農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的儀器方法

1、農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)快速分析方法,內(nèi)容提要,,農(nóng)產(chǎn)品定義,1,,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的內(nèi)容及意義,2,,常規(guī)分析方法,3,,快速分析方法,4,農(nóng)產(chǎn)品,農(nóng)產(chǎn)品，是指來(lái)源于農(nóng)業(yè)的初級(jí)產(chǎn)品，或經(jīng)過(guò)初步加工處理的初級(jí)產(chǎn)品，即在農(nóng)業(yè)活動(dòng)中獲得的植物、動(dòng)物、微生物及其產(chǎn)品。,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的內(nèi)容,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià) （蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等） 農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析

2、 安全性評(píng)價(jià) （農(nóng)藥、獸藥分析殘留）,,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的意義,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)： 體現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的八大方面：水分、灰分、礦物元素、脂肪、碳水化合物、蛋白質(zhì)與氨基酸、有機(jī)酸、維生素。 不同農(nóng)產(chǎn)品中以上八種營(yíng)養(yǎng)成分的種類和含量各不相同。,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的意義,安全性：據(jù)統(tǒng)計(jì)，僅 2

3、000年全國(guó)累計(jì)發(fā)生150余起報(bào)告的重大食物中毒事件，中毒6237人，死亡135人，在中毒死亡者中有很大一部分是由于食用了國(guó)家明令禁止生產(chǎn)和使用的甲胺磷、雙氟磷、氟乙酰胺、毒鼠強(qiáng)、鹽酸克倫特羅等農(nóng)、獸藥引起。隱性中毒更是無(wú)法統(tǒng)計(jì)。研究證實(shí)，人類常見(jiàn)的癌癥、畸形、抗藥性及某些中毒現(xiàn)象都與食物中的有害殘留有關(guān)。,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的意義,十屆全國(guó)人大常委會(huì)第二十一次會(huì)議于2006年4月29日審議通過(guò)了《中華人民共和國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法》，并于當(dāng)年

4、11月1日起施行。 “民以食為天，食以安為先”,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)分析的意義,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)常規(guī)分析方法,化學(xué)分析法：總酸的測(cè)定、蛋白質(zhì)含量測(cè)定、碳水化合物的測(cè)定等。,化學(xué)分析法的內(nèi)容,第一節(jié) 植物中可溶性糖的測(cè)定第二節(jié) 糖料作物中蔗糖的測(cè)定 第三節(jié) 植物中淀粉的測(cè)定第四節(jié) 植物中蛋白質(zhì)測(cè)定第五節(jié) 植物中脂肪測(cè)定第六節(jié) 植物中粗纖維測(cè)定,第一節(jié) 植物中可溶性糖的測(cè)定,一、概述二、還原糖測(cè)定（斐林－碘量法）三、還原糖測(cè)定（索姆吉微量法

5、）四、還原糖測(cè)定（蒽酮比色法）,一、概述,植物體中的可溶性糖，通常指葡萄糖、果糖(單糖)及蔗糖(雙糖)三種。它們都溶于水(故亦有稱水溶性糖的)，也易溶于酒精中。植物體中糖分的含量依作物種類、品種特性及生育時(shí)期變化很大。外界環(huán)境條件例如氣溫、光照、雨水、施肥等許多因素，也影響糖分的含量。 作物在貯藏過(guò)程中，糖分不斷變化：開(kāi)始時(shí)由于多糖的水解而糖分含量增加，而后期又因呼吸作用而消耗了糖分。 因此，可溶性糖分的測(cè)定，對(duì)于鑒定作物品質(zhì)，

