生物藥品課件

1、第八章  診斷藥品（1）,,學(xué)習(xí)目標(biāo),,1.掌握診斷藥品的概念和基本特性； 2.熟悉國(guó)家對(duì)診斷藥品的管理要求； 3.熟悉常見診斷藥品的基本組成、使用 范圍、使用方法和保管儲(chǔ)藏; 4.了解診斷藥品的分類管理。,,,第八章  診斷藥品,第一節(jié)      概述,,,第八章  診斷藥品,診斷藥品的定義

2、,,診斷藥品在臨床一般稱為診斷試劑。 診斷試劑是指在體外或體內(nèi)可單獨(dú)或與儀器，器具，設(shè)備及系統(tǒng)組合使用，在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測(cè)、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評(píng)價(jià)以及遺傳性疾病的預(yù)測(cè)過程中，用于在體外對(duì)人體樣本（各種體液，細(xì)胞，組織樣本等）或在人體內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）等制品。,,第八章  診斷藥品,第一節(jié)      概述,我國(guó)診斷藥品

3、的發(fā)展,,主要起步于上世紀(jì)八十年代，發(fā)展在九十年代。經(jīng)過20幾年的快速發(fā)展，已經(jīng)廣泛運(yùn)用于各級(jí)臨床醫(yī)院和醫(yī)療機(jī)構(gòu)，對(duì)疾病的早期診斷，血源篩查，傳染病的預(yù)防監(jiān)測(cè)等方面發(fā)揮了極大的作用。特別是免疫類診斷藥品發(fā)展迅猛，有的產(chǎn)品靈敏度，特異性已經(jīng)達(dá)到了世界先進(jìn)水平。,第一節(jié)      概述,第八章  診斷藥品,第二節(jié)   體外診斷藥品,,第八章&

4、#160; 診斷藥品,一、診斷血清,,定義： 診斷血清是指含有特定已知抗體（或抗原），通過免疫反應(yīng)，用于確認(rèn)被測(cè)物中與之相對(duì)應(yīng)未知抗原（或抗體）的人或其它動(dòng)物血清稱為診斷血清。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,檢測(cè)原理： 本產(chǎn)品通過直接免疫凝集反應(yīng)，主要用于ABO血型系統(tǒng)的分型鑒定。,第二節(jié)   

5、體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,原料來源： 診斷血清制備有以下三種方式： 1．用合格的人抗A、抗B血清，經(jīng)處理后制成。目前本法已很少采用。 2．用人特定血型物質(zhì)免疫馬匹獲得的抗A、抗B血清。 3．用產(chǎn)生抗A或抗B血清單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血

6、清,,成分和性狀： 每套藥盒包括兩支液體血清。一般用軟塑料滴瓶包裝，方便操作者使用。 1．抗A血清.（藍(lán)色） 2．抗B血清. （淺黃色） 規(guī)格： 10ml/支,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,使用方法： 1.平板法(玻片法) 本品與受試者全血（最好用5%紅細(xì)胞氯化鈉懸液）在玻片上按1:1比例混合，靜置15m

7、in后觀察凝集現(xiàn)象判定結(jié)果。 2.試管法 本品與受試者5%紅細(xì)胞氯化鈉懸液按1:1比例在試管內(nèi)混合搖勻。以速度RCF177g離心1min或室溫靜置1小時(shí)，按照凝集現(xiàn)象判定結(jié)果。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,ABO血型鑒定操作結(jié)果判斷表,注：凝集為+，不凝集 - 。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章&#

8、160; 診斷藥品,ABO血型診斷血清,,注意事項(xiàng)： 1. 本品如出現(xiàn)渾濁或變色則不能使用。若開瓶使用時(shí)間較長(zhǎng)，最好用已知A、B、O細(xì)胞檢查結(jié)果是否與已知血型相符。以防制品污染、變質(zhì)失效，造成鑒定錯(cuò)誤。 2．受檢者血清中含有異常抗體或較高濃度冷凝集素時(shí)，在鑒定血型時(shí)容易產(chǎn)生誤判。遇此情況，需用37℃生理溶液洗滌受檢者紅細(xì)胞2～3次，以去除血清中的異?？贵w或冷凝集素，然后再鑒定血型。,第二節(jié)&#

