孤雌胚胎干細(xì)胞移植治療小鼠心肌梗死的研究.pdf

1、心肌梗死(MI)是冠心病中最嚴(yán)重的一種表現(xiàn)，致死率和死亡率極高，嚴(yán)重威脅著人類的健康。臨床上對(duì)MI的療法雖然能極大地降低死亡率，但因缺血導(dǎo)致的大量心肌細(xì)胞壞死不可逆轉(zhuǎn)，病人的預(yù)后很不理想。干細(xì)胞研究的發(fā)展給MI的治療帶來(lái)了新的方向，干細(xì)胞移植已成為治療MI的有效手段。大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)表明，干細(xì)胞移植到缺血心肌后可有效減小梗死面積、抑制心室重構(gòu)并顯著改善心臟功能。
　　 胚胎干細(xì)胞(ESCs)由于其發(fā)育上的全能性一直被視為

2、干細(xì)胞治療中理想的細(xì)胞來(lái)源，將ESCs移植到缺血心肌中雖然能再生心肌細(xì)胞并發(fā)揮對(duì)損傷心肌的修復(fù)作用，但是有生成畸胎瘤的危險(xiǎn)。孤雌胚胎干細(xì)胞(pESCs)可為ESCs提供另外一種來(lái)源，與ESCs具有類似的分化潛能，因而也是一種良好的干細(xì)胞來(lái)源。pESCs分離自人工激活的卵子發(fā)育成的孤雌囊胚，單性來(lái)源使其具有低免疫源性，并且可繞過(guò)一些倫理爭(zhēng)議而被接受。目前還沒(méi)有關(guān)于pESCs移植用于治療MI的相關(guān)報(bào)導(dǎo)，我們旨在研究pESCs直接移植到小鼠梗

3、死心臟后的分化情況、其對(duì)缺血心肌的修復(fù)作用、對(duì)心室重構(gòu)和心功能的影響以及其直接移植的安全性等問(wèn)題，并探討相關(guān)機(jī)制。
　　 本論文應(yīng)用小鼠心肌梗死模型來(lái)探究pESCs對(duì)缺血心肌的修復(fù)作用，在實(shí)驗(yàn)中我們?cè)O(shè)置了分離自受精卵來(lái)源的ESCs移植組為治療的對(duì)照組。通過(guò)結(jié)扎小鼠(n=89)左前降支冠狀動(dòng)脈致心肌梗死，然后分別移植2.0×105pESCs或ESCs，不治療組注射等量的生理鹽水，同時(shí)設(shè)不結(jié)扎LAD的假手術(shù)組(n=21)。根據(jù)不同研

4、究目的，動(dòng)物分別于7天、14天、30天和90天處死。我們發(fā)現(xiàn)，移植7天時(shí)，pESCs可有效增加心肌局部一些促血管生成因子的表達(dá)，并顯著抑制梗死區(qū)內(nèi)的白細(xì)胞浸潤(rùn)。較長(zhǎng)期研究顯示，移植的pESCs可遷移到梗死區(qū)內(nèi)，并在缺血心肌內(nèi)環(huán)境中可分化成心肌樣細(xì)胞和血管樣細(xì)胞，從而參與損傷心肌的修復(fù)。對(duì)于心臟功能的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，pESC組的心功能得到了顯著的改善，并可維持較長(zhǎng)時(shí)期。組織學(xué)分析表面移植pESCs可有效減小梗死面積，并可抑制左室膠原沉積、室腔膨

5、大和心肌肥大等心梗后的心室重構(gòu)。血管化分析顯示pESCs移植可顯著增強(qiáng)缺血心肌內(nèi)的血管密度，進(jìn)而改善梗死區(qū)的血供。值得注意的是，直到30天，移植pESCs的小鼠心臟中未發(fā)現(xiàn)有畸胎瘤生成，而ESCs移植組則生成較高比率的畸胎瘤(6/34)，但是在長(zhǎng)期研究中（90天），pESCs治療組出現(xiàn)2例心肌內(nèi)畸胎瘤，說(shuō)明pESCs直接移植也有一定的安全隱患。
　　 總之，本論文首次闡明了pESCs有望作為治療心肌梗死的良好干細(xì)胞來(lái)源，其移植可