胭脂魚消化系統(tǒng)的發(fā)育及肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I動(dòng)力學(xué)特征的研究.pdf

1、胭脂魚(Myxocyprinus asiaticus)是亞口魚科在亞洲的唯一代表，被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，在地理分類上都具有重要的研究?jī)r(jià)值。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于胭脂魚的研究主要集中在其幼魚的營(yíng)養(yǎng)需求和繁殖技術(shù)等方面，尚未關(guān)于胭脂魚消化系統(tǒng)發(fā)育和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的酶動(dòng)力學(xué)的研究。因此，本文擬對(duì)胭脂魚消化系統(tǒng)的發(fā)育進(jìn)行研究，并分析胭脂魚發(fā)育階段消化酶的活性和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的酶動(dòng)力學(xué)特征的變化，以期為胭脂魚的形態(tài)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)和發(fā)育生物學(xué)提供基

2、礎(chǔ)資料。其研究結(jié)果如下:
　　 1.胭脂魚仔、稚魚消化系統(tǒng)的發(fā)生
　　 本實(shí)驗(yàn)利用組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)的方法，觀察和研究了出膜后1-56日齡的胭脂魚仔、稚魚消化道及其附屬結(jié)構(gòu)（肝臟，胰臟和膽囊）的個(gè)體發(fā)生。以投喂模式為基礎(chǔ)，并且分析了消化系統(tǒng)主要的組織學(xué)特點(diǎn)，出膜后胭脂魚仔、稚魚的發(fā)育主要分為三個(gè)階段:階段1（內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)期）:1-6日齡;階段2（混合性營(yíng)養(yǎng)期）:7-14日齡;階段3（專一性外源性營(yíng)養(yǎng)期）:15日齡以后。剛出膜

3、時(shí)，仔魚消化道是一條未分化的直管。4日齡時(shí)，仔魚口打開，此時(shí)消化道分化為口咽腔，食道和腸道。7日齡仔魚開始攝食。15日齡時(shí)卵黃囊吸收完全。56日齡稚魚顯示整齊排列的長(zhǎng)微絨毛，豐富的空泡和蛋白質(zhì)包涵體。從6日齡起，胭脂魚仔魚胰臟，肝臟和膽囊開始執(zhí)行其功能，這使得仔魚能夠攝取、消化和吸收外源性食物。我們的研究表明，與其他有功能性胃的硬骨魚相比，無(wú)胃胭脂魚消化道發(fā)育完全相對(duì)較慢。
　　 2.胭脂魚仔、稚魚消化酶活性的變化
　　

4、 本實(shí)驗(yàn)研究了胭脂魚仔、稚魚胰腺酶（胰蛋白酶和淀粉酶）和腸酶（堿性磷酸酶和氨肽酶N）從出膜到40日齡期間的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)所測(cè)定的幾種酶在剛孵化出來(lái)的仔魚當(dāng)中都能檢測(cè)到。淀粉酶活性在3至14日齡上升，這表明早期發(fā)育過(guò)程中淀粉酶不斷生成且在這個(gè)過(guò)程中碳水化合物能被很好地分解。淀粉酶比活性在14至17日齡期間下降，在20日齡時(shí)又開始上升，這可能與其攝入的餌料種類相關(guān)。胰蛋白酶比活性在14至25日齡期間發(fā)生了顯著性的變化。堿性磷酸酶活性在9至14

5、日齡期間上升，表明腸細(xì)胞刷狀緣的形成。堿性磷酸酶活性在14日齡和20日齡兩個(gè)時(shí)期達(dá)到較高值，而在20-40日齡之間保持不變?；谝陨嫌^察所得，胭脂魚消化系統(tǒng)似乎直到20日齡才完全發(fā)育成熟。此后胭脂魚具有成魚的消化模式，所以胭脂魚從20日齡開始進(jìn)行食性轉(zhuǎn)變是可行的。
　　 3.胭脂魚發(fā)育過(guò)程中肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ動(dòng)力學(xué)特征的變化
　　 從出膜到1齡，胭脂魚肝臟中總?cè)鈮A濃度隨著年齡的上升而逐漸上升。胭脂魚肝臟中總?cè)鈮A濃度的增加

6、表明肝臟組織合成肉堿的能力增強(qiáng)或吸收肉堿的能力提高。胭脂魚從68日齡至1齡期間，肌肉組織中的游離肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度都逐漸增加。肌肉組織中的游離肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度的增加是為了促進(jìn)脂肪酸的β-氧化，從而產(chǎn)生大量能量，滿足胭脂魚發(fā)育期間肌肉的快速增長(zhǎng)對(duì)能量的需求。腸道中乙酰肉堿濃度和總?cè)鈮A濃度在發(fā)育期間波動(dòng)較大，這是因?yàn)樵陔僦~發(fā)育期間，腸道不斷發(fā)育成熟，經(jīng)歷了一系列的變化。胭脂魚肝臟組織中的AC/FC之比剛出膜時(shí)為1.03，4月齡時(shí)上升

7、至1.61，但1齡時(shí)顯著下降，但2齡時(shí)達(dá)到1.73，顯著高于1齡時(shí)。胭脂魚肌肉組織中的AC/FC之比最高時(shí)是在68日齡時(shí)，最低時(shí)是在4月齡時(shí)。剛出膜的胭脂魚仔魚的CPTⅠ的表觀Km值（以肉堿做底物）為4.51±0.16 mM，肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的動(dòng)力學(xué)參數(shù)Vmax為4.53±0.09nmol/min/mg protein。腸道組織中的肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的動(dòng)力學(xué)參數(shù)Vmax隨著年齡增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)。胭脂魚不同時(shí)期不同組織（肝臟、肌肉和腸道）