9、160;  體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,注意事項(xiàng)： 3．用玻片法不易察覺輕微溶血或弱凝集，容易導(dǎo)致鑒定錯(cuò)誤。 4．做配型試驗(yàn)時(shí)，如發(fā)現(xiàn)原血型不吻合，則應(yīng)取受檢者血清用已知A或B血型紅細(xì)胞 行反定型試驗(yàn)，以核實(shí)原鑒定的血型是否正確。 5．藥品應(yīng)在有效期內(nèi)使用。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八

10、章  診斷藥品,ABO血型診斷血清,,藥品貯藏保管： 閉光， 2℃～8℃低溫保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,乙肝表面抗原酶聯(lián)免疫診斷試劑盒原料來源： 抗-HBs由鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得。標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品

11、,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,檢測(cè)原理： 將純化的抗-HBs固相在載體上，加入待檢樣本和抗-HBs酶結(jié)合物，經(jīng)過免疫反應(yīng)后，如果樣本中有乙肝表面抗原，則在載體上會(huì)形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs酶結(jié)合物的雙抗體夾心復(fù)合物，加入底物后通過酶的放大作用和底物的顯色作用顯示出肉眼可見的顏色，提示待檢樣本中有可檢出的乙肝表面抗原，反之如果沒有乙肝表面抗原，在載體上就不能形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs酶結(jié)合物的雙抗體夾心復(fù)合

12、物，加入底物后就不能形成肉眼可見的顏色，提示待檢樣本中沒有可檢出的乙肝表面抗原。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,成分和性狀： 1．表面抗原微孔板 12孔×8條 2．表面抗原酶結(jié)合物 6ml×1瓶 3. 表面抗原陽性對(duì)照 0.5ml×1瓶 4. 表面抗原陰性對(duì)照

13、 0.5ml×1瓶 5. 顯色劑A液 6ml×1瓶 6. 顯色劑B液 6ml×1瓶 7. 濃縮洗滌液 15ml×1瓶 （臨用前每瓶加蒸餾水至500毫升混勻即可） 8. 終止液 6ml×1瓶,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章 

14、; 診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格： 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ①取出試劑盒，平衡至室溫后，固定微孔板條于支架上，按順序編號(hào)；,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格： 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ②每次試驗(yàn)設(shè)空白孔及陽性對(duì)照2孔和陰性對(duì)照3孔，每孔加

15、相應(yīng)試劑各1滴。其余孔加待測(cè)樣品各50微升；,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格： 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ③除空白孔外，每孔加酶結(jié)合物1滴，混勻，放37℃孵箱保溫30min；,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格：

16、 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ④棄盡各孔內(nèi)容物，用洗滌液充分洗滌6次，在干凈濾紙上拍干；,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格： 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ⑤每孔加顯色劑A液、B液各1滴、混勻、置37℃孵育15min（請(qǐng)避光放置）；,第二節(jié)  

17、0;體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,規(guī)格： 48或96人份/盒。使用方法和程序：,1. 操作 ⑥每孔加終止液1滴終止反應(yīng)。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,2．結(jié)果的解釋 ①肉眼觀察： 顯色為陽性，無色為陰性； ②酶標(biāo)儀檢測(cè)： 選450nm波長(zhǎng)，用空白

18、孔調(diào)零，測(cè)各孔吸光度A值。當(dāng)樣品孔吸光度A值與陰性對(duì)照孔吸光度A值之比≥2.1時(shí)，樣品判為陽性，反之為陰性。當(dāng)陰性對(duì)照孔吸光度A值小于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,注意事項(xiàng) 1.試劑盒自冰箱取出后應(yīng)置室溫平衡30min以上。每次測(cè)試后，剩余試劑應(yīng)及時(shí)于2～8℃保存。 2.待測(cè)樣品應(yīng)新鮮，無污染。

19、 3.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用。 4.不同批試劑組分不得混用。 5.試劑盒應(yīng)按含有傳染性材料對(duì)待。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,二、酶聯(lián)免疫診斷試劑,,藥品貯藏保管: 閉光， 2～8℃低溫保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,以凝集反應(yīng)（直接和間接凝集反應(yīng)）

20、原理建立起來的診斷試劑包括特異的和非特異的，統(tǒng)稱凝集反應(yīng)試劑。 凝集反應(yīng)試劑是比較經(jīng)典的檢測(cè)試劑，其操作簡(jiǎn)便快速，成本低廉，但靈敏度較低。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,檢測(cè)原理: 已知的抗原與對(duì)應(yīng)的被測(cè)抗體或反應(yīng)素在一定條件下發(fā)生凝聚反應(yīng)，如果出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象，則提示被測(cè)抗體或反應(yīng)素的存在，反之提示被測(cè)抗體或反應(yīng)素不存在或

