甜菜嚴(yán)重曲頂病毒C2蛋白在病毒與植物互作中的功能分析.pdf

1、雙生病毒是一類植物單鏈DNA病毒，能侵染廣泛農(nóng)作物并造成嚴(yán)重的農(nóng)業(yè)減產(chǎn)。甜菜嚴(yán)重曲項(xiàng)病毒(BSCTV)是雙生病毒曲頂病毒屬的一個(gè)代表種。本研究通過遺傳學(xué)、分子生物學(xué)和生物化學(xué)等手段研究BSCTV編碼的C2蛋白在病毒與植物相互作用過程中的功能。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥侵染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)C2蛋白突變能夠引起病毒侵染病癥出現(xiàn)延遲和癥狀減輕，且病毒基因組DNA在受侵染植物中的積累減少。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草共注射實(shí)驗(yàn)證實(shí)了C2蛋白具有沉默抑制子功能。本研究通過將

2、FWA基因組片段轉(zhuǎn)入C2基因的過表達(dá)植物的實(shí)驗(yàn)表明C2抑制了宿主對(duì)FWA轉(zhuǎn)基因的de novo甲基化。亞硫酸氫鹽測(cè)序結(jié)果顯示，C2的突變還能夠引起受侵染宿主中病毒基因組的DNA甲基化程度升高。這些結(jié)果表明C2蛋白參與抑制宿主抗病毒的轉(zhuǎn)錄基因沉默過程。此外，基于酵母雙雜交系統(tǒng)，以C2作為誘餌在擬南芥cDNA文庫(kù)中篩選獲得了與之相互作用的SAMDC1蛋白，并通過體外Pull down實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其相互作用。BSCTV侵染實(shí)驗(yàn)顯示SAMDC1基