奧美拉唑?qū)W拉西坦在大鼠和人體內(nèi)的藥動學影響.pdf

1、本文分析了奧美拉唑?qū)W拉西坦在大鼠和人體內(nèi)的藥動學的影響。本研究分為三個部分：
　　第一部分：奧美拉唑?qū)W拉西坦在大鼠體內(nèi)藥動學的影響。
　　目的：近年來國內(nèi)外關于奧拉西坦藥代動力學的研究較少，已報道的血清奧拉西坦?jié)舛葴y定方法，其流動相配制復雜，血漿樣品處理操作繁瑣，成本較高。本研究擬建立大鼠血漿中奧拉西坦?jié)舛鹊腍PLC檢測方法，為奧拉西坦大鼠體內(nèi)的藥動學研究提供方法學保證。奧拉西坦在體內(nèi)分布廣泛，主要以腎臟、肝臟和肺內(nèi)的濃

2、度最高，但是至今還沒有研究報道奧拉西坦的代謝途徑。本實驗以質(zhì)子泵抑制劑奧美拉唑(omeprazole)作為肝微粒體酶CYP2C19的探針藥物，探討奧美拉唑?qū)W拉西坦在大鼠體內(nèi)藥動學的影響，從而確定奧拉西坦是否為肝微粒體酶CYP2C19的底物，為奧拉西坦臨床合理應用提供參考依據(jù)。
　　方法：色譜條件：色譜柱為Symmetry shiedTM RP18柱(4.6 mm×250mm，5μm)，流動相為乙腈：水(3.2:96.8，V/V)

3、，流速為0.8 mL·min-1，檢測波長為210 nm，柱溫為40℃，進樣量為20μL。通過對線性范圍、最低檢出濃度、回收率、精密度和樣品穩(wěn)定性的確定，進一步對方法學進行評價。健康SD大鼠16只，隨機分為對照組(奧拉西坦組)和實驗組(奧美拉唑+奧拉西坦組)，每組8只。對照組每天2次灌胃蒸餾水，實驗組每天2次灌胃奧美拉唑溶液，持續(xù)共7d后兩組大鼠一次性灌胃奧拉西坦溶液，于給藥后不同時間眼內(nèi)眥取血。應用HPLC法測定與奧美拉唑合用前后大鼠

4、體內(nèi)奧拉西坦的血藥濃度，以DAS2.1.1藥物動力學程序擬合藥動學參數(shù)，采用SPSS13.1軟件進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果：奧拉西坦的保留時間為3.6min；標準曲線方程為Y＝13041X-16156，r2=0.9997(n=7)，線性范圍2～100mg·L-1；低(5 mg·L-1)、中(20 mg·L-1)、高(60 mg·L-1)三種濃度模擬血漿樣品的絕對回收率分別為(91.1±5.17)%、(97.9±3.22)％和(98

5、.41.99)％，方法回收率分別為(96.35±3.01)%、(101.4±3.41)%和(102.2±1.37)%；日內(nèi)精密度RSD分別為2.86%、4.38%和3.54%，日間精密度RSD分別為3.25%、3.17%和3.14%；奧拉西坦血漿樣品-40℃保存30天及反復凍融3次后性質(zhì)穩(wěn)定，處理血漿樣品放置4h對測定無影響。合用奧美拉唑前后，奧拉西坦的藥動學參數(shù)AUC(0-t)，AUC(0-∞)，Tmax，Cmax，t1/2，CL/F

6、和V/F沒有顯著性變化。
　　結(jié)論：所建立HPLC測定方法簡便、準確、靈敏度高、重現(xiàn)性好，適用于大鼠血漿中奧拉西坦?jié)舛鹊臏y定。合用奧美拉唑前后，奧拉西坦的藥動學參數(shù)沒有顯著性變化。因此認為奧美拉唑?qū)W拉西坦在大鼠體內(nèi)藥代動力學無顯著性影響，初步推斷奧拉西坦不是肝微粒體酶CYP2C19的底物。
　　第二部分：奧美拉唑?qū)W拉西坦在人體內(nèi)藥動學的影響。
　　目的：本實驗的第二部分擬建立人血漿中奧拉西坦的HPLC測定方法，探討

7、奧美拉唑?qū)W拉西坦在人體內(nèi)藥動學的影響，從而進一步確定奧拉西坦是否為肝微粒體酶CYP2C19的底物，為奧拉西坦代謝途徑的研究提供參考依據(jù)。
　　方法：色譜條件：色譜柱為Symmetry shiedTM RP18柱(4.6 mm×250mm，5μm)，流動相為乙腈：水(3.2:96.8，V/V)，流速為0.8 mL·min-1，檢測波長為210 nm，柱溫為40℃，進樣量為20μL，內(nèi)標為阿昔洛韋。通過對線性范圍、最低檢出濃度、回收