6、以及對(duì)于改進(jìn)栽培技術(shù)和選擇合適的貯藏方法都具有很大意義。,水溶性糖是光合作用的初級(jí)產(chǎn)物，通過(guò)測(cè)定水溶性糖的含量，可以了解光合作用的強(qiáng)度和效率。了解作物C、N代謝狀況，還可以了解不同的生產(chǎn)技術(shù)條件下（如施肥、灌溉、氣溫等）對(duì)作物糖分含量的影響，以便改進(jìn)生產(chǎn)技術(shù)條件下達(dá)到作物高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的需要。,二、還原糖測(cè)定（斐林－碘量法）,（一）方法原理（二）試劑配制 （三）操作步驟 （四）注意事項(xiàng),（一）方法原理,在嚴(yán)格規(guī)定的條件下，待測(cè)液中的還

7、原糖與已知量的、過(guò)量的氧化劑斐林試劑完成氧化還原反應(yīng)后，用碘量法測(cè)定剩余氧化劑的量，由凈消耗的氧化劑的量來(lái)求得還原糖的含量。還原糖與斐林溶液的氧化還原作用，須在沸熱的條件下進(jìn)行。此時(shí)斐林試劑使還原糖氧化和降解(脫羧)，生成葡萄糖一酸和CO32－， 同時(shí)二價(jià)銅還原為氧化亞銅沉淀。,（一）方法原理,上述反應(yīng)完成后，將溶液酸化并加入KI，由剩余斐林試劑所得的Cu2+與I—作用析出I2和Cu2I2淡黃色沉淀：

8、 2Cu2++4I———>Cu2I2+I2 生成的I2可用標(biāo)準(zhǔn)Na2S2O3液滴定 ： I2+2S2O3 2———> S4O6 2—+2I— 最后，由試劑空白標(biāo)定與樣品測(cè)定時(shí)所用Na2S2O3溶液毫升之差，查系列標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖毫克數(shù)與Na2S2O3毫克數(shù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可求得還原糖的量。,,（二）試劑配制,1、斐林A溶液：硫酸銅CuSO4·5H2O 50克，加水溶解，過(guò)濾，加0.

9、5毫升濃H2SO4，定容于1000毫升容量瓶。 2、斐林B溶液：氫氧化鈉150克，酒石酸鉀鈉KNaC4H4O6·4H2O 200克，溶解后定容于1000升容量瓶。使用前也可將斐林A、B兩液等體積混合成斐林試劑。,（二）試劑配制,3、25％碘化鉀溶液：125克碘化鉀溶解于水中，加3mol/lNaOH 1mL，加水至500毫升，貯存于冷暗處。 4、3 mol/l硫酸溶液：將167mL濃H2SO4緩緩注入833mL水中。 5、

10、0.5％淀粉指示劑：淀粉1克加少量水拌勻，緩緩傾入200mL沸水中，攪拌成稀度透明液。,下頁(yè),（二）試劑配制,6、0.05mol/l 1/2硫代硫酸鈉溶液：先配制1mol/l 1/2Na2S2O3溶液，即將124克Na2S2O3·5H2O溶于1000毫升煮沸后已冷卻的水中，另加無(wú)水碳酸鈉2克。取1mol/l 1/2Na2S2O3液250毫升，用煮沸后已冷卻的水稀釋成5升(每升加HgI10毫克防腐)，溶液貯于棕色瓶中放暗處。,返

11、回,（三）操作步驟,1、糖溶液的提取 2、還原糖的測(cè)定 3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,返回,1、糖溶液的提取,（1）水提取法 （2）酒精提取法 （3）雙糖(蔗糖)的水解,返回,（1）水提取法,新鮮樣品稱重后研磨或勻漿，洗入250毫升容量瓶，約150ml時(shí)，加2—3滴甲基紅指示劑，如呈紅色可用0.1mol/lNaOH中和至微黃色。 風(fēng)干樣品稱重后加少量水潤(rùn)濕后，洗入250毫升容量瓶中，同上中和其酸性。然后放入80℃水浴中保溫30分鐘，其間

