腫瘤標志物醫(yī)學生學習用

1、第十六章腫瘤標志物,衛(wèi)生部“十二五” 規(guī)劃教材 全國高等醫(yī)藥教材建設(shè)研究會規(guī)劃教材,中南大學湘雅醫(yī)學院徐克前,教學內(nèi)容,學習要求,掌握腫瘤標志物的概念及臨床意義,掌握臨床上常用的一些重要腫瘤標志物及臨床應用評價,熟悉腫瘤標志物在一些常見腫瘤的診斷、治療及預后中的臨床應用,一、腫瘤（tumor）是人體器官組織的細胞在外來和內(nèi)在的有害因素長期作用下所產(chǎn)生的一種以細胞過度增殖為主要特點的新生物。

2、腫瘤分類：良性腫瘤（benign tumor） 惡性腫瘤（malignant tumor ）,第一節(jié) 概述,腫瘤發(fā)生的危險因素,環(huán)境因素： 化學因素：烷化劑等 物理因素：輻射等 生物因素：病毒等,遺傳因素：遺傳性腫瘤：遺傳性或家族性腫瘤綜合征腫瘤遺傳易感性,二、腫瘤標志物的發(fā)展史,腫瘤標志物的發(fā)展的4個階段： 第一階段：腫瘤標志物的開創(chuàng)期 第二階段：腫瘤標志物的發(fā)展期 第三階段：腫

3、瘤標志物的成熟期 第四階段：腫瘤標志物的新時期,三、腫瘤標志物的概念,（一）腫瘤標志物（tumor marker, TM）是指由腫瘤細胞直接產(chǎn)生或由非腫瘤細胞經(jīng)腫瘤細胞誘導后而合成的物質(zhì)。 檢測標本：體液標志物：血液、尿液等細胞標志物：腫瘤細胞,（二）理想的腫瘤標志物條件,①敏感性高，可檢測出所有的腫瘤患者；②特異性好，可以準確區(qū)分腫瘤患者和非腫瘤患者；③具有器官特異性，能有助于確定是何種腫瘤；④腫瘤標志物的濃度和

4、腫瘤大小、腫瘤轉(zhuǎn)移、惡性程度有關(guān)；⑤最好是存在于血液等體液中，易于檢測。,（三）腫瘤標志物的分類,根據(jù)腫瘤標志物的特異性，可將其分為兩類：（1）腫瘤特異性標志物 (specific tumor markers)（2）腫瘤非特異性標志物 (nonspecific tumor markers),根據(jù)腫瘤標志物的化學特性分為：,①胚胎抗原類腫瘤標志物；②糖類抗原腫瘤標志物；③激素類腫瘤標志物；④受體

5、類腫瘤標志物；⑤蛋白質(zhì)類腫瘤標志物；⑥酶類腫瘤標志物；⑦基因類腫瘤標志物。,四、腫瘤標志物的檢測方法,1.生物化學方法 酶法、比色法、熒光法、 配體-受體結(jié)合法等免疫學方法：酶免疫吸附法(ELISA)、放射免疫分析法（RIA）、化學發(fā)光法(CLIA) 、電化學發(fā)光法(ECLIA)、免疫放射分析法（IRMA）、免疫組織化學法（IHC）等分子生物學方法：基因突

6、變檢測、熒光原位雜交（FISH）等,五、腫瘤標志物檢測影響因素,1.樣品的影響2.藥物的影響3.人抗鼠抗體（human anti-mouse antibodies，HAMA）問題4.高濃度的鉤狀效應(hook effect),5.影響腫瘤標志物濃度的生物學因素 ①腫瘤的大小、細胞數(shù)的多少、腫瘤的擴散及分級； ②腫瘤標志物的合成速度及釋放速度； ③腫瘤血液供應狀況； ④腫瘤的壞死的程度； ⑤腫