21、未能檢出。 臨床上常用的凝集反應(yīng)試劑是梅毒快速血漿反應(yīng)素（RPR）試劑。此試劑為非特異性凝集反應(yīng)試劑。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,梅毒快速血漿反應(yīng)素（RPR）試劑原料來源: 本品系將純化的心磷脂，卵磷脂和膽固醇按比例配制而成的VDRL抗原重懸于含炭末的特制溶液中制成（RPR）。,第二節(jié)   體

22、外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,成分和性狀: 1.RPR試劑 2.5ml×1瓶 2.梅毒陽性對(duì)照 0.5ml×1瓶 3.梅毒陰性對(duì)照 0.5ml×1瓶 4.專用針頭 1顆 5.滴頭 1支 6.試驗(yàn)紙卡（12孔

23、/張） 10張,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,規(guī)格: 120人份/盒使用方法和程序: 1.取待檢血清或血漿（不需56℃滅活）50µl于紙卡圈內(nèi)并擴(kuò)展開。 2.用專用針頭吸取搖勻后的RPR試劑，垂直加一滴于圈內(nèi)血清中。 3.用微量振蕩器按每分鐘100轉(zhuǎn)搖動(dòng)8min，立即肉眼觀察結(jié)果。,第二節(jié)

24、0;  體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,結(jié)果的解釋:1.陽性反應(yīng)（R或++++～+++）：出現(xiàn)大的或中等大的灰黑色凝塊或顆粒，溶液清亮。2.弱陽性反應(yīng)（W或++～+）：出現(xiàn)較小的灰黑色凝集物。3.陰性反應(yīng)（N或-）：無凝集顆粒。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,規(guī)格: 120人份

25、/盒使用方法和程序: 1.取待檢血清或血漿（不需56℃滅活）50µl于紙卡圈內(nèi)并擴(kuò)展開。 2.用專用針頭吸取搖勻后的RPR試劑，垂直加一滴于圈內(nèi)血清中。 3.用微量振蕩器按每分鐘100轉(zhuǎn)搖動(dòng)8min，立即肉眼觀察結(jié)果。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,不良反應(yīng): 如操作不當(dāng)，或試劑不按規(guī)定貯藏，會(huì)

26、出現(xiàn)假陽性或假陰性檢測(cè)結(jié)果，可造成臨床誤診。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,注意事項(xiàng): 1.本產(chǎn)品只用于血清、血漿等樣品檢測(cè)，不適用于全血的檢測(cè)。試驗(yàn)應(yīng)在23～29℃環(huán)境下進(jìn)行。 2.試劑盒自冰箱取出后，要平衡至規(guī)定溫度再用。 3.要遵守振搖頻率和觀察結(jié)果的時(shí)間。,第二節(jié)   體外診斷藥

27、品,第八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,注意事項(xiàng): 4. 定性試驗(yàn)呈任何程度陽性者，均需做定量試驗(yàn)，以了解抗體滴度或排除前帶現(xiàn)象。( 附定量試驗(yàn)方法：將待測(cè)血清做2倍系列稀釋，操作步驟和結(jié)果判斷同定性試驗(yàn)。) 5. 本試驗(yàn)系非特異性反應(yīng)，可出現(xiàn)生物學(xué)假陽性，需結(jié)合臨床進(jìn)行綜合分析，必要時(shí)需做特異性梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)證實(shí)后作出診斷。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第

28、八章  診斷藥品,三、凝集反應(yīng)試劑,,注意事項(xiàng): 6.試劑盒內(nèi)裝有梅毒陰性和陽性對(duì)照，用于本試劑盒質(zhì)量監(jiān)測(cè)。 7.試劑盒應(yīng)按含有傳染性材料對(duì)待。藥品貯藏保管: 閉光， 2～8℃低溫保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,膠體金技術(shù)是臨床應(yīng)用比較成熟的技術(shù)，它是利用還原劑將氯化金分子聚合成具有特定大

