斑馬魚仔魚和行為在環(huán)境毒理學(xué)研究中的方法探索與應(yīng)用.pdf

1、斑馬魚作為一種國際通用的模式生物,在環(huán)境風(fēng)險物質(zhì)的生態(tài)安全性與人群健康風(fēng)險的評價中發(fā)揮著重大的作用。傳統(tǒng)的毒理學(xué)實驗主要是模式生物的急性及亞急性胚胎毒理學(xué)實驗,但這些方法有很大不足之處。雖然斑馬魚行為指標作為生物毒理學(xué)標志物在理論上具有非常敏感而有應(yīng)用價值的特點,但至今,很少有研究將行為指標應(yīng)用于環(huán)境風(fēng)險物質(zhì)毒理學(xué)及藥物的藥理學(xué)研究中。本文旨在傳統(tǒng)毒理學(xué)的基礎(chǔ)上,構(gòu)建一套相對完整的、以模式生物斑馬魚胚胎及其仔魚行為為中心的分析技術(shù)體系,

2、并將其應(yīng)用到環(huán)境風(fēng)險物質(zhì)的神經(jīng)及行為毒性研究中。首先,利用斑馬魚行為分析系統(tǒng)(Viewpoint),構(gòu)建并優(yōu)化一套相對完整的斑馬魚仔魚行為指標的檢測方法及其流程；然后對正常仔魚的行為進行檢測及定量分析,得出正常培養(yǎng)條件下,健康仔魚行為的統(tǒng)計學(xué)特征和規(guī)律；然后利用上述方法對按傳統(tǒng)方法酒精暴毒后的仔魚的行為進行檢測,構(gòu)建不同處理組仔魚行為參數(shù)的統(tǒng)計比較方法；最后,將上述方法推廣應(yīng)用到5種全氟化合物的行為毒性檢測中,研究上述方法的相對于傳統(tǒng)指

3、標和方法的敏感性及可行性。實驗結(jié)果顯示,本研究中所建立的行為分析技術(shù)體系可以高通量、快速、準確地檢測分析仔魚的運動活力,運動頻率,對光周期刺激反應(yīng),對暗刺激反應(yīng)等行為表現(xiàn)；進一步對正常仔魚的上述幾種行為特征做了定量統(tǒng)計,分析得出了正常仔魚各項行為指標的參數(shù)特征及統(tǒng)計學(xué)規(guī)律；酒精暴毒仔魚的行為結(jié)果顯示,在傳統(tǒng)毒理學(xué)方法的基礎(chǔ)上,行為指標可以更敏感的顯示出酒精對胚胎及其仔魚的行為毒性；最后一部分的方法用實驗也表明此行為分析方法可以應(yīng)用到環(huán)境