p53研究進(jìn)展ppt課件

1、重組人p53腺病毒研究進(jìn)展,2006.8.29,2,12/2005 重組人p53腺病毒注射液（今又生/Gendicine）獲得《國家重點(diǎn)新產(chǎn)品證書》11/2004 “病毒載體和人腫瘤抑制基因的重組體及其應(yīng)用”獲得了中國發(fā)明專利04/2004 今又生®正式上市銷售03/2004 “重組人p53腺病毒注射液”生產(chǎn)車間獲中國食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）頒發(fā)的 《藥品GMP證書》

2、01/2004 “重組人p53腺病毒注射液”獲得SFDA批準(zhǔn)頒發(fā)的準(zhǔn)字號生產(chǎn)批文10/2003 “重組人p53腺病毒注射液”獲得SFDA批準(zhǔn)頒發(fā)的《生物制品一類新藥證書》09/2003 完成“重組人p53腺病毒注射液”的臨床試驗(yàn)、答辯和評估11/2002 獲得廣東省藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的《藥品生產(chǎn)許可證》07/2002 “一種生產(chǎn)重組腺病毒的方法”獲中國發(fā)明專利10/2000 “重組人p53腺病毒注射液

3、”進(jìn)入II期臨床試驗(yàn)12/1998 SFDA批準(zhǔn)“重組人p53腺病毒注射液”進(jìn)入I期臨床試驗(yàn),重組人p53腺病毒注射液的歷史,3,體內(nèi)分布,局部注射 p53蛋白主要在局部分布，其他組織器官的分布幾乎不能檢出，未檢出從尿、糞、膽汁中排泄靜脈滴注 廣泛的組織分布，肝臟最多，其次是肺臟,Sibiono：data on file,4,局部用藥后1h，重組腺病毒進(jìn)入細(xì)胞 3h后，p53基因開始表達(dá)成P53蛋

4、白 12h后，表達(dá)率為47% 第3d，表達(dá)率達(dá)到峰值 第5d，表達(dá)率只有30% 3w后，進(jìn)入細(xì)胞的重組腺病毒DNA被降解,p53表達(dá)時(shí)相,Sibiono：data on file,5,結(jié)構(gòu),攜人p53腫瘤抑制基因的基因工程改構(gòu)腺病毒,,6,作用機(jī)理,腺病毒進(jìn)入細(xì)胞,,p53作用機(jī)理,,2、細(xì)胞周期阻滯,1、細(xì)胞凋亡,3、抑制血管生成,逆轉(zhuǎn)放化療抗性 抑制腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移 旁殺傷效應(yīng),7,毒理

5、研究,動物毒理研究 急性毒理 未見異常，無動物死亡。 長期毒理 當(dāng)劑量為患者臨床擬用劑量的75倍時(shí)（按體重折算） ，連續(xù)給 藥16天，16.6％動物腎組織出現(xiàn)輕微病理損傷。 致瘤性、致畸性 無致瘤、致畸性；無誘發(fā)小鼠骨髓微核的作用。 遺傳毒性 腺病毒DNA不整合到細(xì)胞基因組中，無遺傳毒

6、性。 過敏反應(yīng) 未見異常臨床副作用很小 主要不良反應(yīng)是自限性發(fā)熱，必要時(shí)對癥治療,生物學(xué)通報(bào) 38:16-17, 2003；Urology 56:155-159,2000；Human Gene Therapy 16:1016-1027, 2005,8,療程與劑量：常規(guī) 1支/次/周，4周為一個(gè)療程，可連續(xù)使用 取藥：用前從-20℃取出，自然融化，適量生理鹽水稀釋使用 直視、影像引導(dǎo)下瘤內(nèi)多點(diǎn)注射

7、 瘤直徑≥4cm者： 稀釋至4ml，1-2支/次/周 ≤4cm者： 稀釋至2ml，1支/次/周,用法、用量,9,貯藏與運(yùn)輸,貯藏：-20℃保存 運(yùn)輸：長途運(yùn)輸（2小時(shí)以上），應(yīng)采用干冰保存的方法； 市內(nèi)短途運(yùn)輸（2小時(shí)以內(nèi)

8、），可采用冰桶加冰袋的 方式； 到達(dá)目的地后，置于-20℃冰箱保存。注意事項(xiàng)：若因故未能及時(shí)使用，應(yīng)盡快置于4℃保存， 并盡快使用。 防止反復(fù)凍融,10,臨床試驗(yàn),11,Ⅰ期臨床試驗(yàn)治療晚期喉癌及追蹤觀察,患者：12例晚期喉癌，平均病程41個(gè)月（7

9、例初治，5例復(fù)發(fā)）， 病理示分化程度不等方法：分3組瘤內(nèi)注射（1010，1011，1012VP），1支/次/隔日×10，手 術(shù)切除結(jié)果：僅1名自限性發(fā)熱者；與手術(shù)聯(lián)合使用時(shí)， 不影響術(shù)后傷口愈合,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83(23): 2029-32；2005 ISCGT Conference, C31,12,11/12例病人存活隨訪

