志賀氏菌檢測(cè)

1、志賀氏菌的檢驗(yàn),志賀氏菌屬 于腸桿菌科志賀氏菌屬 ,根據(jù)生化特性不同將其分為四個(gè)群: A群--痢疾志賀氏菌；B群----福氏志賀氏菌 C群--鮑氏志賀氏菌；D群----宋內(nèi)氏志賀氏菌 志賀氏菌屬的細(xì)菌統(tǒng)稱痢疾桿菌.臨床上能引起痢疾癥狀的病原微生物很多,如志賀氏菌屬 、沙門(mén)氏菌屬、變形桿菌屬、埃希氏菌屬等，還有阿米巴原蟲(chóng)及病毒等。其中以志賀氏菌屬 引起的細(xì)菌性痢疾最為常見(jiàn)，是細(xì)菌性痢疾的主要病原菌。通過(guò)食品和飲水傳播，引起人的疾

2、病。人對(duì)志賀氏菌的易感性很高，人是它的唯一宿主。所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí)，常以是否含有志賀氏菌作為指標(biāo)。,志賀氏菌的檢驗(yàn),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解志賀氏菌生物學(xué)特性及原理 掌握志賀氏菌檢驗(yàn)方法,,檢驗(yàn)志賀氏菌的方法很多，但食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)具有法規(guī)性，檢驗(yàn)必須采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。近年來(lái)發(fā)展了許多快速檢驗(yàn)的新方法，如技術(shù)等。我們下面介紹的方法即是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法。要弄清檢驗(yàn)原理，首先需要了解志賀氏菌的生物學(xué)特性。,志賀氏

3、菌的檢驗(yàn),二、志賀氏菌的生物學(xué)特性 1、形態(tài)與染色：革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌，無(wú)莢膜，無(wú)鞭毛，不運(yùn)動(dòng)，有菌毛。,革蘭氏陰性鮑氏志賀菌,志賀氏菌的菌毛,志賀氏菌掃描電鏡照片,,志賀氏菌掃描電鏡照片,志賀氏菌的透射電鏡照片,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,2、志賀氏菌的培養(yǎng)特性： 需氧或兼性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求不高，能在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，最適溫度為37℃，最適pH為6.4-7.8。 37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤(rùn)、無(wú)色、半透明、

4、邊緣整齊，直徑約2mm，宋內(nèi)氏菌菌落一般較大，較不透明，并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。 在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長(zhǎng)，一般不形成沉淀，無(wú)菌膜形成。,,菌落形態(tài)學(xué),關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。,福氏志賀氏菌的菌落特征,,宋內(nèi)志賀菌乳糖遲發(fā)酵菌株在麥康凱平板上的菌落特征,,,,,,,,細(xì)菌在肉湯培養(yǎng)基中的生長(zhǎng),均勻渾濁生長(zhǎng)是什么意思？,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,3、志賀氏菌的生化特性： 本菌

5、屬都能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。大多不發(fā)酵乳糖，僅宋內(nèi)氏菌遲緩發(fā)酵乳糖。靛基質(zhì)產(chǎn)生不定，甲基紅陽(yáng)性，VP試驗(yàn)陰性，不分解尿素，不產(chǎn)生H2S。與腸桿菌科各屬細(xì)菌相比較，志賀氏菌的主要鑒別特征為不運(yùn)動(dòng)，對(duì)各種糖的利用能力較差，并且在含糖的培養(yǎng)基內(nèi)一般不形成可見(jiàn)氣體。根據(jù)生化反應(yīng)可進(jìn)行初步分類。,,不發(fā)酵乳糖和發(fā)酵乳糖菌落,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,4、志賀氏菌的抗原構(gòu)造與分型： 志賀氏菌屬細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原（O）及表面抗原（K

