙碟法抑菌，抑菌實驗結(jié)果表明提取液A水相具有抑菌活性，抑菌圈直徑分別為13.53cm(C6)、12.13cm(TB)、13.62cm(BP4)、9.22cm(4)。而提取液A乙酸乙酯相沒有抑菌活性。實驗選取金黃色葡萄球菌與受試菌對照，同時選取甲氧芐啶(TM

3、P)和磺胺異惡唑(SIZ)為提取相陽性對照。大葉藻提取液A水相的最低抑菌濃度(MIC)為12.8g/ml。經(jīng)薄層層析(TLC)純化分析，提取液A水相得到六條條帶。比較提取液A水相與提取液A水相活性組分之間的抑菌結(jié)果表明，菌4對提取液A水相各組分的抑菌活性是仿刺參四種受試菌中最敏感，而對提取液A水相最不敏感，證實活性組分之間互相拮抗，所以單一活性組分的抑菌活性比大葉藻提取液A水相的抑菌活性強。 本文繼續(xù)研究了大葉藻的提取液A水相對

4、白脊藤壺幼體的附著抑制效果。實驗藤壺為常見白脊藤壺(Balanus albicostatus Pilsbry)金星幼體。馮丹青建立的白脊藤壺金星幼體附著抑制實驗中最佳實驗條件為：溫度，30℃；鹽度，35；幼體密度，5只/ml；附著基，聚苯乙烯。研究通過建立的白脊藤壺金星幼體的實驗?zāi)Ｐ脱芯看笕~藻提取液A水相對白脊藤壺金星幼體的抑制結(jié)果，實驗設(shè)立了大葉藻提取液A水相四個濃度梯度：10、50、100、500和1000mg/L。24小時培養(yǎng)實驗

5、結(jié)果表明10mg/L體系白脊藤壺金星幼體的附著率為56.78％；50mg/L體系白脊藤壺金星幼體的附著率為47.23％；100mg/L體系白脊藤壺金星幼體的附著率為20.18％；500mg/L體系白脊藤壺金星幼體的附著率為4.32％；1000mg/L體系東方小藤壺金星幼體的附著率為0％，白脊藤壺金星幼體的附著率為0％。 大葉藻活性物質(zhì)的提取結(jié)果證實大葉藻提取物具有廣泛的活性，同時大葉藻分布廣泛，因此大葉藻的提取物具有巨大的應(yīng)用潛