7、瘤標志物的分解速度； ⑥抗體復合物形成的影響； ⑦年齡的影響。,六、腫瘤標志物的臨床意義,1.用于高危人群惡性腫瘤的篩查2.用于腫瘤的輔助診斷和鑒別診斷3.用于腫瘤的預后判斷4.用于腫瘤的療效判斷和治療監(jiān)測5.評估治療方案,第二節(jié) 常見的腫瘤標志物及其應用評價,一、胚胎抗原類腫瘤標志物（一）甲胎蛋白(α-fetoprotein, AFP)【檢測方法】放射免疫法(RIA)、化學發(fā)光法(CLIA)、電化學發(fā)光

8、法(ECLIA)、酶免疫吸附法(ELISA)、金標記免疫滲濾法等。目前常用的是ELISA和CLIA。,【參考區(qū)間】 正常人血清＜20μg/L?！九R床意義】1.原發(fā)性肝細胞癌最敏感、特異的標志物；2.病毒性肝炎、肝硬化患者AFP有不同程度的升高；3. AFP胚胎細胞腫瘤如睪丸癌、畸胎瘤等時升高；4. AFP在胃癌、膽囊癌、胰腺癌等時升高；5.婦女妊娠 后，血清 AFP開始升高，分娩后恢復正常。,【評價】1. AFP濃度和肝癌

9、大小有關(guān)；2. AFP假陽性的情況主要見于良性肝??；3. AFP和hCG結(jié)合用于為精原細胞瘤分型和分期。,（二）AFP異質(zhì)體L3,AFP異質(zhì)體(AFP variant)：是指氨基酸序列相同而糖鏈結(jié)構(gòu)不同的AFP。亞型分類： AFPL1、L2、L3三種亞型（扁豆凝集素） AFPC1、C2兩種亞型（刀豆凝集素） AFPP1、P2、P3、P4、P5五種亞型

10、 （云豆凝集素）,【檢測方法】 免疫熒光液相結(jié)合分析（Immunofluorescent liquid-phase binding assay），可同時檢測AFP和AFP-L3，再計算AFP-L3占總AFP的百分比?！緟⒖紖^(qū)間】血清0.5%～9.9%?！九R床意義】 1. AFP-L3可用于鑒別AFP陽性的良、惡性肝??； 2.原發(fā)性肝細胞癌的早期診斷。,（三）癌胚抗原(carcinoembr

11、yonic antigen，CEA),【檢測方法】 放射免疫法(RIA)、化學發(fā)光法(CLIA)、電化學發(fā)光法(ECLIA)、酶免疫吸附法(ELISA)、金標記免疫滲濾法等。 目前常用的是ELISA和CLIA。【參考區(qū)間】 血清＜3 μg/L（非吸煙者） 或＜5 μg/L（吸煙者）。,【臨床意義】1.血清CEA升高主要見于結(jié)腸癌、直腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等，其他惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；

12、2.血清CEA連續(xù)隨訪檢測，可用于惡性腫瘤手術(shù)后的療效觀察及預后判斷，也可用于對化療病人的療效觀察；3.腸道憩室炎、直腸息肉、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎和肺部疾病也有不同程度的升高；4.吸煙者中約有3.9％的人CEA＞5μg/L。,二、糖類抗原腫瘤標志物,糖類抗原 (carbohydrate antigen, CA)： ①高分子粘蛋白抗原：主要包括CA 125、CAl5–3、CA549、CA27–29等； ②血型類抗原：包括CA

13、l9–9、CAl9-5、CA50、CA 72–4、CA 242等。糖類抗原的檢測方法：化學發(fā)光法(CLIA)、電化學發(fā)光法(ECLIA)、酶免疫吸附法(ELISA)、免疫放射分析法（IRMA）等。目前常用的是ELISA和CLIA。,（一）糖類抗原125 （carbohydrate antigen 125，CA125）【參考區(qū)間】血清＜35kU/L?！九R床意義】1.卵巢癌病人血清CA 125水平明顯升高，檢出率可達7