12、搖動(dòng)數(shù)次，使糖分完全轉(zhuǎn)入溶液中。含蛋白質(zhì)多的樣品，須加醋酸鉛沉淀。 最后加水至刻度，搖勻后過(guò)濾。,返回,（2）酒精提取法,對(duì)含有大量淀粉或菊糖的樣品，用水提取會(huì)使部分糊精或菊糖進(jìn)入溶液而影響分析結(jié)果，同時(shí)過(guò)濾也困難，為此，最好采用酒精提取法：將研磨成糊狀的樣品加80％酒精100毫升，安裝上回流冷凝管，在水浴上80℃保溫提取三次，第一次30分鐘，后兩次各15分鐘，合并三次溶液，在85℃水浴上蒸發(fā)酒精提取液，一直到酒精溶液只剩下大約3—

13、5毫升時(shí)，用水洗入250毫升容量瓶中定容，即為糖的提取液(酒精提取液不必除蛋白質(zhì)，因蛋白質(zhì)不會(huì)溶解出來(lái))。,返回,（3）雙糖(蔗糖)的水解,酸水解：吸取上述澄清的糖液50毫升，放入100毫升容量瓶中，將容量瓶放入預(yù)熱到80—82℃水浴中，當(dāng)溫度上升至60℃后，加入3毫升濃HCl于糖液中，繼續(xù)保持8分鐘取出容量瓶，迅速冷卻，以甲基紅為指示劑，用飽和Na2CO3中和至金黃色，加水至刻度，此時(shí)蔗糖已水解為還原糖。,返回,2、還原糖的測(cè)定,吸取

14、待測(cè)糖液5—15毫升（含糖在2—20毫克范圍）于小三角瓶中，準(zhǔn)確加斐林試劑10毫升 ，加水使總體積大約25毫升，煮沸3分鐘，冷卻，加入25％KI5毫升和3 mol/l H2SO46m1，立即用0.05 mol/l 1/2Na2S2O3滴定至淡黃色，加淀粉指示劑2毫升，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消褪為終點(diǎn)。同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)空白標(biāo)定,返回,3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制,稱取干燥的葡萄糖0.20000克，加水溶解，定容100毫升。此為2毫克／毫升標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。分別吸

15、取此標(biāo)準(zhǔn)糖液1、3、5、7、9、11毫升于小三角瓶中，加水補(bǔ)足至15毫升，其余同上操作，最后用標(biāo)準(zhǔn)Na2S2O3滴定。然后以空白標(biāo)定與系列標(biāo)準(zhǔn)糖液消耗Na2S2O3液毫升之差數(shù)為縱座標(biāo)，系列葡萄糖的毫克數(shù)為橫座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。,返回,（四）注意事項(xiàng),1、滴定時(shí)必須先加KI，后加H2SO4，如果次序顛倒，則測(cè)得的含糖量顯著下降．滴定時(shí)必須保持足夠的酸性，否則終點(diǎn)不清。 2、淀粉指示劑不能過(guò)早加入，因?yàn)樾纬纱罅康矸畚轿铮_(dá)到終點(diǎn)時(shí)仍不

16、易褪色而造成誤差。 3、滴定至終點(diǎn)后，放置較久，又可呈現(xiàn)藍(lán)色，這是因?yàn)檫^(guò)量的KI在酸性條件下，能被空氣氧化而析I2的緣故，滴定溶液中還有Cu2I2淺黃色沉淀生成。,返回,三、還原糖測(cè)定（索姆吉微量法）,（一）方法原理（二）試劑配制（三）操作步驟,返回,（一）方法原理,先使還原糖與索姆吉試劑(與斐林試劑相似，但還有KI和KIO3存在)反應(yīng)生成Cu2O沉淀。然后用H2SO4酸化，Cu2O溶解成Cu+，同時(shí)KIO3與KI在酸性條件下生成

17、I2：KIO3+5KI+3 H2SO4　　　　3K2SO4+3H2O+3 I2生成的I2與Cu+離子產(chǎn)生氧化還原作用，消耗部分I2，溶液中剩余的I2用標(biāo)準(zhǔn)Na2S2O3滴定。同時(shí)做空白標(biāo)定。由空白標(biāo)定試驗(yàn)滴定時(shí)所用Na2S2O3毫升數(shù)，減去糖液作用后所用Na2S2O3毫升數(shù)，即為與糖液相當(dāng)?shù)腃u2O作用的I2量，查表可得糖液中還原糖的毫克數(shù)。,,返回,（二）試劑配制,1、索姆吉試劑：將25克無(wú)水Na2CO3和25克酒石酸鉀鈉(KNa

