對羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析

1、Comment[微微微微1]:還是“相近”？應(yīng)該相同吧，否則下面的公式不成立。當(dāng)然，說相近也可以。實驗實驗對羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析對羥基苯甲酸酯類混合物的反相高效液相色譜分析Ⅰ.實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?1)了解高效液相色譜儀構(gòu)造(2)了解高效液相色譜分析操作(3)學(xué)習(xí)高效液相色譜保留值定性方法和歸一化法定量方法Ⅱ.實驗用品實驗用品儀器：儀器：高效液相色譜儀；紫外光度檢測器；記錄儀；10μL微量進樣器；超聲波發(fā)生器。試劑：試

2、劑：對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯等，均為分析純；甲醇（分析純）；二次蒸餾水。Ⅲ.實驗原理實驗原理在對羥基苯甲酸酯類混合物中含有對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯，它們都是強極性化合物，可采用反相液相色譜進行分析，選用非極性的C18烷基鍵合相作固定相，甲醇的水溶液作流動相。由于在一定的實驗條件下，酯類各組分的保留值保持恒定，因此在同樣條件下，將測得的未知物的各組

3、分保留時間，與已知純酯類備組分的保留時間進行對照，即可確定未知物中各組分存在與否。這種利用純物質(zhì)對照進行定性的方法，適用于來源已知，且組分簡單的混合物。本實驗采用歸一化法定量，歸一化法使用條件及計算公式，與氣相色譜分析法相同：對羥基苯甲酸酸類混合物屬同系物，具有相同的生色團和助色團，因此它們在紫外光度檢測器上具有相同的校正因子，故上式可簡化為：Ⅳ.實驗條件實驗條件溶液的配制：溶液的配制：(1)標(biāo)準(zhǔn)貯備液：分別于四只100mL容量瓶中，配

4、制濃度均為1000μgmL1的上述四種酯類化合物的甲醇溶液。(2)標(biāo)準(zhǔn)操作液：用上述四種標(biāo)準(zhǔn)貯備液分別于四只10mL容量瓶中，配制濃度均為10μgmL1的四種酯類化合物的甲醇溶液，混勻備用。(3)未知樣品色譜條件：色譜條件：(1)色譜柱長25cm、內(nèi)徑3mm，裝填C18烷基鍵合相，粒度為10μm的固定相。(2)流動相甲醇：水=55：45，流量1mLmin1。%1001??????niiiiiiAfAfw%1001????niiiiAAw

5、1.歸一化法的優(yōu)點是：簡便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件如進樣量、流速等變化時，對結(jié)果影響小。但若試樣中的組分不能全部出峰，則不能應(yīng)用此法。本實驗樣品為同系物，若各組分的相對校正因子值相近，所以可以略去。2.流動相極性大于固定相極性的色譜稱為反相色譜，反之稱為正相色譜。本實驗所用樣品均為極性化合物，依據(jù)“相似相溶”原則，宜選用極性固定相、非極性的流動相，即選擇正相色譜。但是，高效液相色譜的可貴之處是它的分離效能很高，對于極性化合物往往用反相色譜也能