14、0%～90%；2.其它非卵巢惡性腫瘤也有一定的陽性率，如乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、大腸癌；3.非惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、卵巢囊腫、胰腺炎、肝炎、肝硬化等疾病也有不同程度升高。,【評價】1. CA125首選用于協(xié)助診斷卵巢癌、估計療效和監(jiān)測病程，亦可作為CA 19-9之后胰腺癌診斷的次選標志物；2.卵巢上皮癌的術(shù)前CA 125水平與預后明顯相關(guān)；3.本項目不宜用作卵巢癌的篩查，也無早期診斷價值。,（二）糖類抗原15

15、-3 （carbohydrate antigen 15-3，CA 15-3）【參考區(qū)間】正常血清＜30kU/L?！九R床意義】1.乳腺癌患者常有CA 15-3升高；2.其他惡性腫瘤，如肺癌、腎癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、原發(fā)性肝癌等，也有不同程度的陽性率；3.肝臟、胃腸道、肺、乳腺、卵巢等非惡性腫瘤疾病，也有不同程度升高。,【評價】1. CA 15-3是轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者病程監(jiān)測的有價值的指標；2. CA

16、 15-3對乳腺癌的臨床靈敏度與腫瘤的臨床分期、腫瘤大小有關(guān)；3. CA 15-3對蛋白酶和神經(jīng)酰胺酶很敏感，因此血清標本應避免微生物的污染，以免影響測定結(jié)果。,（三）糖類抗原19-9 （carbohydrate antigen 19-9，CA 19-9）【參考區(qū)間】血清＜37kU/L?！九R床意義】1.胰腺癌、膽囊癌、膽管癌時，血清 CA 19-9水平明顯升高，陽性率高，是它們的首選腫瘤標志物；2.其他腫瘤，如胃癌、

17、肝癌、直腸癌、乳腺癌等，CA19-9也升高，但是陽性率較低；3.急性胰腺炎、膽囊炎、膽汁淤積性膽管炎、肝硬化、肝炎等，CA 19-9也有不同程度的升高。,【評價】1. CA 19-9是既無腫瘤特異性又無器官特異性的抗原。它主要用于胰腺、肝膽和胃癌患者的診斷、治療監(jiān)測和預后判斷；2.在胰腺癌中，CA 19-9濃度升高的程度和發(fā)生率與腫瘤位置、腫瘤范圍有關(guān)，與是否轉(zhuǎn)移有關(guān)，但與組織學分型無關(guān)。,（四）糖類抗原72-4 （c

18、arbohydrate antigen 72-4，CA72-4）【參考區(qū)間】血清＜6kU／L?！九R床意義】1. CA72-4在胃癌、卵巢癌時升高；2.其他腫瘤如結(jié)腸癌、胰腺癌和非小細胞性肺癌，CA72-4含量也可見增高。,【評價】1. CA 72-4是監(jiān)測胃癌患者病程和療效的首選腫瘤標志物，靈敏度優(yōu)于CA19-9和CEA，若三者聯(lián)合檢測效果更好；2.作為CA 125之后的次選標志物，對于卵巢癌有較高的臨床靈敏度；3.相對于

19、CEA和CA 19-9，CA72-4在良性疾病中有較高的臨床特異性。,三、激素類腫瘤標志物,激素分類： 正位激素(entopic hormone) 異位激素(ectopic hormone),（一）降鈣素（calcitonin，CT）【檢測方法】RIA、CLIA?！緟⒖紖^(qū)間】血清＜100ng／L?！九R床意義】1.甲狀腺髓樣癌患者血清降鈣素明顯升高，而且由于降鈣素的半減期較短，因此可作為觀察臨床療效的標志物；2.部分肺癌

20、、乳腺癌、胃腸道癌及嗜鉻細胞癌患者可因為高血鈣或產(chǎn)生異位分泌而使血清降鈣素增加。,【評價】 1.CT是用于診斷和監(jiān)測甲狀腺髓樣癌的特異而敏感的腫瘤標志物。 2.甲狀腺髓樣癌手術(shù)前CT濃度高，手術(shù)后數(shù)小時內(nèi)CT下降，如手術(shù)后CT值長期持續(xù)增高，提示腫瘤切除不完全或有可能轉(zhuǎn)移。,（二）人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin，HCG）【檢測方法】一般采用ELISA、RIA、CLIA，也可