10、4.0～6.4年，平均生存時(shí)間5.9年5年生存率為 91.7%1/12病人入組時(shí)年齡79歲 （本組年齡最大患者）， 中低分化鱗癌，T2N0M0， 2003年（83歲）死于肝轉(zhuǎn)移癌,Ⅰ期臨床試驗(yàn)治療晚期喉癌及追蹤觀察,13,Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗(yàn)治療頭頸部腫瘤,入組患者：135例晚期HNSCC患者，77%為Ⅲ-Ⅳ期，多為放/ 化療失敗或不能耐受以及無法手術(shù)的病人

11、治療方法：隨機(jī)分為2組(GTRT、RT)，組間資料無顯著差異 RT組：常規(guī)或三維適形照射，70Gy/35f/7～8w GTRT組：放療前3天瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液 1支/次/周×8，放療同 RT 組,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83: 2023-2028,14,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83: 2023-2028,8

12、 12（治療完成后隨訪）,p<0.01,Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗(yàn)治療頭頸部腫瘤,15,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83: 2023-2028,p<0.01,Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗(yàn)治療頭頸部腫瘤,16,2005 ISCGT Conference C7,Ⅱ/Ⅲ期臨床試驗(yàn)治療頭頸部腫瘤遠(yuǎn)期療效,17,,,,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83(23): 2023-8,病例：左瞼板腺癌，術(shù)后3年局部 復(fù)發(fā)，放療后

13、局部復(fù)發(fā)方案：瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒 注射液1支/次/周×6，70Gy 放療,療后：35.4cm2，縮小59％,療前： 87.4cm2,,,18,,,病例：左鼻腔鱗癌IV期 ，侵犯上頜竇方案：瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液1支/次/周×8，聯(lián) 合70Gy放療,療前腫瘤37.6cm2,療后2個(gè)月，腫瘤完全消失,19,,治療后

14、 重組人p53腺病毒注射液瘤內(nèi)注 射（1支/次/周×6），放療40Gy， 腫瘤幾乎完全消失,鼻咽癌（T2N2M0, III期）,治療前 腫瘤面積23.5cm2，充滿鼻咽腔和 后鼻腔后緣,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83(23): 2023-8,20,,,病例：鼻咽癌， 左頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移治療方案： 前LN 40Gy放療 后LN 注射重組人p53腺病

15、 毒注射液1支/次/周 ×4, 40Gy放療,療 前,前、后LN：5.7cm2,療 后,前LN：2.9cm2，縮小40%,后LN：1 cm2，縮小72％； 空洞壞死，無癌細(xì)胞,中華醫(yī)學(xué)雜志 2003, 83(23): 2023-8,21,其他腫瘤的治療,22,頭頸部腫瘤癌性胸腹腔積液肝癌肺癌宮頸癌膽管癌脂肪肉瘤,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005

16、 ISCGT Conference C8，中華綜合臨床醫(yī)學(xué)雜志 2005,7(2):22-4， Gut 2005;000:1–2；2005 ISCGT Conference, C28,腫瘤類型,23,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005 ISCGT Conference C8,頭頸部腫瘤,——動脈介入聯(lián)合化療,分組情況：,患者隨機(jī)分為 3 組,24,化療方案：,1、3組患者均接受2療程（間隔7天）化療,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005 ISC

17、GT Conference C8,頭頸部腫瘤,——動脈介入聯(lián)合化療,鱗癌 Oxaliplatin (200mg, d1) 博來霉素 (8mg, d2 、d6、d8) 甲氨喋呤 (30mg, 1st and 8th days),腺癌 Oxaliplatin (200mg, d1) 5-Fu (500mg, d1、d3) 環(huán)鱗酰胺 (400mg, d2、d8),25,劑量,方法,10 ml 生理鹽水稀釋，20-30 分鐘內(nèi)動

18、脈介入藥盒給藥 5天/周期 1、2組均完成 6－10次治療,2-4支/次,基因治療方案：,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005 ISCGT Conference C8,——動脈介入聯(lián)合化療,頭頸部腫瘤,26,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005 ISCGT Conference C8,重組人p53腺病毒注射液聯(lián)合化療療效比較,27,唇癌, 70y, T4N0M0 (Group I) CR,療前,療后1個(gè)月,華西口腔醫(yī)院頭頸外科 2005 IS

19、CGT Conference C8,28,癌性腹水,患者：晚期癌癥伴腹水患者19例方法：腹腔穿刺灌注重組人p53腺病毒注射液，1-2支/次/周，4次/療程，灌注液量視腹水量定結(jié)果：可評價(jià)13例（胃癌 8 例、結(jié)腸癌 4 例、膽囊癌 1 例），療程結(jié)束后評價(jià),中華綜合臨床醫(yī)學(xué)雜志 2005,7(2):22-4,——聯(lián)合化療,29,,,病例：胃癌伴卵巢轉(zhuǎn)移、大量腹水。方案：腹腔穿刺灌注重組人p53腺病毒注射液，1-2支/次/周，4次/

