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文檔簡介
1、目的:1.建立豬急性心肌梗死模型:2.觀察人胚胎生殖細胞(human embryonicgerm cells,hEGCs)移植到豬急性心肌梗死模型心肌中的存活及分化；3.探討人EG細胞移植心肌組織后血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達及意義。
方法:取5-10周流產(chǎn)人胚胎生殖腺嵴,采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人EG細胞。單獨培養(yǎng)人EG細胞,同時將人EG細胞與胚胎心
2、肌細胞共培養(yǎng)以模擬心肌微環(huán)境,分別檢測二者第3天與第9天培養(yǎng)上清液中VEGF的表達水平。通過結扎冠狀動脈左前降支的方法建立豬急性心肌梗死(AMI)模型,分為移植組、對照組。移植組為將體外擴增的人EG細胞注射到豬梗死心肌周邊,對照組用同樣方法注射無菌PBS。移植后2周處死豬,用免疫組織化學方法以鼠抗人細胞核抗體MAB1281作示蹤劑,檢測移植細胞的存活情況,并觀察轉錄因子GATA-4、連接蛋白Cx43在移植細胞的表達。
結果
3、:體外培養(yǎng)獲得大量人EG細胞,人EG細胞與胚胎心肌細胞共培養(yǎng)組第3天與第9天上清液中VEGF含量分別較人EG細胞單獨培養(yǎng)組高,差別有顯著意義(P<0.05)；成功建立豬急性心肌梗死模型,結扎冠脈后可見心電圖典型的心肌梗死變化；免疫組化顯示移植組抗人細胞核抗體MAB1281、轉錄因子GATA-4、連接蛋白Cx43均呈陽性表達,對照組為陰性表達。
結論:在豬急性心肌梗死模型建立后經(jīng)心外膜移植人EG細胞,人EG細胞在宿主心肌存活
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