8、率、精密度和樣品穩(wěn)定性的確定，進一步對方法學進行評價。8名健康志愿者隨機分成兩組，實驗組和對照組各4人。實驗組前6天不服藥，第7天早上空腹口服奧拉西坦膠囊1600mg；對照組每天口服奧美拉唑鈉腸溶片20mg，連服6天達穩(wěn)態(tài)，第7天早上空腹給予奧美拉唑鈉腸溶片20mg后1h給予奧拉西坦膠囊1600mg，兩組健康志愿者于給藥后0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10，12 h前臂靜脈取血3ml，置肝素鈉抗凝的離心管中，3000

9、 r·min-1離心5 min，取上層血漿，-40℃低溫保存。兩周洗脫期后進行交叉試驗。應用HPLC法測定與奧美拉唑合用前后健康受試者體內(nèi)奧拉西坦的血藥濃度，以DAS2.1.1藥物動力學程序擬合藥動學參數(shù)，以SPSS13.1軟件進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果：標準曲線方程為Y＝0.037X+0.0221，r2=0.9995(n=7)，線性范圍1～40mg·L-1。低、中、高三種不同濃度模擬血漿樣品的絕對回收率分別為(102.3±17.

10、58)%、(93.93±5.29)%和(93.53±3.80)%；方法回收率分別為(97.37±6.60)%、(96.91±2.50)％和(100.5±4.40)%。內(nèi)標提取回收率為(97.66±4.04)%。日內(nèi)精密度的RSD值分別為7.17％、3.21%和4.02％，日間精密度的RSD值分別為5.23%、2.15%和1.95%。奧拉西坦血漿樣品-40℃保存30d及反復凍融3次后性質(zhì)穩(wěn)定，血漿樣品處理后放置4h對測定無影響。合用奧美拉

11、唑前后，奧拉西坦的藥動學參數(shù)AUC(0-t)，AUC(0-∞)，MRT(0-t)，MRT(0-∞)，Tmax，Cmax，t1/2，CL/F和V/F均沒有顯著性變化。
　　結(jié)論：HPLC法測定人血漿中奧拉西坦?jié)舛?，方法簡便、準確，靈敏度高，重現(xiàn)性好；奧美拉唑與奧拉西坦合用后，對奧拉西坦人體內(nèi)藥代動力學無顯著性影響，初步推斷奧拉西坦不是經(jīng)由CYP2C19代謝。
　　第三部分：HPLC法測定人尿中奧拉西坦的濃度。
　　目的：

12、建立HPLC法測定人尿中奧拉西坦?jié)舛鹊姆椒?，同時測定人尿中奧拉西坦的濃度，為奧拉西坦代謝途徑的研究提供參考依據(jù)。
　　方法：以阿昔洛韋為內(nèi)標，色譜柱：Symmetry shiedTM RP18柱(4.6mm×250 mm，5μm)，流動相為乙腈：水(5:95，V/V)，流速為0.6mL·min-1，檢測波長為210 nm，柱溫為40℃，進樣量為20μL。通過對線性范圍、最低檢出濃度、回收率、精密度和樣品穩(wěn)定性的確定，進一步對方法學

13、進行評價。健康志愿者8人，試驗前禁食12h后口服奧拉西坦膠囊1600mg。用藥2h后自由飲水，收集給藥后12h和24h尿液，采用高效液相色譜法測定其血藥濃度。
　　結(jié)果：奧拉西坦和阿昔洛韋保留時間分別為5.4min和8.6min；標準曲線方程為：Y=0.0008X+0.0027，r2=0.999(n=7)，線性范圍20～2400mg·L-1；低(100 mg·L-1)、中(300 mg·L-1)、高(1200 mg·L-1)三種濃

14、度尿液樣品的絕對回收率分別為(90.38±4.93)%、(93.71±3.54)%和(95.04±2.31)%，方法回收率分別為(98.32±1.96)%、(105.0±1.74)%和(103.4±2.43)%，內(nèi)標回收率為(96.10±1.29)%。日內(nèi)精密度RSD分別為3.40%、4.76%和1.04%，日間精密度RSD分別為2.82％、3.64％和1.90%；奧拉西坦尿液樣品-40℃保存30d及反復凍融3次后性質(zhì)穩(wěn)定，處理尿液樣品