21、用時間分辨熒光免疫分析法。 【參考區(qū)間】正常男性血清＜5.0 U/L；女性＜7.0 U/L（絕經(jīng)前），＜10.0 U/L(絕經(jīng)后）。,【臨床意義】1.女性葡萄胎、絨毛膜癌HCG異常升高，可高達100萬U／L。睪丸母細胞瘤、精原細胞瘤HCG陽性，胚胎性腫瘤通常AFP和HCG均為陽性；2.其他腫瘤hCG也可見升高，如胃腸道惡性腫瘤、肝癌、乳腺癌和肺癌；3.良性疾病如肝硬化、十二指腸潰瘍、炎癥也可見HCG輕度異常。,【評價】1.

22、 HCG主要用于胚胎細胞腫瘤的診斷、隨訪和療效監(jiān)測。也適合于罹患胚胎細胞瘤風險增高的患者的篩檢；2.在睪丸母細胞瘤患者中HCG應該與AFP聯(lián)合檢測，因為兩種腫瘤標志物都是獨立分泌且分別與不同類型腫瘤有關(guān)。,四、受體類腫瘤標志物,（一）雌激素受體（estrogen receptor, ER） 孕酮受體（progesterone receptor, PR）【檢測方法】 ER和PR的檢測方法包括配體-受體結(jié)合法

23、、酶免疫法和免疫組織化學的方法?！緟⒖紖^(qū)間】 一般以10 fmol/mg蛋白為“陽性”或“陰性”的臨界水平。,【臨床意義】1.確定乳腺癌患者最合適的治療；2.對于乳腺癌患者預后的判斷有意義?！驹u價】1.配體-受體結(jié)合法是目前測定ER、PR最準確的方法，但是操作比較繁瑣。酶免疫法和免疫組織化學的方法相對簡單，臨床上常用；2. ER、PR檢測需用癌組織作為標本，注意盡量避免鄰近的脂肪組織的混入。,（二）表皮生長因子受體

24、 (epithelial growth factor receptor, EGFR)檢測方法】 EGFR的檢測方法包括配體-受體結(jié)合法、酶免疫法和免疫組織化學的方法?！緟⒖紖^(qū)間】 陽性,【臨床意義】 EGFR陽性，預示其過表達，結(jié)直腸癌、非小細胞肺癌、頭頸部腫瘤、乳腺癌等腫瘤的預后差?！驹u價】1. EGFR的是否陽性，除了直接測定蛋白質(zhì)水平外，還可以用FISH等技術(shù)檢測癌組織細胞EGFR基因的拷貝數(shù)；2. EGFR基

25、因突變的檢測對臨床藥物治療方案的選擇有意義。,五、蛋白類腫瘤標志物,（一）細胞角蛋白19片段 (cytokeratin 19 fragment, cyfra 21-1)【檢測方法】 Cyfra21-1的檢測方法包括ELISA、IRMA、CLIA和ECLIA等?！緟⒖紖^(qū)間】 血清Cyfra21-1＜3.6μg/L。,【臨床意義】1. CYFRA 21-1是非器官特異性的，陽性見于所有的實體腫瘤，如非小細胞肺癌的陽性率為

26、40％～64％，此外，在膀胱癌、前列腺癌、卵巢癌、大腸癌、胰腺癌等亦有不到50％的臨床靈敏度；2.CYFRA 21-1升高亦可見于良性疾病，在肺部疾病、胃腸道疾病、婦科疾病、泌尿系統(tǒng)疾病和腎功能不全患者中亦可見到CYFRA 21-1輕微升高。,【評價】1. CYFRA 21-1是非小細胞肺癌的首選標志物，而NSE是小細胞肺癌的首選標志物，將CYFRA 21-1和NSE聯(lián)合檢測，可以提高診斷的靈敏度；2. CYFRA 21-1在肺癌

