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文檔簡介
1、第三節(jié) 口腔正常菌群,oral normal flora,100,000,000,000,000個細菌!,2,口腔正常菌群(oral normal flora): 口腔細菌與宿主在共同的進化過程中形成的細菌群體,即口腔內(nèi)正常存在的微生物。,3,已經(jīng)分離的菌屬有40余個;能規(guī)律性分離具代表性的有25個菌屬。,4,一、口腔正常菌群的獲得與發(fā)展 (Acquisition and development),5
2、,(一) 獲得,出生時 無菌 乳桿菌、酵母菌,暫時,,,6,出生后母親、近親傳播,7,8,(二) 發(fā)展1.乳牙萌出前(5個月內(nèi)): 定植于粘膜;需氧菌和兼性厭氧菌 出生1-3天時主要是“先驅菌” ——口腔鏈球菌、輕鏈球菌等 3個月后口腔內(nèi)有產(chǎn)黑色素普氏菌等厭氧菌 (白色念珠菌在新生兒口腔的檢出率達80%。),9,,2. 乳牙列形成時期(5-32個月):
3、牙齒的出現(xiàn),增加了細菌定植的環(huán) 境,口腔細菌的數(shù)量和種類增加,利于 各種細菌,包括厭氧菌的生長。 血鏈球菌、變形鏈球菌定植。 G+桿菌和G+絲狀菌增多。 發(fā)生齲病的第一個高峰期。,10,“窗口感染期”(window of infectivity): 出生后19~31個月(平均26個月), 變形鏈球菌最易在牙面定植感染。,,,3. 恒牙列形成時期 專性厭氧菌增加明顯;
4、 G-厭氧菌的數(shù)量到成年達高峰。 青春期——成年期——老年期,11,二.口腔正常菌群成員 Components of oral normal flora 主要介紹與口腔感染性疾病 有關的口腔細菌。,12,微生物分類的傳統(tǒng)等級,界 (Domain)門 (Phylum)綱 (Class)目 (Order)科 (Family)屬 (Genus)種 (Species)株 (
5、Strain),13,屬 (Genus):具有某些共同特征或密切相關的種歸為一個高一級的分類單元。種 (Species):具有高度特征相似性的菌株群,這個菌株群與其它類群的菌株有很明顯的區(qū)別。株 (Strain):從自然界分離得到的任何一種微生物的純培養(yǎng)物都可以稱為微生物的一個菌株。型(form或type):常指亞種以下的細分,當同種或同亞種不同菌株之間的性狀差異,不足以分為新的亞種時,可以細分為不同的型。,14,微生物命名,按
6、照《國際細菌命名法規(guī)》,采用林奈氏雙名法。屬名+種名+(命名人) 如:Escherichia coli未確定種名或不指特定的種時,可在屬名后加sp.表示??s寫形式 E. coli,15,口腔正常菌群成員分 類,16,1. G+需氧/兼性厭氧的球菌2. G+專性厭氧的球菌3. G-需氧/兼性厭氧的球菌4. G-專性厭氧的球菌 5. G+無芽胞不規(guī)則桿菌6. G+無芽胞規(guī)則桿菌7. G+芽胞桿菌8
7、. G-兼性厭氧桿菌9. G-專性厭氧桿菌,17,18,,,革蘭氏染色法,是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結構特征,而用以分類鑒定。,陽性,陰性,19,1.G+需氧/兼性厭氧的球菌,腸球菌屬(Enterococcus) 口腔球菌屬(Stomatoccus) 葡萄球菌屬(Staphylococcus)﹡鏈球菌屬(Streptococcus),2.G+專性厭