18、C4H4O6·4H2O)放入2升燒杯中，加水約500毫升使溶解，不斷攪拌，并將直立漏斗插入液面以下，從漏斗加入75毫升10％CuSO4·5H2O溶液。再加入20克NaHCO3，使完全溶解后再加5克KI，然后移入1升容量瓶中，加入250毫升0.100mol/l KIO3，用水定容。用微孔玻璃漏斗過(guò)濾，放置過(guò)夜后備用。,返回,下頁(yè),（二）試劑配制,2、KI—K2C2O4溶液：溶解2.5克KI及2.5克K2C2O4于100

19、毫升水中，每周晚配制現(xiàn)用。 3、 0.005 mol/l 1/2 Na2S2O3溶液：配制與上法同，同時(shí)稀釋。 4、淀粉指示劑：同上法。,下頁(yè),（二）試劑配制,（6）0.05mol/l 1/2硫代硫酸鈉溶液：先配制1mol/l 1/2Na2S2O3溶液，即將260克Na2S2O3·5H2O溶于100毫升煮沸后已冷卻的水中，另加無(wú)水碳酸鈉2克。取1mol/l 1/2Na2S2O3液250毫升，用煮沸后已冷卻的水稀釋成5升(每

20、升加HgI10毫克防腐)，溶液貯于棕色瓶中放暗處。,返回,（三）操作步驟,1、吸取5毫升約含0.5—2.5毫克還原糖的待測(cè)液放入25×200毫米試管中，加5毫升索姆吉試劑，搖動(dòng)混勻。,返回,下頁(yè),（三）操作步驟,2、試管口蓋以玻璃球或漏斗，在沸水浴中加熱15分鐘，小心將試管平穩(wěn)地置于流動(dòng)冷水浴中4分鐘，去蓋，沿管壁加入2毫升KI—K2C2O4及3毫升1mol/lH2SO4(溶液為堿性時(shí)不要搖動(dòng))，充分搖動(dòng)混勻，使Cu2O完全溶

21、解，再于冷水浴中放5分鐘，并搖動(dòng)2次。,下頁(yè),（三）操作步驟,3、用0.005 mol/l 1/2Na2S2O3滴定，以淀粉為指示劑。 4、同時(shí)以5毫升水代替糖液作空白標(biāo)定試驗(yàn)。 5、查得相當(dāng)?shù)倪€原糖毫克數(shù)。,返回,四、還原糖測(cè)定（蒽酮比色法）,（一）方法原理 （二）試劑配制 （三）操作步驟,返回,（一）方法原理,單糖類遇濃硫酸脫水成為羥醛類，再變成呋喃衍生物，后者可與葸酮縮合成藍(lán)綠色化合物，其顏色深淺與糖分含量成正相關(guān)，故可由

22、藍(lán)綠色的強(qiáng)度求得糖分的含量。,返回,（二）試劑配制,1、葡萄糖系列標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取1.0000克葡萄糖于1升容量瓶中，此為1000ppm母液。從中吸取1、2、4、6、8、10毫升注入100毫升容量瓶中，用水定容，即為含10、20、40、60、80、100ppm糖溶液的標(biāo)準(zhǔn)系列。 2、葸酮溶液：稱取0.100克葸酮溶解于100毫升72％的硫酸中(每100毫升0.1％葸酮溶液中的硫酸含量為比重1.84的濃H2SO474毫升)。此試劑須現(xiàn)用現(xiàn)