27、患者的病程監(jiān)測和治療控制方面是敏感且特異的指標。,（二）組織多肽抗原 （tissue polypeptide antigen，TPA）【檢測方法】RIA、ELISA【參考區(qū)間】血清＜80U/L?！九R床意義】1.許多腫瘤都可見到血清TPA升高，但主要見于膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌和消化道惡性腫瘤；2.肝炎、肝硬化、糖尿病、胰腺炎、肺炎和胃腸道疾患也可見到血清中TPA升高；3.妊娠期女性TPA升高，分娩5天后TPA下降。,（三）

28、鱗狀細胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）【檢測方法】RIA、ELISA【參考區(qū)間】血清＜1.5μg/L?！九R床意義】1.鱗癌，如子宮頸癌、肺癌、頭頸部癌、鼻咽癌時，血清中SCCA升高，其濃度隨病期的加重而增高；2.肝炎、肝硬化、胰腺炎、肺炎、結(jié)核、腎功能衰竭、銀屑病等，SCCA也有一定程度的升高。,【評價】1. SCCA不是鱗狀細胞癌的特異性腫瘤標志物，不適合于篩查；2.

29、在宮頸鱗狀細胞癌中，SCCA的臨床靈敏度大于CEA。,（四）核基質(zhì)蛋白22 （nuclear matrix protein 22，NMP22)【檢測方法】主要是ELISA?！緟⒖紖^(qū)間】尿液：NMP22＜6U/ml?！九R床意義】1.膀胱癌的輔助診斷；2.監(jiān)測膀胱癌的治療和復發(fā)。,六、酶類腫瘤標志物,（一）堿性磷酸酶 （ alkaline phosphatase, ALP）【檢測方法】ALP測定采用速率

30、法，ALP同工酶的測定采用電泳法?！緟⒖紖^(qū)間】速率法（37℃）健康男性：1～12歲，＜500U/L；12～15歲，＜750U/L；25歲以上，40～150U/L。健康女性：1～12歲，＜500U/L；15歲以上，40～150U/L。,【臨床意義】1. ALP升高最常見于原發(fā)性和繼發(fā)性肝癌，ALP、特別肝型同工酶判斷肝癌轉(zhuǎn)移好于其他生物化學指標；2.胎盤型ALP(PALP)，卵巢癌、精原細胞癌、胃腸道癌和霍奇金氏病時升高；3.

31、 ALP骨同功酶(BALP)是判斷癌癥骨轉(zhuǎn)移的很好標志。,【評價】 血清ALP主要來源于肝臟及骨，在肝膽疾病、骨骼疾病時升高。一般情況下胎盤型很少，血清中幾乎為0，其升高往往預示著肺、卵巢、子宮和胃腸道癌。,（二）乳酸脫氫酶 （lactate Dehydrogenase, LD）【檢測方法】LD活性測定可采用分別以乳酸、丙酮酸為底物的速率法。LD同工酶可采用電泳法?！緟⒖挤秶拷】党扇?，乳酸為底物（37℃），10

32、9～245U/L；丙酮酸為底物（37℃），200～380U/L。,【臨床意義】1.多種腫瘤，如肝癌、非霍奇金淋巴瘤、急性白血病、神經(jīng)母細胞瘤、乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌和肺癌，在多種疾病如腎炎、肝炎、心肌損傷，都能升高；2.由于各組織中的LD含量較血清高上千倍，微量損傷也足以引起血清LD的升高，故敏感性較高；3.用于估計癌癥患者有無轉(zhuǎn)移和向何處轉(zhuǎn)移。,（三）神經(jīng)元特異性烯醇化酶 （neuron specific enolase

33、，NSE ）【檢測方法】 ELISA、IRMA和ECLISA等。 【參考區(qū)間】 血清＜15μg/L。 【臨床意義】1.肺癌、神經(jīng)母細胞瘤、精原細胞瘤等腫瘤升高；2.神經(jīng)內(nèi)分泌細胞腫瘤，如嗜鉻細胞瘤、胰島細胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤等患者血清內(nèi)NSE也可增高。3.良性肺病、腦部疾病時升高。,【評價】1. NSE是小細胞肺癌的首選腫瘤標志物，比NSE、cyfra21-1、SCCA、CEA好；2.神經(jīng)母細胞瘤患者NSE