8、氧的球菌,消化鏈球菌屬 (Peptostreptococcus) 消化球菌屬 (Peptococcus),3.G-需氧/兼性厭氧的球菌,﹡奈瑟菌屬 (Neisseria) 布蘭漢氏菌屬 (Branhamella),4.G-專性厭氧的球菌,﹡韋榮菌屬 (Veillonella),5.G+無芽胞不規(guī)則桿菌,﹡放線菌屬 (Actinomyces) 羅斯菌屬 (Rothia) 真桿菌屬 (Eubacterium)
9、 棒狀桿菌屬 (Corynebacterium) 丙酸桿菌屬 (Propionibacterium) 雙歧桿菌屬 (Bifidobacterium) 諾卡氏菌屬 (Nocardia),6. G+無芽胞規(guī)則桿菌,﹡乳桿菌屬 (Lactobacillus),7.G+芽胞桿菌,芽胞桿菌屬 (Bacillus)梭菌屬(又叫梭狀芽胞桿菌屬) (Clostridium),8.G-兼性厭氧桿菌,嗜血菌
10、屬 (Haemophilus)﹡放線桿菌屬 (Actinobacillus) 艾肯菌屬 (Eikenella) 彎曲菌屬 (Campylobacter)﹡二氧化碳嗜纖維菌屬 (Capnocytophaga),9.G-專性厭氧桿菌,擬桿菌屬 (Bacteroides)﹡卟啉單胞菌屬 (Porphyromanas)﹡普雷沃菌屬(Provotella)﹡梭桿菌屬 (Fusobacterium) 纖
11、毛菌屬 (Leptotrichia) 沃林菌屬 (Wolinella) 月形單胞菌屬 (Selenomonas),﹡菌落形態(tài) ﹡菌細胞的染色特征 ﹡菌體形態(tài)、排列 ﹡生化特性檢驗 ﹡代謝產(chǎn)物分析,29,G+需氧/兼性厭氧的球菌,腸球菌屬(Enterococcus) 口腔球菌屬(Stomatoccus) 葡萄球菌屬(Staphylococcus)﹡鏈球菌屬(Streptococcus),糞腸球菌,頑固性根管感染
12、根管治療后的再感染,31,(一)鏈球菌屬(Streptococcus),G+兼性厭氧球菌,,33,?變形鏈球菌群(Streptococcus mutans group) ?唾液鏈球菌群(Streptococcus salivarius group) ?咽峽炎鏈球菌群(Streptococcus anginosus group) ?輕鏈球菌群(Streptococcus mitis group),,口腔鏈球菌屬的菌群分類,34
13、,1.變形鏈球菌群 (Streptococcus mutans group) 變形鏈球菌 (Streptococcus mutans) 遠緣鏈球菌 (Streptococcus sobrinus) 倉鼠鏈球菌 (Streptococcus cricetus) 鼠鏈球菌 (Streptococcus rattus) 道恩鏈球菌 (Streptococcus downei) 野鼠鏈
14、球菌 (Streptococcus ferus) 獼猴鏈球菌 (Streptococcus macacae),35,在不同培養(yǎng)基中生長時形態(tài)可發(fā)生變異而得名;一群表型特征相近,但血清型和遺傳型各異的鏈球菌。,36,主要分布于牙菌斑和唾液中。在人口腔中常見者為變形鏈球菌和遠緣鏈球菌。,37,根據(jù)變形鏈球菌群細胞壁多糖抗原的血清型反應可分為a~h 8個血清型。,38,* 變形鏈球菌(S.mutans):人口腔中檢出率
