對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)膜蛋白VP13A的鑒定及VP31和VP33與宿主細(xì)胞相互作用的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、對(duì)蝦白斑綜合癥病毒是一種具有囊膜、無(wú)包涵體的桿狀雙鏈環(huán)狀DNA病毒，也是嚴(yán)重危害對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的最主要病原。本文圍繞病毒膜蛋白進(jìn)行了研究。主要包括以下三個(gè)部分： (1)質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)病毒膜蛋白VP13A是ORF wsv284的編碼產(chǎn)物。隨后在E.coli BL-21菌株中表達(dá)純化了GST-VP13A-His并制備了相應(yīng)的抗血清。利用GST pull-down和Far-Westernblotting分析發(fā)現(xiàn)VP13A和另一個(gè)病毒膜蛋白V

2、P24有相互作用。 (2) WSSV的膜蛋白VP31和VP33都具有RGD序列，推測(cè)該結(jié)構(gòu)域在這兩種蛋白和宿主細(xì)胞的結(jié)合中起重要作用。分別可溶表達(dá)并純化得到這兩種全長(zhǎng)蛋白以及RGD序列被RDG所替代的突變蛋白。間接免疫熒光染色和RGD競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)顯示，只有野生型蛋白能結(jié)合螯蝦血細(xì)胞，而這種結(jié)合又能被含RGD序列的多肽抑制，證實(shí)了VP31和VP33對(duì)宿主細(xì)胞的粘附是由RGD結(jié)構(gòu)域所介導(dǎo)的。 (3)病毒具有自我組裝的機(jī)制，一

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