23、配制。,返回,（三）操作步驟,1、可溶性糖的提?。?2、測(cè)定： 3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：,返回,1、可溶性糖的提取：,稱取細(xì)碎樣品0.100克放入15毫升離心管中，加80％酒精10毫升，管口松塞一小塞子，于80—85℃水浴中保溫30分鐘。取出離心，將上層清液移入一個(gè)50毫升燒杯中。用此法對(duì)殘?jiān)貜?fù)提取兩次，使可溶性糖提取完全。然后將上述酒精溶液置于80—85℃水浴上蒸發(fā)，直至剩下約3毫升為止。然后用水定容25毫升，作為糖的待測(cè)液。,返回

24、,2、測(cè)定：,吸取待測(cè)糖液1—5毫升，移入25毫升容量瓶中，加水定容。吸取2毫升此稀釋糖溶液(糖濃度在20—80ppm之間)放入具塞比色管中，然后沿瓶壁緩緩注入葸酮試劑10毫升，立即搖動(dòng)半分鐘，放入沸水浴中加熱10分鐘，取出放入冷水中迅速冷卻，10分鐘后顯色穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行光電比色，用1厘米光徑的比色杯，波長(zhǎng)620納米處讀取吸收值。,返回,3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：,吸取系列標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液各2毫升，分別放入6只具塞比色管中，按上述同樣操作步驟顯色后

25、比色。以系列糖濃度為橫座標(biāo)，吸收值為縱座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。,返回,第二節(jié) 糖料作物中蔗糖的測(cè)定（旋光法）,一、方法原理 二、試劑配制 三、操作步驟,返回,一、方法原理,旋光法測(cè)糖的原理是基于糖類分子具有不對(duì)稱碳原子，可使通過(guò)的光的偏振面旋轉(zhuǎn)。各種糖類都有其特定的比旋，例如蔗糖水溶液的比旋是+66.5，葡萄糖是+52.8，果糖是—92.0，麥芽糖是+118等。,返回,下頁(yè),一、方法原理,比旋是指100毫升溶液中含有100克旋光性物質(zhì)，

26、通過(guò)液層厚度(即管長(zhǎng)) 1分米，溫度20℃時(shí)，鈉光源(波長(zhǎng)589.3納米)所旋轉(zhuǎn)的角度。因此當(dāng)液層厚度為1分米，濃度為每100毫升中C克時(shí)，偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角度可用以下式表示：　　　　　　　　　　　　　　　　　C偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角度＝比旋×L×　　　　　　　　　　　　　　　　 100,,下頁(yè),一、方法原理,因此，當(dāng)管長(zhǎng)一定時(shí)，　　　100C＝　　　　　×偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角度　　　比旋×

27、;L＝K×偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角度 式中K為常數(shù)，隨旋光物質(zhì)的種類和管長(zhǎng)不同而改變。蔗糖的比旋＝+66．5，如將L固定為2分米，則K＝0.75，故C＝0.75×偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角度。,,下頁(yè),一、方法原理,蔗糖的“規(guī)定當(dāng)量”(26克)是國(guó)際上統(tǒng)一蔗糖旋光測(cè)定的規(guī)定。通常指26克蔗糖溶于100毫升水中，溫度為17.5℃時(shí)的比重為1.100，把它通過(guò)2分米旋光管時(shí)的旋光度規(guī)定為100V。直接刻度V值的旋光儀就稱為

28、檢糖計(jì)，檢糖計(jì)的1°V表明相當(dāng)于有0.26克蔗糖溶于100毫升溶液中的濃度，若樣品稱重為26克，制成糖溶液的體積為100毫升時(shí)，則每1°V即表明樣品含蔗糖1％，用此測(cè)讀非常方便。,下頁(yè),一、方法原理,一般旋光儀(刻度360°)的度數(shù)可與檢糖計(jì)(100°V)的V值互相換算?！耙?guī)定當(dāng)量”為26克的蔗糖溶于100毫升水中，管長(zhǎng)為2分米旋光角度。 　　　　　　　　　　　　　　　　C 偏振光光面的旋轉(zhuǎn)角