6、）組成。主要抗原有三種：型特異性抗原、群特異性抗原、表面抗原（K抗原）。 根據(jù)抗原構(gòu)造的不同，按最新國(guó)際分類法，將本屬細(xì)菌分為四個(gè)群、39個(gè)血清型（包括亞型） 附：志賀氏菌抗原分類。,附:志賀氏菌抗原分類,抗原構(gòu)造與分型：志賀氏菌屬細(xì)菌的抗原結(jié)構(gòu)由菌體抗原（O）及表面抗原（K）組成。主要抗原有三種： 型特異性抗原：型多糖抗原為菌體抗原的一種，是光滑型菌株所含有的重要抗原。當(dāng)菌株變?yōu)榇植谛蜁r(shí)，此抗原也常隨之消失，各菌型所含的

7、型抗原不同，可用于區(qū)別菌種的型別。 群特異性抗原：為光滑型菌株的次要抗原，也是菌體抗原的一種。特異性較低，常在數(shù)種近似的菌內(nèi)出現(xiàn)。在福氏菌株中，由于所含群抗原不同，可將某些菌型分為多種亞型，如福氏菌2型，根據(jù)群抗原不同，可分成2a、2b兩個(gè)亞型。 表面抗原（K抗原）：在新分離的某些菌株菌體表面含有此種抗原。不耐熱，加熱100℃1小時(shí)即被破壞。具有此種抗原的菌株，可阻止菌體抗原與相應(yīng)免疫血清發(fā)生凝集。,志賀氏菌屬的四個(gè)群,根據(jù)抗原構(gòu)造

8、的不同，按最新國(guó)際分類法，將本屬細(xì)菌分為四個(gè)群、39個(gè)血清型（包括亞型） A群：也稱志賀氏菌群，有10個(gè)血清型。不發(fā)酵甘露醇，無(wú)鳥(niǎo)氨酸脫羧酶，與其他各群細(xì)菌無(wú)血清學(xué)聯(lián)系。 B群：也稱福氏菌群，已有13個(gè)血清型（包括亞型和變種）。最近又發(fā)現(xiàn)3個(gè)亞型（1c、4c、5b）。發(fā)酵甘露醇，無(wú)鳥(niǎo)氨酸脫羧酶?？乖Y(jié)構(gòu)較復(fù)雜，各型間有交叉凝集。每一福氏菌型具有二種抗原，即型特異性抗原和群抗原，前者只存在于同型菌株中，后者有許多種，存在于福氏各菌型中

9、。例如福氏1b型除含有1型特異性抗原外，尚含有4、6群抗原。,,C群：也稱鮑氏菌群，有15個(gè)血清型，分解甘露醇，無(wú)鳥(niǎo)氨酸脫羧酶。各型內(nèi)無(wú)交叉凝集。 D群：也稱宋內(nèi)氏菌群，僅有一個(gè)血清型。分解甘露醇，有鳥(niǎo)氨酸脫羧酶，遲緩發(fā)酵乳糖。有Ⅰ(S相光滑菌落)、Ⅱ相(R粗糙菌落)之分。,,福氏志賀菌在HE瓊脂平板上的菌落特征藍(lán)綠色大腸埃希菌紅色較大,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,5、志賀氏菌的抵抗力： 志賀氏菌屬與沙門(mén)氏菌屬及其他腸道桿菌相比，對(duì)理

10、化因素抵抗力較低，對(duì)酸較敏感，必須使用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。在外界環(huán)境中的生存力，以宋內(nèi)氏最強(qiáng)，福氏菌次之，痢疾志賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在糞便內(nèi)（室溫）存活11天。日光直接照射30分鐘，56-60℃10分即被殺死，對(duì)高溫和化學(xué)消毒劑很敏感，1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死，對(duì)氯霉素、磺胺類、鏈霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,6、志賀氏菌的變異性： S-R型變異：菌落可由光