29、小的膠體金顆粒與已知抗原或抗體結(jié)合，用于對(duì)被測(cè)物的檢測(cè)。 膠體金試劑檢測(cè)方便快速，靈敏度也較高，現(xiàn)已廣泛的應(yīng)用在早孕、肝炎，愛滋病的檢測(cè)中。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,檢測(cè)原理: 將抗-抗原吸附到膠體金顆粒上并固相于硝酸纖維膜，當(dāng)被測(cè)抗原通過層析與抗-抗原膠體金顆粒相遇時(shí)使其金顆粒積聚而形成肉眼可見的積聚線，

30、從而確認(rèn)被測(cè)抗原的存在。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,原料來源: 抗-抗原由鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得，固相膜為硝酸纖維膜。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,成分和性狀: 用抗-抗原膠體金固相的硝酸纖維膜條。規(guī)格: 1人份使用方法和程序:

31、 將待測(cè)液2到5滴加于膜的加樣處，1到3min后觀察結(jié)果，如果僅在對(duì)照區(qū)出現(xiàn)一條色帶為陰性，如果在檢測(cè)區(qū)及對(duì)照區(qū)都出現(xiàn)色帶為陽性。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,注意事項(xiàng): 1.對(duì)照線與檢測(cè)線均不出現(xiàn)色帶，表明發(fā)生檢測(cè)錯(cuò)誤應(yīng)重試，當(dāng)抗原濃度很高時(shí)檢測(cè)線很明顯，對(duì)照線可能變得很弱，為正常結(jié)果。 2.有條件的時(shí)候應(yīng)使用對(duì)照品同

32、時(shí)測(cè)定。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,四、免疫膠體金試劑,,藥品貯藏保管: 于4～25℃避光保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,以放射性核素作為示蹤物將其標(biāo)記到已知抗原或抗體上，通過免疫反應(yīng)來確認(rèn)被測(cè)物中的未知抗體或抗原，用這樣的方法組成的診斷試劑稱為放射免疫試劑。,第二

33、節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,放射免疫試劑的靈敏度較酶免疫試劑高，檢測(cè)線性范圍寬，定量分析準(zhǔn)確，特別是對(duì)小分子物質(zhì)的分析具有較高的臨床價(jià)值。常見的放射免疫試劑有激素、多肽、小分子藥物及腫瘤標(biāo)志物的定量測(cè)定。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,促甲狀腺激素的測(cè)定原料來源:

34、 抗hTSH單抗由鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得。檢測(cè)原理: 利用酶免疫雙抗體夾心法原理將標(biāo)記物改為放射性核素，以放射計(jì)數(shù)儀器的計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)來分析判斷結(jié)果。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,成分和性狀:1.125I-抗hTSH單抗 1瓶5.5ml 2.標(biāo)準(zhǔn)品 8瓶1ml/瓶

35、 3.質(zhì)控血清 1瓶1ml 4.洗滌緩沖劑 1瓶22ml(20倍蒸餾水稀釋)5.抗hTSH單抗包被管 2組48管/組,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,作用與用途: 試劑盒采用一步夾心法對(duì)血清促甲狀腺激素進(jìn)行體外定量檢測(cè).規(guī)格: 96人

36、份,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,使用方法和程序: 1.操作 將固相有抗-hTSH單抗包被物的管子排好編號(hào)，①于各管中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品,每管200微升,共8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,同時(shí)設(shè)質(zhì)控血清一管,按編號(hào)加樣品,每管200微升；②于各管加1251-抗hTSH標(biāo)記物50微升,室溫振搖2小時(shí)；③洗滌：于各管加洗滌液1000微升洗滌兩次，上計(jì)數(shù)儀計(jì)

37、數(shù)1min。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,使用方法和程序: 2.數(shù)據(jù)處理 以標(biāo)準(zhǔn)品為橫坐標(biāo)，放射性計(jì)數(shù)為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上由被測(cè)樣本的放射性計(jì)數(shù)可查得hTSH濃度。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,五、放射免疫試劑,,注意事項(xiàng):

38、 1.所有試劑在每次使用前應(yīng)放置室溫（17～27℃）平衡。 2.血清標(biāo)本2～8℃保存不超過3天，如需長(zhǎng)期保存應(yīng)置于20℃。 3.試劑使用完畢后應(yīng)按放射性有關(guān)規(guī)定處理。藥品貯藏保管: 2～8℃低溫保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,六、化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑,,將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新的免疫分析方法。這種方法充分利用了發(fā)光試劑的高靈敏度