29、度＝比旋×L× 　　　　　　　　　　　　　　　　100　　　　　　　　26＝+66.5°×2× 　　　　＝34.62° 　　　　　　　　100,,,下頁(yè),一、方法原理,即100°V≈34.62°，1°V≈0.3462°，1°≈2.8885°V由于1°V＝0.26克蔗糖/100毫升，故1°

30、;＝2.8885×0.26＝0.75克蔗糖/100毫升，　　　　　　　　旋轉(zhuǎn)角度×0.75樣品中的蔗糖％＝ 　　　　　　　×100％ 　　　　　　　　　　　26 式中旋轉(zhuǎn)角度是一般旋光儀上讀得的角度數(shù),,返回,二、試劑配制,（1）堿性醋酸鉛：60克醋酸鉛與20克氧化鉛加10毫升水研磨碎，放入蒸發(fā)皿中，蓋上表面皿，在沸水浴上加熱到原來(lái)的黃色變?yōu)榘谆蜃习咨缓筮厰囘吋铀?90毫升，冷卻后倒入瓶中沉清，

31、過(guò)濾后密封保存。（2）飽和Na2SO4溶液：用Na2SO4·10H2O配制飽和溶液。（3）酚酞：1％的酒精溶液。,返回,三、操作步驟,1、選擇代表性的樣品，按縱橫剖面均勻切細(xì)。稱取平均樣品26克，放在研缽中，加2—3克石英砂，研磨成糊狀后，用約80毫升水洗入100毫升容量瓶中(也可用臺(tái)秤稱取50—100克樣品，按1：1加水后在電動(dòng)攪拌機(jī)中攪碎成糊狀，然后用小燒杯稱取52克，用水洗入100毫升容量瓶中)。,返回,下頁(yè),三、操

32、作步驟,2、在80℃水浴上加熱30分鐘，并不時(shí)搖動(dòng)，使糖分浸出。稍冷后滴加1—5毫升堿性醋酸鉛以沉淀蛋白質(zhì)。避免過(guò)量的Pb(OAc)2，過(guò)多的醋酸鉛可滴加飽和Na2SO4溶液使之沉淀。然后將內(nèi)容物加水至刻度。若液面有泡沫，可加l一2滴乙醚排除。搖勻后放置澄清或過(guò)濾得澄清的待測(cè)液。,下頁(yè),三、操作步驟,3、先用清亮的待測(cè)液洗旋光管3次，然后將溶液裝滿管中，使管口液體呈一凸起，將活動(dòng)的圓玻璃片與旋光管垂直方向插入蓋上，如此可避免留有氣泡。把

33、管蓋扭緊，檢查管中是否有氣泡。然后測(cè)讀旋光儀上角的旋光角度或檢糖計(jì)上的°V，取三次測(cè)讀的平均數(shù)。,返回,四、結(jié)果計(jì)算,旋光角度× 0.75 蔗糖％＝　　　　　　　　　×100％ 　　　　　　　　 26檢糖計(jì)讀得的°V即為樣品的蔗糖％。,,返回,第三節(jié) 植物中淀粉的測(cè)定,一、酸水解法二、酶水解法三、氫氧化鋇法四、比重法約測(cè)馬鈴薯中淀粉,返回,一、酸水解法,（一）方法原理 （二）

34、方法優(yōu)缺點(diǎn)（三）操作步驟 （四）注意事項(xiàng),返回,（一）方法原理,淀粉在稀酸(1％HCl)的作用下，水解為糊精和麥芽糖，最后都轉(zhuǎn)化成葡萄糖，反應(yīng)式如下： (C6Hl0O5)n+nH2O　　　　　　n(C6Hl2O6)　　淀粉　　　　　　　　　　　葡萄糖然后測(cè)定葡萄糖的量，再由其量推算出淀粉的含量。,,返回,（二）方法優(yōu)缺點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)：分析步驟簡(jiǎn)單，水解時(shí)間短，約3—4小時(shí)可完成，所以采用較為普遍。缺點(diǎn)：酸水解淀粉的同時(shí)，半纖維素和