34、水平異常增高，而Wilms瘤升高較少，因此測定NSE的水平可用于上述疾病的診斷和鑒別診斷。,（四）前列腺特異性抗原 （prostate specific antigen，PSA）【檢測方法】測定的方法很多，包括RIA、CLIA、ECLIA、ELISA、IRMA、金標記免疫滲濾法等?！緟⒖紖^(qū)間】 血清：t-PSA＜4.0 μg/L； f-PSA＜0.8 μg/L；

35、 f-PSA/tPSA比值＞0.25。,【臨床意義】1.前列腺癌患者可見血清PSA升高；2.前列腺增生、前列腺炎、腎臟和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清t-PSA水平輕度升高（一般在4.0～10. 0μg/L），f-PSA也會輕度升高；3.其他惡性腫瘤如腎癌、膀胱癌、腎上腺癌、乳腺癌等，也有不同程度的陽性率。,【評價】1. PSA是前列腺癌篩查非常有價值的指標。大于50歲的男性應定期檢測PSA；

36、2.前列腺癌與良性前列腺增生的鑒別診斷。t-PSA小于4.0μg/L機體正常；t-PSA大于10.0μg/L，前列腺癌的可能性大；t-PSA在4.0～10.0μg/L之間的灰色區(qū)間，可能是前列腺癌，也可能是前列腺增生，需要進行鑒別診斷。,（五）α-L-巖藻糖苷酶 （alpha-L-fucosidase，AFU）【檢測方法】 AFU的測定方法有熒光法和比色法兩類?！緟⒖紖^(qū)間】 血清 （27.

37、1±12.8） U／L。,【臨床意義】1.原發(fā)性肝癌患者血清中 AFU活性明顯升高，明顯高于轉(zhuǎn)移性肝癌等其它惡性疾病和肝硬化等其他肝??；2.其他惡性腫瘤，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等也有部分病例AFU升高；3.慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降，動態(tài)監(jiān)測有助于與肝癌的鑒別；4.妊娠期間，AFU升高，分娩后迅速下降。,【評價】1. AFU對原發(fā)性肝癌的敏感性高于AFP，特異性則差于AFP；2.

38、雖然AFU檢測在理論上講有診斷價值，但是目前AFU的檢測試劑盒質(zhì)量欠佳，嚴重影響其診斷價值的發(fā)揮。,七、基因類腫瘤標志物,原癌基因的激活方式主要有：①基因突變引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變；②基因擴增導致基因拷貝數(shù)增加；③染色體易位使癌基因轉(zhuǎn)錄水平升高或其表達蛋白結(jié)構(gòu)異常；④病毒基因插入誘導癌基因轉(zhuǎn)錄。,抑癌基因的失活主要方式包括：①基因突變 ②雜合性缺失（LOH） ③啟動子區(qū)甲基化異常,（一）ras基因【參考區(qū)間】

39、 正常人體組織ras基因的結(jié)構(gòu)正常?！九R床意義】 ras基因突變多見于胰腺癌、肺癌、大腸癌、卵巢癌、甲狀腺癌、肝癌、精原細胞瘤、腎癌等，大約有30％的人類腫瘤中可以發(fā)現(xiàn)ras突變。,【評價】ras基因突變與許多腫瘤有關(guān)，而且H-ras、K-ras和N-ras等不同類型與腫瘤的關(guān)系也存在差異，H-ras主要與甲狀腺癌、腎癌有關(guān)，K-ras主要與甲狀腺癌、肝癌、精原細胞瘤有關(guān)，而N-ras主要與胰腺癌、肺癌、大腸癌、卵巢癌、甲狀

40、腺癌有關(guān)。,（二）Her-2/neu基因【檢測方法】 檢測Her-2/neu基因的擴增和過表達的方法有FISH和免疫組織化學（IHC）法。 也可用ELISA法直接檢測血清中的Her-2/neu蛋白?！緟⒖紖^(qū)間】 Her-2/neu基因拷貝數(shù)為2（FISH） Her-2/neu基因表達陰性（IHC） 血清：0.4-25μg/L（ELISA）,【臨床意義】1. Her-2/neu基因的擴增和過表達主