15、最高,以c血清型為最,達80%。血清型包括c、e、f型,39,* 遠緣鏈球菌(S.sobrinus):人口腔分離,檢出率次于變形鏈球菌。血清型d、g 從遺傳學上看,S. sobrinus和S. mutans為遠親關系,故命名遠緣鏈球菌。(也有命名茸毛鏈球菌,由于電鏡下細胞表面毛狀外膜層明顯。),40,倉鼠鏈球菌(S.cricetus):倉鼠口腔中分離而得名。人口腔中也可檢出,檢出率低。血清型為a型,41,鼠鏈
16、球菌(S.rattus):主要來自實驗大鼠口腔,人口腔中也可檢出,檢出率低,但野鼠中未分離出。血清型為b型,42,道恩鏈球菌(S.downei):也有命名汗毛鏈球菌人口腔中分離,檢出率低。血清型為h,43,野鼠鏈球菌(S.ferus):野鼠口腔中分離,人口腔中未發(fā)現(xiàn)。血清型為c型,44,獼猴鏈球菌(S.macacae):獼猴口腔中分離,人口腔中未發(fā)現(xiàn)。血清型為c,45,,46,變形鏈球菌群(S
17、treptococcus mutans group) (1)生物學特性 形態(tài)(菌體、菌落) 生長條件,,,,47,光鏡觀察菌體形態(tài):G+球菌,成對或鏈狀排列,鏈長中等或短,不活動。直徑0.6~1.0µm。,48,,,液體培養(yǎng)基中,呈長鏈狀。,49,偏酸性液體培養(yǎng)基中,菌細胞呈短桿狀、球桿狀。,SEM觀察菌體形態(tài):,不含蔗糖的液體培養(yǎng)基中:單個菌清晰,菌細胞表面光滑。含蔗糖
18、的液體培養(yǎng)基中:菌細胞表面被胞外多糖覆蓋。,TEM觀察菌體形態(tài):,細胞表面有一層薄的毛狀外膜層(fuzzy coat),粘附素位于其中。含蔗糖的培養(yǎng)基中:形成胞外多糖。,MS(Mitis Salivarius)上菌落形態(tài):,S.mutans典型菌落:呈粗糙型高凸、堅硬、嵌于瓊脂內(nèi),邊緣不齊,色淡蘭或灰蘭,直徑1mm±,表面呈毛玻璃樣,頂端有圓形透明的細胞外多糖水珠,久放后,菌落周圍有多糖外溢。,52,S.s
19、obrinus典型菌落:粘液型菌落表面常覆蓋有粘液滴樣帽狀物。,MS上菌落形態(tài):,53,變形鏈球菌群(Streptococcus mutans group) (1)生物學特性 形態(tài)(菌體、菌落) 生長條件,,,,54,微需氧或兼性厭氧,在含95%N2+5%CO2中生長良好;與其他鏈球菌相比,更耐酸,pH4.3時仍生長;不受桿菌肽(除倉鼠鏈球菌、野鼠鏈球菌、獼猴鏈球菌)、磺胺噻唑抑制
20、,培養(yǎng)基中加入這兩者后可作為選擇型培養(yǎng)基。,55,代謝底物:糖變形鏈球菌需要特殊生長因子——對氨基苯甲酸,56,57,58,變形鏈球菌群(2)致齲性① 對牙面的粘附② 合成胞外、胞內(nèi)多糖③ 產(chǎn)酸力和耐酸性,59,① 對牙面的粘附細胞壁結構(如表面粘附素、表面抗原Ⅰ/Ⅱ、葡聚糖連接蛋白和脂磷壁酸等) ----獲得性膜內(nèi)受體,② 合成胞外、胞內(nèi)多糖a. 細胞外酶,合成葡聚糖和變
21、聚糖:促進菌斑形成、參與菌斑基質(zhì)組成;生物屏障作用;作為胞外貯能形式b.胞內(nèi)貯能形式,當外源糖不足時,胞內(nèi)多糖易被降解產(chǎn)酸,使產(chǎn)酸時間延長,且為代謝提供了能量。,③ 產(chǎn)酸力和耐酸性a. 能發(fā)酵多種糖產(chǎn)酸,主要產(chǎn)物是乳酸。 b. 產(chǎn)酸力強,產(chǎn)酸迅速,且耐酸,耐酸 力僅次于乳桿菌。,(3)變形鏈球菌群 與齲病的關系 S.mutans和.sobrinus 目前公認的主要致齲菌。 與人類齲病的發(fā)生