35、多縮戊糖也隨之水解，產(chǎn)生正誤差。,返回,（三）操作步驟,1、稱樣水解2、檢查水解是否完全3、沉淀蛋白質(zhì)4、過(guò)慮定容5、測(cè)定還原糖,返回,1、稱樣水解,稱樣,,1％HCl 150毫升,,,加熱過(guò)程中須常常搖動(dòng)，并注意三角瓶?jī)?nèi)的液面浸入沸水中，同時(shí)切勿使三角瓶直接觸水浴鍋底，以免跳動(dòng)或樣品焦化。,,約3－4小時(shí),返回,2、檢查水解是否完全,用皮頭滴管吸取少許帶固體顆粒的懸液，放在白瓷板上，加2滴I2一KI溶液，如固體不顯藍(lán)色，紅色或

36、紫色，說(shuō)明水解已完畢。所取溶液須無(wú)損地倒回三角瓶中，并用少量水沖洗滴管，洗液全部收集在三角瓶中(也可于玻片上在低倍顯微鏡下觀察顏色)。如水解不完全，應(yīng)繼續(xù)加熱半小時(shí)后再進(jìn)行檢查，直到水解完全為止。,返回,3、沉淀蛋白質(zhì),水解結(jié)束后，冷至室溫，加甲基紅3—4滴，用10％NaOH中和至微黃色為度。然后逐滴加入10％中性Pb(OAc)2約5—10毫升，以沉淀蛋白質(zhì)。靜置片刻，待上部溶液澄清后，再加入幾滴Pb(OAc)2溶液，檢查蛋白質(zhì)是否沉淀

37、完全。繼續(xù)滴加Pb(OAc)2溶液直至無(wú)白色絮狀沉淀產(chǎn)生為止。,返回,4、過(guò)慮定容,將水解液過(guò)濾入250毫升容量瓶中，用水洗滌三角瓶和沉淀數(shù)次，濾液全部收集于容量瓶中，加水定容。,返回,5、測(cè)定還原糖,用吸管吸取50毫升清液于100毫升容量瓶中，逐滴加入5一7毫升飽和Na2SO4溶液以除去過(guò)量的醋酸鉛，至不再產(chǎn)生白色PbSO2沉淀為止，加水定容后過(guò)濾。此即由淀粉水解而得到的葡萄糖溶液，可吸取適當(dāng)量(籽粒樣品可吸取10毫升，含葡萄糖約2—

38、20毫克)，用斐林——碘量法測(cè)定還原糖。,返回,（四）注意事項(xiàng),1、具有長(zhǎng)約50—60厘米玻管塞子，為使溶液濃度在加熱過(guò)程中不致改變，加熱蒸發(fā)的水，可由空氣冷凝后是流回瓶中。2、此處注意勿加入過(guò)量的堿，因單糖在堿性溶液中易分解，且在加入Pb(OAc)2沉淀蛋白質(zhì)時(shí)會(huì)形成糖的鉛鹽沉淀。,返回,下頁(yè),（四）注意事項(xiàng),3、注意在近中性溶液中，也可能產(chǎn)生氫氧化鉛的白色沉淀，必須與微帶黃色或白色的絮狀、較輕、懸浮在溶液中的蛋白質(zhì)沉淀區(qū)分開(kāi)，Pb

39、(OH)2沉淀則較細(xì)、較重，能迅速地沉淀下來(lái)。 4、過(guò)量的Pb(OAc)2對(duì)下步測(cè)定有礙，必須除去。但如不立即測(cè)定還原糖，則可暫不除去鉛，因?yàn)殂U離于可以防腐。,返回,二、酶水解法,（一）方法原理 （二）方法優(yōu)缺點(diǎn)（三）操作步驟 （四）注意事項(xiàng),返回,（一）方法原理,淀粉酶將淀粉水解為麥芽糖及糊精，最后也都水解成葡萄糖。測(cè)定所得葡萄糖量，就可計(jì)算淀粉含量。,返回,（二）方法優(yōu)缺點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)：結(jié)果準(zhǔn)確，淀粉酶有嚴(yán)格的選擇性，它只水解淀粉

