γ-羥基炔酸酯類衍生物抗腫瘤及抗炎活性研究.pdf

1、從遠(yuǎn)古以來人們就使用天然藥物來治療病痛。天然產(chǎn)物來源的藥物具有多種多樣的化學(xué)分子形式，其中聚炔酯類的結(jié)構(gòu)是一類常見的具有活性的藥物分子。廣泛存在于各種各樣的植物及海洋生物中。隨著化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人們認(rèn)識(shí)的進(jìn)步，近幾十年來，人們從傳統(tǒng)藥用植物或其它有活性的生物中分離出了上千種含炔類的活性成分。這些含有炔基的活性成分，表現(xiàn)出了豐富的生物活性，如抗腫瘤，抗炎，抗菌，抗病毒等。
　　為了探討炔酯類結(jié)構(gòu)對(duì)藥物活性的影響，在實(shí)驗(yàn)室此前的γ-羥

2、基炔酸酯的不對(duì)稱合成方法基礎(chǔ)上，合成了一系列的化合物，把含有丙炔酸酯的基團(tuán)引入到不同的具有藥效活性的小分子基團(tuán)上，并且檢測(cè)了所得到的化合物的抗腫瘤以及抗炎的活性。我們的工作主要包括以下幾個(gè)方面。
　　<一>γ-炔酸酯類化合物的設(shè)計(jì)合成：（1）通過條件優(yōu)化，在靛紅(2，3-二酮二氫吲哚)3-位上引入丙炔酸甲酯基團(tuán)，得到一系列的3-羥基氧化吲哚類似物，在對(duì)吲哚環(huán)上不同取代基進(jìn)行替換同時(shí)，，亦對(duì)1位氨基的取代基也進(jìn)行了篩選，（2）在此基

3、礎(chǔ)上，通過對(duì)靛紅衍生的3-亞胺的加成得到一系列3-氨基氧化吲哚類似化合物；（3）此外，利用類似方法還制備了其他雜環(huán)衍生的γ-炔酸酯類化合物。
　　<二>化合物的抗腫瘤活性評(píng)價(jià)。（1）首先利用Hela和MDA兩種細(xì)胞系對(duì)所得化合物進(jìn)行了腫瘤細(xì)胞增殖的抑制活性篩選。結(jié)合所測(cè)得的IC50對(duì)化合物進(jìn)行了構(gòu)效分析，并且根據(jù)構(gòu)效關(guān)系進(jìn)一步對(duì)化合物進(jìn)行了基團(tuán)改造。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在靛紅衍生的3-位羥基γ-炔酸酯化合物具有較好的抗腫瘤活性。對(duì)1-位進(jìn)行基

4、團(tuán)替換即引入較大基團(tuán)能顯著改善化合物的抗腫瘤活性。其中化合物L(fēng)-37表現(xiàn)出最優(yōu)的抗腫瘤活性。（2）對(duì)具有代表性的化合物L(fēng)-37，L-39的抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行了探討。確定了合成的化合物作用是通過凋亡途徑抑制腫瘤細(xì)胞生長的，并且呈時(shí)間和劑量依賴關(guān)系。隨后的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該類化合物通過PI3K/AKT通路對(duì)凋亡蛋白caspase-9進(jìn)行了激活，從而由caspase-3/9的通路誘導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞的凋亡（3）另外根據(jù)羅丹明123和ROS含量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，所

5、合成化合物促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞內(nèi)ROS的顯著提高，表明所此類化合物物也引起了腫瘤細(xì)胞線粒體膜電勢(shì)的改變，從而促使了細(xì)胞凋亡。因此，本論文所涉及的化合物通過多種途徑引起腫瘤細(xì)胞凋亡，從而有效的抑制了腫瘤細(xì)胞增殖。
　　<三>化合物的抗炎活性評(píng)價(jià)。鑒于此類化合物具有與抗炎成藥吲哚美辛類似的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，因此在進(jìn)行抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)其抗炎活性進(jìn)行了作用評(píng)價(jià)。（1）選取在抗腫瘤活性中表現(xiàn)良好的L-37,L-39,L-18等化合物，利用RAW

6、264.7細(xì)胞進(jìn)行了NO釋放抑制作用的檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)該類化合物表現(xiàn)了出色的抗炎活性，1μM濃度的L-37下即對(duì)LPS刺激RAW的NO釋放抑制率達(dá)到50％；（2）酶學(xué)水平實(shí)驗(yàn)表明此類化合物對(duì)PGE2具有顯著的抑制效果，并發(fā)現(xiàn)所合成的化合物對(duì)COX-1，COX-2,5-LOX酶的表達(dá)亦有一定的影響，這可能是此類化合物抗炎作用的另一作用途徑。（3）小鼠抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明化合物L(fēng)-37具有和成藥塞來昔布相當(dāng)?shù)捏w內(nèi)抗炎作用，表明此類化合物在抗炎活性