11、滑型變?yōu)榇植谛?，同時(shí)常伴有生化反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性的變異。在機(jī)體內(nèi)，尤其在慢性患者和恢復(fù)期患者，志賀氏菌可發(fā)生變異而失去原來(lái)的生化和抗原特性，成為不典型菌株。但其中部分不典型菌株，可通過(guò)10%膽汁肉湯等返祖為典型菌株。故在慢性患者或帶菌者糞便檢查時(shí)，對(duì)這類菌株要特別注意，必須多次反復(fù)檢查。因這對(duì)傳染源的發(fā)現(xiàn)及控制有重要意義。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,耐藥性變異：自從廣泛使用抗菌素以來(lái)，志賀氏菌的耐藥菌株 不斷增加，給防治工作帶來(lái)許多

12、困難。國(guó)內(nèi)部分地區(qū)報(bào)道（1972-1974），志賀氏菌對(duì)四環(huán)素的耐藥率達(dá)74%、氯霉素73.6-97%、鏈霉素84-98%、金霉素75-100%、磺胺類97-100%，可見(jiàn)國(guó)內(nèi)對(duì)常用幾種抗菌素的耐藥率相當(dāng)高。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,毒力變異與其他變異：1963年南斯拉夫Mel氏首先創(chuàng)用依賴鏈霉素的志賀氏菌株（依鏈Sd株）口服預(yù)防痢疾。Sd株是一株必須有鏈霉素存在下才能生長(zhǎng)的菌株，其毒力減弱但仍保持免疫原性。美國(guó)以天然變異無(wú)毒株與大腸

13、桿菌雜交而獲得的MH株制成疫苗，其免疫效果和穩(wěn)定性均較Sd株差。我國(guó)正大力利用變異方法通過(guò)動(dòng)物和藥物處理等尋找安全有效可供口服的痢疾桿菌活菌苗，并已取得初步成效。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,7、志賀氏菌的致病性 志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾，主要通過(guò)消化道途徑傳播。根據(jù)宿主的健康狀況和年齡，只需少量病菌（至少為10個(gè)細(xì)胞）進(jìn)入，就有可能致病。 致病因素：志賀氏菌的致病作用，主要是侵襲力、菌體內(nèi)毒素、個(gè)別菌株能產(chǎn)生外毒素。,二、志賀氏菌的

14、生物學(xué)特性,侵襲力：志賀氏菌進(jìn)入大腸后，由于菌毛的作用粘附于大腸粘膜的上皮細(xì)胞上，繼而進(jìn)入上皮細(xì)胞并在內(nèi)繁殖，擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞及上皮下層。由于毒素的作用，上皮細(xì)胞死亡，粘膜下發(fā)炎，并有毛細(xì)血管血栓形成以至壞死、脫落，形成潰瘍。志賀氏菌一般不侵犯其他組織，偶爾可引起敗血癥。目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只有內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須侵入腸壁才能致病。因此，對(duì)粘膜組織的侵襲力是決定致病力的主要因素。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,內(nèi)毒素：志賀氏菌屬中

15、各菌株都有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素，作用于腸壁，使通透性增高，從而促進(jìn)毒素的吸收。繼而作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)，引起臨床上一系列毒血癥癥狀，如發(fā)熱、神志障礙，甚至中毒性休克。毒素破壞粘膜，形成炎癥、潰瘍，呈現(xiàn)典型的痢疾膿血便。毒素作用于腸壁植物神經(jīng)，使腸道功能紊亂，腸蠕動(dòng)共濟(jì)失調(diào)和痙攣，尤其直腸括約肌最明顯，因而發(fā)生腹痛、里急后重等癥狀。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,外毒素：痢疾志賀氏菌1型及部分2型（斯密茲痢疾桿菌）菌株能產(chǎn)生強(qiáng)烈的外毒素。為

16、蛋白質(zhì)，不耐熱，75-80℃1小時(shí)即可破壞。其作用是使腸粘膜通透性增加，并導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損害。外毒素經(jīng)甲醛或紫外線處理可脫毒成類毒素，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗毒素。一般認(rèn)為具有外毒素的志賀氏菌引起的痢疾比較嚴(yán)重。,二、志賀氏菌的生物學(xué)特性,志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾可分為兩類: A、急性細(xì)菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。 B、慢性細(xì)菌性痢疾：又分慢性遷延型、慢性隱伏型、慢性急性發(fā)作型三型。,附:志賀氏

