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1、自噬及其研究方法概述1自噬(自噬(Autophagy)及其研究方法概述)及其研究方法概述一、背景一、背景概念概念:目前根據(jù)發(fā)生過程分為三類:Macroautophagy,Microautophagy和ChaperonemediatedautophagyCMA)大自噬(Macroautophagy)即我們說的自噬(autophagy)微自噬(Microautophagy):是指溶酶體主動、直接吞噬胞漿成分的一種方式分子伴侶介導的自噬(Ch
2、aperonemediatedautophagy,CMA):一些分子伴侶,如hsp70,能幫助未折疊蛋白轉(zhuǎn)位入溶酶體。通常說的自噬泛指Macroautophagy.自噬是細胞內(nèi)的一種“自食(Selfeating)”的現(xiàn)象,凋亡是“自殺(Selfkilling)”的現(xiàn)象,二者共用相同的刺激因素和調(diào)節(jié)蛋白,但是誘發(fā)閾值和門檻不同,如何轉(zhuǎn)換和協(xié)調(diào)目前還不清楚.自噬是指膜(目前來源還有爭議,大部分表現(xiàn)為雙層膜,有時多層或單層)包裹部分胞質(zhì)和細胞
3、內(nèi)需降解的細胞器、蛋白質(zhì)等形成自噬體(autophagosome),最后與溶酶體融合形成自噬溶酶體(autophagolysosome),降解其所包裹的內(nèi)容物,以實現(xiàn)細胞穩(wěn)態(tài)和細胞器的更新。自噬的步驟可以大概總結(jié)為下面四步:步驟1:細胞接受自噬誘導信號后,在胞漿的某處形成一個小的類似“脂質(zhì)體”樣的膜結(jié)構(gòu),然后不斷擴張,但它并不呈球形,而是扁平的,就像一個由2層脂雙層組成的碗,可在電鏡下觀察到,被稱自噬及其研究方法概述31)自噬是細胞消化
4、掉自身的一部分,即selfeating,初一看似乎對細胞不利。事實上,細胞正常情況下很少發(fā)生自噬,除非有誘發(fā)因素的存在。這些誘發(fā)因素很多,也是研究的熱門。既有來自于細胞外的(如外界中的營養(yǎng)成分、缺血缺氧、生長因子的濃度等),也有細胞內(nèi)的(代謝壓力、衰老或破損的細胞器、折疊錯誤或聚集的蛋白質(zhì)等)。由于這些因素的經(jīng)常性存在,因此,細胞保持了一種很低的、基礎(chǔ)的自噬活性以維持自穩(wěn)。2)自噬過程很快,被誘導后8min即可觀察到自噬體(autoph
5、agosome)形成,2h后自噬溶酶體(autolysosome)基本降解消失。這有利于細胞快速適應惡劣環(huán)境。3)自噬的可誘導特性:表現(xiàn)在2個方面,第一是自噬相關(guān)蛋白的快速合成,這是準備階段。第二是自噬體的快速大量形成,這是執(zhí)行階段。4)批量降解:這是與蛋白酶體降解途徑的顯著區(qū)別5)“捕獲”胞漿成分的非特異性:由于自噬的速度要快、量要大,因此特異性不是首先考慮的,這與自噬的應急特性是相適應的。6)自噬的保守性:由于自噬有利于細胞的存活,
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