39、和寬線性范圍和免疫反應(yīng)的高特異性，使化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑既具備了酶聯(lián)免疫試劑的快速簡(jiǎn)便，特異性好，試劑穩(wěn)定的特點(diǎn)，又具備了放射免疫的高靈敏度和寬線性定量分析準(zhǔn)確的特點(diǎn)，具有很大的臨床實(shí)用價(jià)值，現(xiàn)已開始廣泛應(yīng)用于臨床。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,六、化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑,,目前用于臨床的主要化學(xué)發(fā)光診斷試劑如乙肝定性檢測(cè)試劑盒等。,第二節(jié)  

40、0;體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,原料來源: 抗-HBe由鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得。標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶，魯米若發(fā)光底物。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,檢測(cè)原理: 將純化的單抗-HBe固相在載體上，加入待檢樣本和基因工程表達(dá)的e抗原，經(jīng)過e抗原與

41、待檢樣本中的抗-HBe發(fā)生中和免疫反應(yīng)后，再加入標(biāo)記抗-HBe酶結(jié)合物。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,檢測(cè)原理: 如果樣本中有抗-HBe，則e抗原和樣本中的e抗體發(fā)生中和免疫反應(yīng)后不能在載體上與標(biāo)記的抗-HBe酶結(jié)合物形成抗-HBe-HBeAg-抗-HBe酶結(jié)合物的復(fù)合物，加入底物后由于沒有酶的放大作用而導(dǎo)致底物無法發(fā)

42、光，提示待檢樣本中有可檢出的抗-HBe。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,檢測(cè)原理: 反之如果沒有抗-HBe，在載體上就能夠形成抗-HBe-HBeAg-抗-HBe酶結(jié)合物的雙抗體夾心復(fù)合物，加入底物后就可以激發(fā)底物發(fā)光，提示待檢樣本中沒有可檢出的抗- HBe。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章

43、  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,成分和性狀： 1.抗-HBe微孔板 12孔×8條 2.抗-HBe結(jié)合物 6ml×1瓶 3.抗-HBe陽性對(duì)照 0.5ml×1瓶 4.抗-HBe陰性對(duì)照 0.5ml×1瓶 5.HbeAg中和試劑 6ml×1瓶 6.發(fā)光底物A液 6ml

44、5;1瓶 7.發(fā)光底物B液 6ml×1瓶 8.濃縮洗滌液 15ml×1瓶 （臨用前每瓶加蒸餾水至500毫升混勻即可）,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,規(guī)格:96人份/盒使用方法和程序: 1. 取出試劑盒，平衡至室溫。按1：1比例混合發(fā)光底物A,B液，避光待用。混合

45、后底物放置時(shí)間不超過8小時(shí)。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,使用方法和程序: 2．加陰性對(duì)照3孔，陽性對(duì)照2孔及待檢標(biāo)本至預(yù)包被發(fā)光固相板各相應(yīng)孔內(nèi)，50μl/孔，然后每孔加入中和e抗原試劑50ul/孔混勻，置37℃水浴箱中溫育30min。 3．用自動(dòng)洗板機(jī)，洗滌5次，在干凈吸水紙上拍干。,第二節(jié) 

46、  體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,使用方法和程序: 4.每孔加檢測(cè)抗-HBe用發(fā)光標(biāo)記物100 μl，置37℃水浴箱中溫育30min。 5.用自動(dòng)洗板機(jī)，洗滌5次，在干凈吸水紙上拍干。 6.每孔加混合發(fā)光底物液100μl，在室溫中避光放置10min讀取各孔R(shí)LU(發(fā)光值),第二節(jié)   體外

47、診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,結(jié)果判定： Cutoff = RLU陰性對(duì)照÷2 陽性結(jié)果：樣本RLU≦Cutoff 陰性結(jié)果：樣本RLU> Cutoff,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,注意事項(xiàng) 1.

