呋喃唑酮在豬體內(nèi)生理藥動學(xué)模型研究.pdf

1、獸藥在食品動物中的應(yīng)用造成了獸藥殘留的產(chǎn)生,對動物和人類帶來潛在的危害。必須要有合適的獸藥殘留監(jiān)控方法,來嚴(yán)格控制獸藥殘留的產(chǎn)生和避免其危害。生理藥動學(xué)模型結(jié)合生理學(xué)和動力學(xué)知識,用數(shù)學(xué)的方法來描述藥物在機(jī)體內(nèi)的處置過程,已經(jīng)被證實(shí)能夠預(yù)測食品動物組織中的獸藥殘留。生理藥動學(xué)模型在食品動物獸藥殘留研究中的應(yīng)用尚處于開始階段,因此開展食品動物獸藥殘留的生理藥動學(xué)模型有著非常重要的意義。呋喃唑酮在食品動物生產(chǎn)上的濫用嚴(yán)重危害著動物和消費(fèi)者的

2、健康以及正常的動物性食品進(jìn)出口貿(mào)易。目前對呋喃唑酮的監(jiān)控是被動的采用抽樣檢測的方式,不能從根本上解決呋喃唑酮?dú)埩舻膯栴}。本文以生理藥動學(xué)模型對食品動物可食性組織中的獸藥殘留進(jìn)行預(yù)測為主題,建立了呋喃唑酮?dú)埩魳?biāo)示物3-氨基-2-噁唑烷酮在各種食品動物組織中的簡單間接競爭酶聯(lián)免疫吸附定量測定方法,構(gòu)建出呋喃唑酮在豬體內(nèi)的生理藥動學(xué)模型,并對呋喃唑酮在豬的生理藥動學(xué)模型進(jìn)行了種屬間外推和化合物外推。
　　 1.定量分析方法的建立

3、>　　 以本實(shí)驗(yàn)室制備的3-氨基-2-噁唑烷酮特異性多克隆抗體為基礎(chǔ),建立了多種動物組織中呋喃唑酮?dú)埩魳?biāo)示物3-氨基-2-噁唑烷酮的組織樣品前處理及簡單間接競爭酶聯(lián)免疫吸附定量測定方法。組織樣品前處理步驟包括高溫水浴處理,酸解和苯甲醛衍生過夜,以及離心等。簡單間接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定步驟包括了包被原的包被,封閉,藥物、抗體和酶標(biāo)抗體同時(shí)孵育,顯色和終止。結(jié)果表明,建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.05～12.15μg/L范圍內(nèi)線性良好,平均IC50

4、值為0.96μg/L。在動物組織中的檢測限和定量限分別0.15μg/kg和0.3μg/kg。在各組織中添加0.3、1.0和2.0(5.0)μg/kg的回收率范圍為60％～120％,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于20％。動物實(shí)樣考核結(jié)果、儀器方法對比結(jié)果以及與其他試劑盒對比結(jié)果說明了酶聯(lián)免疫吸附測定方法能夠用于實(shí)際樣品的定量檢測。以上結(jié)果表明,建立的各種動物組織中呋喃唑酮?dú)埩魳?biāo)示物3一氨基-2-噁唑烷酮的簡單間接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定方法快速,有效,準(zhǔn)

5、確,為呋喃唑酮的殘留監(jiān)控及呋喃唑酮在動物的生理藥動學(xué)模型的建立和驗(yàn)證提供了一個有效的定量檢測工具。
　　 2.呋喃唑酮在豬體內(nèi)生理藥動學(xué)模型研究
　　 根據(jù)呋喃唑酮在豬體內(nèi)的處置特點(diǎn),假設(shè)呋喃唑酮在肝臟直接生成3-氨基-2-嗯唑烷酮,設(shè)計(jì)了以肝臟為代謝部位的包含呋喃唑酮和3-氨基-2-噁唑烷酮兩個部分的模型結(jié)構(gòu),建立了呋喃唑酮在豬體內(nèi)的生理藥動學(xué)模型,描述3-氨基-2-噁唑烷酮在豬各可食性組織中的殘留消除。模型參數(shù)通過逐

6、步擬合的方法進(jìn)行優(yōu)化。用中心差分法計(jì)算了構(gòu)建生理模型所用的參數(shù)對各組織中3-氨基-2-噁唑烷酮濃度影響的靈敏系數(shù)。靈敏性分析結(jié)果表明,吸收和代謝速率常數(shù)、腎清除率、各組織的組織-血漿分配系數(shù)等為對模型影響最大的靈敏性參數(shù)。殘留消除試驗(yàn)實(shí)測值與生理藥動學(xué)模型預(yù)測值的比較結(jié)果表明,建立的生理藥動學(xué)模型擬合的3-氨基-2-噁唑烷酮在豬血漿與各組織的殘留消除與實(shí)測值在殘留消除后段有比較良好的吻合,能夠比較真實(shí)的反映出3-氨基-2-噁唑烷酮在豬的

7、殘留消除。最后運(yùn)用蒙特卡羅分析對生理藥動學(xué)模型的不確定性進(jìn)行了分析。
　　 3.生理藥動學(xué)模型外推應(yīng)用
　　 將建立的呋喃唑酮在豬體內(nèi)生理藥動學(xué)模型進(jìn)行了動物種間外推和化合物外推,得到了呋喃唑酮在魚體內(nèi)的生理藥動學(xué)模型以及呋喃他酮在豬的生理藥動學(xué)模型。通過文獻(xiàn)收集了魚的生理解剖參數(shù),將呋喃唑酮豬體內(nèi)理藥動學(xué)模型結(jié)構(gòu)進(jìn)行了適當(dāng)調(diào)整,模擬出3-氨基-2-噁唑烷酮在魚體內(nèi)的生理藥動學(xué)模型?；衔锿馔七x擇了硝基呋喃類藥物呋喃他酮

8、,借鑒已建立的呋喃唑酮在豬的生理藥動學(xué)模型的模型結(jié)構(gòu),在不改變模型結(jié)構(gòu)和動物生理解剖參數(shù)的條件下,對化合物參數(shù)進(jìn)行了調(diào)整,外推為呋喃他酮在豬的生理藥動學(xué)模型。結(jié)果表明外推的模型能夠較好的對3-氨基-2-噁唑烷酮在魚的組織殘留消除和呋喃他酮?dú)埩魳?biāo)示物5-甲基嗎啉-3-氨基-2-噁唑烷酮在豬的組織殘留消除進(jìn)行模擬。分別對外推的模型進(jìn)行了靈敏性分析,考察了模型參數(shù)的靈敏性。靈敏性分析的結(jié)果與呋喃唑酮在豬生理藥動學(xué)模型結(jié)果相類似。