17、菌引起的細(xì)菌性痢疾分類,志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾可分為兩類6型: A、急性細(xì)菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。 急性典型菌痢癥狀典型，有腹痛腹瀉、膿血粘便、里急后重、發(fā)熱等癥狀。各型菌都可引起，以志賀氏菌引起的較重，宋內(nèi)氏菌引起的較輕。經(jīng)治療，預(yù)后良好。如治療不徹底，可轉(zhuǎn)為慢性。 急性非典型菌痢癥狀不典型，易診斷錯(cuò)誤延誤治療，常導(dǎo)致帶菌或慢性發(fā)展。 急性中毒性菌痢小兒多見(jiàn)，各型菌都可發(fā)生。中毒性菌痢一系列的

18、病理生理變化，主要是內(nèi)毒素造成機(jī)體微循環(huán)障礙的結(jié)果。導(dǎo)致內(nèi)臟淤血、周圍循環(huán)衰竭（休克），主要功能器官灌注不足，發(fā)生心力衰竭、腦水腫，急性腎功能衰竭。嚴(yán)重微循環(huán)障礙，再加上內(nèi)毒素?fù)p傷血管內(nèi)皮細(xì)胞、激活凝血因子等，而發(fā)生彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）。,附:志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾分類,B、慢性細(xì)菌性痢疾：又分慢性遷延型、慢性隱伏型、慢性急性發(fā)作型三型。 慢性遷延型，通常由急性菌痢治療不徹底等引起。病程超過(guò)2個(gè)月，時(shí)愈時(shí)發(fā)，大便培養(yǎng)陽(yáng)性率低。

19、在有臨床癥狀時(shí)為急性發(fā)作型，該型往往在半年內(nèi)有急性菌痢病史。 慢性隱伏型菌痢，是在一年內(nèi)有過(guò)菌痢病史，臨床癥狀早已消失，但直腸鏡可發(fā)現(xiàn)病變或大便培養(yǎng)陽(yáng)性。,附:志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾分類,慢性急性發(fā)作型，有急性菌痢史，常因飲食不當(dāng)、受涼、勞累等而激起急性發(fā)作，但癥狀較急性期輕。 免疫性：病后有一定的免疫力，但免疫期短，也不穩(wěn)定。,三、志賀氏菌的檢驗(yàn),1、增菌　　稱取檢樣25g，加入裝有225mLGN增菌液的500mL廣口瓶?jī)?nèi)，固

20、體食品用均質(zhì)器以8000-10000r/min打碎1min，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培養(yǎng)6-8h。 培養(yǎng)時(shí)間視細(xì)菌生長(zhǎng)情況而定，當(dāng)培養(yǎng)液出現(xiàn)輕微混濁時(shí)即應(yīng)中止培養(yǎng)。,三、志賀氏菌的檢驗(yàn),2、分離和初步生化試驗(yàn) 取增菌液1環(huán)，劃線接種于HE瓊脂平板或SS瓊脂平板1個(gè)；另取1環(huán)劃線接種于麥康凱瓊脂平板和伊紅美藍(lán)瓊脂平板各1個(gè)，于36℃培養(yǎng)18-24h。 志賀氏菌在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無(wú)色透明不發(fā)

21、酵乳糖的菌落。,HE瓊脂平板原理及照片,發(fā)酵乳糖的某種腸桿菌。,酸堿指示劑為溴麝香草酚藍(lán),發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸使溴麝香草酚藍(lán)變?yōu)辄S色,HE瓊脂平板原理及照片,不發(fā)酵乳糖的某種腸道菌，而且產(chǎn)生硫化氫，可能是沙門(mén)氏菌,,不分解乳糖的菌株分解牛肉膏蛋白胨產(chǎn)堿,使溴麝香草酚藍(lán)變?yōu)樗{(lán)綠色或藍(lán)色,菌落也變?yōu)樗{(lán)綠色或藍(lán)色,志賀氏菌在HE瓊脂平板,,SS平板原理及照片,大腸桿菌或者別的發(fā)酵乳糖的腸桿菌,酸鹼指示劑為中性紅,配方中還有煌綠,SS平板原理及照片,是