22、 關系密切。,63,流行病學研究:無齲者口腔中分離的S.mutans數(shù)量明顯低于患齲者,S.mutans數(shù)量與齲損的嚴重程度正相關。S.sobrinus與青少年的齲病密切相關。,64,2.唾液鏈球菌群 (Streptococcus salivarius group) 唾液鏈球菌 (Streptococcus salivarius) 前庭鏈球菌 (Streptococcus vestibularis),65,(1)
23、生物學特性 G+球菌,直徑0.8~1.0µm,排列呈長鏈或短鏈。 兼性厭氧或微需氧菌。,66,MS平板:較大的淡藍色、飯團樣粘性菌落,由于合成的果聚糖所致。不能合成不溶性細胞外多糖。,67,唾液鏈球菌(S.salivarius):主要定植部位于口腔粘膜表面和舌背部粘膜,是唾液中占最大比例的菌群。前庭鏈球菌(S.vestibularis):定植于口腔前庭粘膜。,68,(2)致病性目前未發(fā)現(xiàn)
24、對人有致齲性。,69,3.咽峽炎鏈球菌群 (Streptococcus anginosus group) 中間鏈球菌 (Streptococcus intermedius)星群鏈球菌 (Streptococcus constellatus)咽峽炎鏈球菌 (Streptococcus anginosus),70,(1)生物學特性G+球菌,鏈狀排列,鏈可長可短;厭氧或兼性厭氧。MS瓊脂平板:菌落呈淡藍色花瓣樣。不能
25、利用蔗糖合成胞外多糖。,71,(2)致病性與齲病的關系尚不明確,因能產(chǎn)生中間溶解素的蛋白酶樣物質(zhì),與膿腫有關。,72,4.輕鏈球菌群 (Streptococcus mitis group) 血鏈球菌 (Streptococcus sanguinis) 格氏鏈球菌 (Streptococcus gordonii) 輕鏈球菌 (Streptococcus mitis) 副血鏈球菌 (Strept
26、ococcus parasanguis) 口腔鏈球菌 (Streptococcus oralis) 嵴鏈球菌 (Streptococcus scrista) 肺炎鏈球菌 (Streptococcus pneumoniae),73,(1)血鏈球菌(S.sanguinis) ① 生物學特性 G+球菌,長鏈狀排列, 直徑0.8~1.2µm。 兼性厭氧菌。,74,MS平板
27、:粗糙型菌落(培養(yǎng)基含蔗糖)或光滑型菌落(培養(yǎng)基不含蔗糖)。,75,可為變形鏈球菌提供生長所需的對氨基苯甲酸。,76,② 致病性牙菌斑的先驅菌之一;致齲性很低,未發(fā)現(xiàn)該菌與齲病的顯著關系;,77,,,78,,產(chǎn)生血鏈素、H2O2——抑制某些牙周炎可疑致病菌(如牙齦卟啉單胞菌、放線共生放線桿菌、中間普雷沃菌、具核梭桿菌、二氧化碳嗜纖維菌)構成宿主微生態(tài)屏障,維持口腔生態(tài)平衡,是對牙周健康有益的細菌。,79,數(shù)量減少
28、可引起齦下菌群發(fā)生變化,導致菌群失調(diào),可能引起牙齦炎和牙周炎等疾病,故目前對該菌在維持生態(tài)平衡中的機制及開發(fā)相應微生態(tài)制劑等方面的研究是熱點之一;在亞急性細菌性心內(nèi)膜炎患者中也可檢出。,80,(2)輕鏈球菌(緩癥鏈球菌) (S.mitis),81,① 生物學特性G+球菌,長鏈狀排列,直徑0.6~0.8µm;MS平板:菌落呈光滑型,培養(yǎng)4天, 有的菌落中心呈疣狀突起。,82,② 致病性
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