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文檔簡介
1、雞傳染性支氣管炎(Avian Infectious Bronchitis，IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus， IBV)引起的一種急性、高度接觸性傳染病。由于IBV核衣殼（N）蛋白是其主要的結(jié)構(gòu)蛋白，具有很強的免疫原性，是IBV誘導體液免疫、細胞免疫應答的重要免疫原，而且比較保守，因此適宜用作檢測IBV特異性抗體的抗原。
本研究參照GenBank中IBV N基
2、因序列設計一對特異性引物，提取IBV的RNA進行RT-PCR擴增，并克隆至pGEM-T Easy載體中，轉(zhuǎn)化E.coli DH5α感受態(tài)細胞，獲得重組質(zhì)粒pGEM-T-N，進行序列測定。將目的片段經(jīng)EcoR I和Xho I雙酶切，克隆入經(jīng)同樣處理的大腸桿菌原核表達質(zhì)粒pET-28a（+），轉(zhuǎn)化BL21(DE3)感受態(tài)細胞并用IPTG進行誘導表達，通過鎳離子親和樹脂對其進行純化。SDS-PAGE結(jié)果表明，IBV N基因在BL21(DE3)
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