20、療程,療前,1療程后,中華綜合臨床醫(yī)學(xué)雜志 2005,7(2):22-4,30,,北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院,病例：胃體癌，腹腔廣泛轉(zhuǎn)移伴大量腹水。放/化療失敗，無法手術(shù)方案：腹腔灌注重組人p53腺病毒注射液2支/2次/周×12、DDP和5-FU，后4周加8次 全腹熱療，手術(shù)結(jié)果：腹水消失（第3周），胃竇、腹膜和網(wǎng)膜變?。慌枨唤Y(jié)節(jié)明顯變?。ǖ?周 術(shù)中探查全腹和盆腔未捫及腫瘤。術(shù)后

21、病檢胃腫瘤內(nèi)未見癌細(xì)胞,,,,胃竇增厚強(qiáng)化，與周圍粘連，腹膜增厚，大量腹水,腹腔灌注重組人p53腺病毒注射液、DDP、5-FU，8 周,腹腔灌注重組人p53腺病毒注射液、DDP、5-FU，12周；全腹熱療 4 周,——聯(lián)合化療、熱療、手術(shù),31,療前,術(shù)后,左圖：低分化腺癌右圖：VEGF+,左圖：稀少變性癌細(xì)胞右圖：VEGF-,32,殘胃,腹腔,盆腔,療后半年隨訪無復(fù)發(fā),33,患者： 150名病理確診為HCC者方法：治療

22、組 68例，瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液1- 4支/次/周×8 ；TACE，1 次/月× 2 對照組 82例，單獨(dú)使用TACE治療，1 次/月× 2結(jié)果：除生存率外，均為療后1個(gè)月評價(jià),Gut 2005;000:1–2；2005 ISCGT Conference, C28,晚期肝細(xì)胞肝癌（HCC）,——聯(lián)合TACE治療,34,近期

23、療效,遠(yuǎn)期療效,——聯(lián)合TACE治療,晚期肝細(xì)胞肝癌（HCC）,p<0.05,35,晚期肺癌,患者：原發(fā)性肺癌12例（非小細(xì)胞癌11例、小細(xì)胞癌1例； IIIb期5例， IV期7）、 轉(zhuǎn)移癌3例（鼻咽癌、直腸癌、肝癌各1例），均為經(jīng)綜合治療未能控制病情者方法：CT下腫瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液1支/次/周， 4次/療程。按腫瘤大小 用2-6ml生理鹽水稀釋，完成1療程12例，

24、2療程1例，2例聯(lián)合紫杉醇或健擇加 順鉑結(jié)果：療程結(jié)束2個(gè)月后評價(jià),療 效,,臨床獲益率,病理檢查,副 反 應(yīng),PR,SD,33.3%(5/15),46.7%(7/15),,,,壞死、纖維化,無明顯改變,,54.5%(6/11),45.5%(5/11),,發(fā) 熱,73.3%(11/15),45.3%(29/64例次),第2,3次注射后多見，

25、持續(xù)3-8h,,,——聯(lián)合化療,36,病例： 右上縱隔型肺癌方案： CT下瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液，1支/次/周×8；適 形放療 70Gy,北京市腫瘤醫(yī)院,療前 76.5cm2,療后 26.1cm2，縮小66％,右上縱隔型肺癌,——聯(lián)合放療,,,37,北京市腫瘤醫(yī)院,9.4×8.0=74cm2,7.0×5.8=41 cm2,縮小45％,療前,一療程后,病例：

26、IIIB期宮頸癌方案：瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液1支/次/周 ×8放療46Gy 療程結(jié)束后手術(shù)切除,晚期宮頸癌,——聯(lián)合放療,38,病例： 膽管癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)方案： 瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液，1支/次/周×8；適形放療60Gy,療前 6.0×3.7=22.2cm2,療后 縮小88%,北京市腫瘤醫(yī)院,膽管癌,——聯(lián)合放療,,,39,病例：左下腹壁脂肪肉瘤4次

27、術(shù)后復(fù)發(fā)方案：瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒注射液1支/次/周×12； 熱療40MHz 42~43 ?C，1次/周×22，重組人p53腺病毒注射液 注射后 3天進(jìn)行；放療60Gy，治療結(jié)束后3周手術(shù)切除腫塊,療前 132.9cm2,療后大小無改變，但50％以上LDA，治療后 3 周， 8kg 腫塊切除,北京市腫瘤醫(yī)院,脂肪肉瘤,——聯(lián)合放療、熱療、手術(shù),,,40,提高生活

28、質(zhì)量,41,拮抗放/化療副作用,提高生活質(zhì)量,Gut 54:1318-1319, 2005；Human Gene Therapy 16:1016-1027, 2005,基因治療+TACE,42,基因治療是腫瘤治療的主要發(fā)展方向之一重組人p53腺病毒注射液上市為基因治療臨床應(yīng)用提供平臺 基因治療是臨床腫瘤治療的新技術(shù)，將推動腫瘤診 斷、腫瘤綜合治療、腫瘤療效評價(jià)等各方面的發(fā)展 靶向性基因治療、調(diào)控表達(dá)基因治療是發(fā)展方向,腫瘤