48、試劑盒自冰箱中取出后應(yīng)置室溫平衡30min以上。試劑使用前請(qǐng)振蕩搖勻。每次測(cè)試后，剩余試劑請(qǐng)及時(shí)于2～8℃保存，一周內(nèi)用完。 2.請(qǐng)按需配制底物，混合底物放置時(shí)間不超過8小時(shí)。 3.確保待測(cè)標(biāo)本無溶血無污染，忌反復(fù)凍融，勿用NaN3防腐。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,乙型肝炎e抗體化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑盒,,注意事項(xiàng)4.手工洗板時(shí)避免微孔內(nèi)洗液外溢，

49、以防鄰近孔相互污染而造成假陽性結(jié)果。5.濃縮洗液若有結(jié)晶時(shí)，請(qǐng)置37℃溶解后再行稀釋。6.所有樣品應(yīng)按傳染源處理。7.不同批號(hào)的試劑不能混用。藥品貯藏保管: 2～8℃低溫保存。,第二節(jié)   體外診斷藥品,第八章  診斷藥品,小結(jié),,1.什么是診斷藥品?,診斷試劑是指在體外或體內(nèi)可單獨(dú)或與儀器，器具，設(shè)備及系統(tǒng)組合使用，在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測(cè)、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評(píng)價(jià)以及遺傳性

50、疾病的預(yù)測(cè)過程中，用于在體外對(duì)人體樣本（各種體液，細(xì)胞，組織樣本等）或在人體內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）等制品。診斷藥品在臨床一般稱為診斷試劑。,第八章  診斷藥品,小結(jié),,2.今天學(xué)習(xí)的診斷藥品有哪些類型?,,（1）診斷血清（2）酶聯(lián)免疫診斷試劑（3）凝集反應(yīng)試劑（4）免疫膠體金試劑（5）放射免疫試劑（6）化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑,第八章  診斷藥品,小結(jié),,3.什

51、么是診斷血清?,,診斷血清是指含有特定已知抗體（或抗原），通過免疫反應(yīng)，用于確認(rèn)被測(cè)物中與之相對(duì)應(yīng)未知抗原（或抗體）的人或其它動(dòng)物血清稱為診斷血清。,第八章  診斷藥品,小結(jié),,4.酶聯(lián)免疫診斷試劑的基本檢測(cè)原理?,,將具有生物活性的酶物質(zhì)聯(lián)結(jié)到已知抗原（或抗體）上，使之成為即具有酶的生物活性又具有抗原（或抗體）生物活性的復(fù)合物（酶結(jié)合物），用于定量或定性檢測(cè)與復(fù)合物抗原（或抗體）相對(duì)應(yīng)的未知抗體（或抗原）。,第八章

52、  診斷藥品,小結(jié),,5.凝集反應(yīng)試劑的基本檢測(cè)原理?,,已知的抗原與對(duì)應(yīng)的被測(cè)抗體或反應(yīng)素在一定條件下發(fā)生凝聚反應(yīng)，如果出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象，則提示被測(cè)抗體或反應(yīng)素的存在，反之提示被測(cè)抗體或反應(yīng)素不存在或未能檢出。,第八章  診斷藥品,小結(jié),,6.免疫膠體金試劑的基本檢測(cè)原理?,,利用還原劑將氯化金分子聚合成具有特定大小的膠體金顆粒與已知抗原或抗體結(jié)合，用于對(duì)被測(cè)物的檢測(cè)。,第八章 

53、 診斷藥品,小結(jié),,7.放射免疫試劑的基本檢測(cè)原理?,,以放射性核素作為示蹤物將其標(biāo)記到已知抗原或抗體上，通過免疫反應(yīng)來確認(rèn)被測(cè)物中的未知抗體或抗原，用這樣的方法組成的診斷試劑稱為放射免疫試劑。,第八章  診斷藥品,小結(jié),,8.化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑的基本檢測(cè)原理?,,將發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新的免疫分析方法。這種方法充分利用了發(fā)光試劑的高靈敏度和寬線性范圍和免疫反應(yīng)的高特異性，使化學(xué)發(fā)光免疫診

54、斷試劑既具備了酶聯(lián)免疫試劑的快速簡(jiǎn)便，特異性好，試劑穩(wěn)定的特點(diǎn)，又具備了放射免疫的高靈敏度和寬線性定量分析準(zhǔn)確的特點(diǎn)。,第八章  診斷藥品,小結(jié),,9.以上試劑的使用范圍是?,,（1）體外診斷（2）體內(nèi)診斷,第八章  診斷藥品,小結(jié),,9.他們的使用范圍是?,,（1）體外診斷（2）體內(nèi)診斷,（1）,第八章  診斷藥品,小結(jié),,,體外診斷和體內(nèi)診斷試劑有哪些不同呢？,我們?cè)谙?/p>