41、要見于乳腺癌，此類乳腺癌患者預后較差、極易復發(fā)、存活期短；2.部分卵巢癌和胃腸道腫瘤也存在Her-2/neu基因的擴增和過表達。,【評價】1. FISH和免疫組織化學（IHC）法是目前臨床檢測Her-2/neu基因的擴增和過表達的主要方法，此兩種方法一致性高，可根據(jù)條件選擇使用，但是操作均比較繁瑣。2.另外有發(fā)光原位雜交（chromogenic in situ hybridization ，CISH) 和銀原位雜交（silver

42、in situ hybridization，SISH)法可替代FISH。,（三）視網(wǎng)膜母細胞瘤（retinoblastoma，Rb）基因【參考區(qū)間】 正常人體組織Rb基因的結(jié)構(gòu)正常。【臨床意義】 Rb基因存在突變：1. 家族性視網(wǎng)膜母細胞瘤或散發(fā)性家族性視網(wǎng)膜母細胞瘤的診斷。2. 骨肉瘤、膀胱癌、乳腺癌、肺癌等。,（四）p53基因【參考區(qū)間】 p53基因正常?！九R床意義】1. p53基因突變常見于家族性癌癥綜合征Li-

43、Fraumeni綜合征，以及許多散發(fā)性腫瘤，包括結(jié)腸癌、膀胱癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、頭頸部癌、肝癌等；2. p53基因突變還可用于腫瘤預測，是獨立的預測因子。,第三節(jié) 腫瘤標志物的臨床應用,一、胃癌的實驗室診斷1.胃癌的常規(guī)實驗室檢驗 ①糞便隱血試驗；②胃癌可致失血性貧血，患者血紅蛋白、鐵蛋白、鐵等可降低，部分患者因B12吸收障礙致大細胞貧血，對近期出現(xiàn)原因不明貧血伴糞便隱血試驗持續(xù)陽性者應特別注意；③幽門螺桿菌

44、的檢測。,2.胃癌的腫瘤標志物檢驗 與胃癌相關(guān)的腫瘤標志物包括：CA72-4、CEA、CA19-9等。①CA72-4對胃癌的特異性較高，是胃癌的首選標志物，與CEA聯(lián)用可提高檢測的敏感性。②ras基因激活，早期胃癌陽性率為11％，晚期可達50％，ras基因激活還與腫瘤侵犯的深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。,二、肝癌的實驗診斷,1.肝癌的常規(guī)實驗室檢驗 ：①血清ALT水平明顯升高；②血清中膽紅素濃度增高；③γ-GT釋放入血致血清中濃度

45、升高；④血清ALP升高；⑤在乙型肝炎或丙型肝炎基礎(chǔ)上發(fā)展成為肝癌的患者，血清HBsAg、抗HCV可陽性；⑥其他指標，如血清鐵蛋白、α1-酸性糖蛋白、β2-微球蛋白等濃度在肝癌時均可升高。,2.肝癌的腫瘤標志物檢驗 與肝癌相關(guān)的腫瘤標志物包括AFP及異質(zhì)體、AFU、ALP及同工酶、γ-GT及同工酶等。①AFP常用作肝細胞癌的檢測和肝癌高危人群的監(jiān)測，約有70％～90％的原發(fā)性肝癌患者AFP升高。②AFP異質(zhì)體亞型對良性肝病、

46、原發(fā)性肝癌及繼發(fā)性肝癌的鑒別診斷有價值。③對于AFP陰性的肝癌患者，AFU、γ-GT、ALP等指標的檢測具有一定的參考價值。,三、大腸癌的實驗診斷,1.大腸癌的常規(guī)實驗室檢驗 ①糞便隱血試驗對大腸癌的篩查具有重要意義；②大腸癌時，腸粘膜發(fā)生不同程度的滲血和出血，致失血性貧血，血紅蛋白、鐵蛋白、鐵濃度均降低；③血清ALP、LDH活性升高可能是大腸癌肝轉(zhuǎn)移的第一指征。,2.大腸癌的腫瘤標志物檢驗 相關(guān)的腫瘤標志物有CEA、CA1