22、沙門(mén)氏菌。有黑色中心。如果沒(méi)有黑色中心，可能是志賀氏菌,麥康凱瓊脂平板照片,乳糖陰性,乳糖陽(yáng)性,培養(yǎng)基中加有乳糖結(jié)晶紫水溶液中性紅水溶液,EMB平板照片及原理,原理：伊紅美藍(lán)瓊脂平板含伊紅和美藍(lán)染料，在此亦作為指示劑。大腸菌群發(fā)酵乳糖造成酸性環(huán)境時(shí)，故可染上酸性染料伊紅，又因伊紅與美蘭結(jié)合（該兩種染料即結(jié)合成復(fù)合物）使大腸菌群產(chǎn)生帶核心的、有金屬光澤的深紫色的（龍膽紫的紫色）陽(yáng)性菌落，從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光。在伊紅美蘭

23、平板上的典型菌落呈紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常有金屬光澤。由于藥物影響，亦呈現(xiàn)紫色、粉紫、中心灰紫、無(wú)黑心、濕潤(rùn)等，常為大腸桿菌，均應(yīng)注意挑選。,伊紅美藍(lán)瓊脂平板照片,志賀氏菌在伊紅美蘭平板上,大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,,2、分離和初步生化試驗(yàn) 挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1管。一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落，以防遺漏，經(jīng)36℃培養(yǎng)18-24h，分別觀察結(jié)果。,葡萄糖半固體原理及結(jié)果,附:三糖鐵瓊脂現(xiàn)象及原

24、理分析,三糖鐵（TSI）瓊脂試驗(yàn)的原理 試驗(yàn)方法：以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養(yǎng)物，穿刺接種并涂布于斜面，置36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察結(jié)果。,附:三糖鐵瓊脂現(xiàn)象及原理分析,三糖鐵瓊脂(TSI)成分：蛋白胨20.0g;牛肉膏3.0g; 乳 糖10.0g; 蔗糖10.0g; 葡萄糖1.0g ;硫酸亞鐵銨(含6個(gè)結(jié)晶水) 0.5g;酚紅 0.025g或5g/L溶液5mL;氯化鈉5.0g;硫代硫酸鈉0.5g;瓊脂 12

25、.0g;蒸餾水 1000.0mL 除酚紅和瓊脂外,將其他成分加入400mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解,調(diào)至pH7.4±0.1。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min, 加熱煮沸至完全溶解。將上述兩溶液混合均勻后,再加入酚紅指示劑,混勻,分裝試管(12mm×100mm),每管約2～4mL,高壓滅菌121℃ 10 min或115℃15 min,滅菌后置成高層斜面,呈桔

26、紅色。,三糖鐵瓊脂原理分析：,本培養(yǎng)基適合于腸桿菌科的鑒定。用于觀察細(xì)菌對(duì)糖的利用和硫化氫（變黑）的產(chǎn)生。該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1，只能利用葡萄糖的細(xì)菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面后來(lái)又變紅，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。 而發(fā)酵乳糖的細(xì)菌(e.coli)，則產(chǎn)生大量的酸，使整個(gè)培養(yǎng)基

27、呈現(xiàn)黃色。 如培養(yǎng)基接種后產(chǎn)生黑色沉淀，是因?yàn)槟承┘?xì)菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)，生成黑色的硫化亞鐵沉淀。,下面照片所示2-3-4，可能是大腸桿菌、沙門(mén)氏菌還是志賀氏菌？,答案：2－志賀氏菌　3－沙門(mén)氏菌　4－大腸桿菌,(3)　下述培養(yǎng)物可以棄去：　a.　在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長(zhǎng)的培養(yǎng)物；(無(wú)鞭毛無(wú)動(dòng)力)　b.　在18-24h內(nèi)發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物(不發(fā)酵乳糖,僅宋內(nèi)志賀氏菌遲緩發(fā)酵乳糖)；　