40、而不水解其他成分。缺點(diǎn)：水解時(shí)間長(zhǎng)，操作麻煩。,返回,（三）操作步驟,稱樣,,250ml三角瓶,,,少量水濕潤(rùn),,100毫升熱水,,沸水浴中加熱1小時(shí),,,加入淀粉酶,,加入磷酸鹽緩沖溶液10毫升，甲苯5滴,,45—55℃恒溫箱中保溫2晝夜或更長(zhǎng),,檢查水解是否完全,,250毫升容量瓶,,濾液酸水解,,中和、測(cè)定,返回,（四）注意事項(xiàng),1、溫度高于55℃，若到70一75℃，酶活性將大大降低，或是完全失去作用，因此保溫必須嚴(yán)格。 2、

41、保溫時(shí)間依樣品種類而異。有的樣品如馬鈴薯淀粉的酶水解可延至5晝夜。 3、加入20％HCl 10毫升，為使溶液最后達(dá)2％的HCl酸度，也可以用其它濃度如25％HCl調(diào)節(jié)。,返回,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)常規(guī)分析方法,儀器分析方法： 原子吸收光譜儀：可以測(cè)定70余種元素； 原子發(fā)射光譜儀：可以測(cè)定70余種元素； 原子熒光光譜儀：適用于樣品中砷、汞、硒、錫、鉛、鉍、銻、碲、鍺、鎘、鋅等十一種元素的痕量分析測(cè)

42、量； 氣相色譜儀：揮發(fā)性成分分析； 紫外可見(jiàn)光譜儀 ：廣譜性測(cè)定。,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的快速檢測(cè)方法,農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的快速檢測(cè)方法： 農(nóng)藥殘留快速分析儀； 近紅外光譜儀； 電化學(xué)分析法。,農(nóng)藥殘留快速分析儀,測(cè)定原理： 丁酰膽堿酯酶 酶活性被（不）抑制

43、 無(wú)分解產(chǎn)物 無(wú)色溶液 底物 少量分解產(chǎn)物 淡黃色,,,,,,,,顯色劑,酶,農(nóng)藥,被抑制,不抑制或部分抑制,,顯色劑,農(nóng)藥殘留快速分析儀,檢測(cè)步驟,取2克樣本（非葉菜類取4克），切碎,,加入20毫升提取試劑，震蕩1-2分鐘，倒出上清液，靜置3-5分鐘,,于平底小試管中加入50微升酶、3毫升樣本提取液、50微升顯色劑在37℃-38℃下培養(yǎng)

44、30分鐘,,于待測(cè)的5只平底小試管內(nèi)分別加入50微升底物，倒入比色杯內(nèi)，進(jìn)行儀器測(cè)定,農(nóng)藥殘留快速分析儀,檢測(cè)結(jié)果計(jì)算公式： △Ac：對(duì)照組3分鐘后與3分鐘前吸光值之差； △As：樣本3分鐘后與3分鐘前吸興值之差。 注：對(duì)照組的比色杯中用3ml提取試劑代替樣本提取液 抑制率 70，產(chǎn)品不合格，不能食用，否則，可以食用。,,近紅外

45、快速分析儀,近紅外光（Near Infrared，NIR）是介于可見(jiàn)光（VIS）和中紅外光（MIR）之間的電磁波，波長(zhǎng)范圍為750~2500nm，習(xí)慣上又將近紅外區(qū)分為近紅外短波（750~1100nm）和近紅外長(zhǎng)波（1100~25nm）兩個(gè)區(qū)域。,近紅外快速分析儀,紅外光譜區(qū),近紅外快速分析儀,對(duì)稱伸縮振動(dòng)---非對(duì)稱伸縮振動(dòng)---搖擺振動(dòng)---搖擺振動(dòng)---彎曲振動(dòng)---剪切振動(dòng),近紅外快速分析儀,測(cè)定原理：近紅外光譜主要是由于分子振