47、9-9、CA242等。①CEA升高常見于大腸癌的中晚期，用于腫瘤的療效判斷、預后判斷、監(jiān)測復發(fā)與轉(zhuǎn)移；②CEA常與CA 19-9、CA242聯(lián)合檢測提高檢出的陽性率，其中以CEA和CA242的組合較好。③有遺傳傾向的患者應進行APC和DCC基因檢測；p53基因突變可發(fā)生在良性腺瘤轉(zhuǎn)變?yōu)榘┑碾A段，檢測p53基因可了解腺瘤的癌變傾向，有助于早期發(fā)現(xiàn)大腸癌。,四、肺癌的實驗室診斷,1.肺癌的常規(guī)實驗室檢驗 包括血液一般檢驗、血清蛋白

48、質(zhì)和酶類測定等常規(guī)的檢驗。,2.肺癌的腫瘤標志物檢驗 ①NSE是小細胞肺癌的首選腫瘤標志物，NSE尤其適合于小細胞肺癌的療效監(jiān)測；②cyfra21-1是非小細胞肺癌的首選指標，尤其適合于其療效評估；③CEA亦可用于肺癌，尤其是非小細胞肺癌的療效監(jiān)測；④SCCA可以協(xié)助診斷肺鱗癌，陽性率為40％～80％，主要用于療效監(jiān)測。⑤癌基因K-ras、N-myc及抑癌基因Rb、p53在肺癌中均可異常表達。,五、前列腺癌的實驗診斷,1.前

49、列腺癌的常規(guī)實驗室檢驗 ①前列腺液常規(guī)檢驗對前列腺癌的診斷有一定幫助。正常前列腺液為乳白色液體，前列腺癌時，前列腺液中出現(xiàn)較多紅細胞；②其他實驗室常規(guī)檢驗如尿液常規(guī)檢驗、血液一般檢驗和常規(guī)生物化學檢驗也應該進行。,2.前列腺癌的腫瘤標志物檢驗 ①PSA是診斷前列腺癌的首選指標，它可用于篩查、診斷、治療檢測及預后等多個方面。②f-PSA/t-PSA對于t-PSA在4～10μg/L之間的灰色區(qū)域的鑒別診斷非常有價值。,六、乳腺癌

50、的實驗診斷,1.乳腺癌的常規(guī)實驗室檢驗 ①與乳腺癌有關(guān)的女性激素有人胎盤催乳素，此激素在正常男性和未妊娠的女性循環(huán)血中不存在，乳腺癌患者循環(huán)血中可以檢測到人胎盤催乳素。②常規(guī)的血液一般檢驗和生物化學檢驗對與乳腺癌患者也是必需的。,乳腺癌的腫瘤標志物檢驗 ①CA 15-3是乳腺癌的重要標志物，主要用于乳腺癌的療效監(jiān)測，治療后CA 15-3濃度下降，提示治療有效；CA 15-3亦可以用于乳腺癌的復發(fā)的監(jiān)測②CEA與CA 15-3

51、聯(lián)用可以增加監(jiān)測乳腺癌的靈敏度。③受體ER、PR的檢測有利于治療方案的選擇，只有受體陽性才適合內(nèi)分泌治療。,④Her-2/neu基因擴增預示惡性程度高，預后差，生存期短。⑤BRCA1和BRCA2是乳腺癌的易感基因，主要用于乳腺癌的預測預防，評估患者親屬的患癌風險。,七、宮頸癌的實驗診斷,1.宮頸癌的常規(guī)實驗室室檢驗 ①陰道分泌物俗稱“白帶” 。②人乳頭瘤病毒（HPV）DNA及亞型檢測，HPV有多個亞型，其中HPV 16、18型