28、c.　不分解葡萄糖和只生長(zhǎng)在半固體表面的培養(yǎng)物；(分解葡萄糖,兼性厭氧)　d.　產(chǎn)氣的培養(yǎng)物；(分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣)　 　e.　有動(dòng)力的培養(yǎng)物；(無(wú)動(dòng)力)　f.　產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物。(不產(chǎn)生硫化氫)　　　凡是乳糖、蔗糖不發(fā)酵，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體)，無(wú)動(dòng)力的菌株，可做血清學(xué)分型和進(jìn)一步的生化試驗(yàn)。,三、血清學(xué)分型,挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。 先用4種志賀氏菌多價(jià)血清檢查，如果由于K

29、抗原的存在而不出現(xiàn)凝集，應(yīng)將菌液煮沸后再檢查；如果呈現(xiàn)凝集，則用A1、A2、B群多價(jià)和D群血清分別試驗(yàn)。如系B群福氏志賀氏菌，則用群和型因子血清分別檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見(jiàn)表1?？上扔萌阂蜃友鍣z查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。4種志賀氏菌多價(jià)血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價(jià)1、2、3分別檢查，并進(jìn)一步用1-15各型因子血清檢查。如果鮑氏多價(jià)血清不凝集，可用痢疾志賀氏菌3-12型多價(jià)血清及各

30、型因子血清檢查。,血清,診斷血清:是應(yīng)用已知的標(biāo)準(zhǔn)菌株,免疫家兔獲得. 多價(jià)(混合)診斷血清:該血清含有兩種(或型)以上細(xì)菌的相對(duì)應(yīng)性抗體. 單價(jià)診斷血清:該血清僅含有一種(或型)細(xì)菌的對(duì)應(yīng)性抗體. 因子診斷血清:含有多種抗原成分的細(xì)菌,免疫動(dòng)物所獲得的抗血清,應(yīng)用與該細(xì)菌含有共同抗原成分的其他細(xì)菌進(jìn)行凝集素吸收試驗(yàn),將血清中共同的抗體吸收,余下的僅一種(或一部分)特異性抗體成分,稱為因子血清.,,抗O診斷血清:用菌體抗原(O抗原

31、)免疫動(dòng)物,獲得的抗血清稱抗O診斷血清. 抗HO診斷血清:用有菌體抗原(O抗原)和鞭毛抗原(H抗原)的細(xì)菌免疫動(dòng)物,獲得的抗血清稱抗HO診斷血清. 表面抗原診斷血清:應(yīng)用含表面抗原,如Vi抗原K抗原等細(xì)菌，經(jīng)過(guò)處理，免疫動(dòng)物所獲得的抗血清，稱．如Vi診斷血清．,四、進(jìn)一步的生化試驗(yàn),在做血清學(xué)分型的同時(shí)，應(yīng)做進(jìn)一步的生化試驗(yàn)，即： 葡萄糖銨 西蒙氏檸檬酸鹽 賴氨酸和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶 pH7.2尿素 KCN生長(zhǎng) 水楊苷和七葉苷

32、的分解 除宋內(nèi)氏菌和鮑氏13型為烏氨酸陽(yáng)性外，志賀氏菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結(jié)果。,四、進(jìn)一步的生化試驗(yàn),必要時(shí)還應(yīng)做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗(yàn)，應(yīng)為氧化酶陰性的革蘭氏陰性桿菌。生化反應(yīng)不符合的菌株，即使能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集，仍不得判定為志賀氏菌屬的培養(yǎng)物。,四、進(jìn)一步的生化試驗(yàn),已判定為志賀氏菌屬的培養(yǎng)物，應(yīng)進(jìn)一步做 5%乳糖發(fā)酵 甘露醇 棉子糖 甘油的發(fā)酵 靛基質(zhì)試驗(yàn) 志賀氏菌屬4個(gè)生化群的培養(yǎng)物，應(yīng)符