2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、三甲基氯化錫(TMT)是一種有機(jī)錫金屬污染物,廣泛存在于水環(huán)境中,對環(huán)境和人類具有健康風(fēng)險(xiǎn)。本文用斑馬魚模式生物研究TMT暴毒對胚胎早期發(fā)育,血管生成和心血管系統(tǒng)的影響。
   野生型5D品系胚胎在8-96hpf期間暴毒于不同濃度的TMT溶液中,96hpf時觀察發(fā)現(xiàn)TMT引起半數(shù)胚胎死亡的濃度(LC50)為8.1μM,引起半數(shù)胚胎致畸的濃度(EC50)為2.9μM。TMT暴毒對胚胎的致畸效應(yīng)很明顯,主要的畸形有心包囊水腫和卵黃囊

2、水腫。另外用血管轉(zhuǎn)基因斑馬魚f1i-1胚胎熒光觀察發(fā)現(xiàn),TMT可導(dǎo)致胚胎血管發(fā)育畸變,主要包括體節(jié)間血管交叉、缺失和增生。為了篩選TMT毒性的敏感暴毒窗口期,采用不同時期的暴毒,并均于96hpf觀察致畸表型,我們發(fā)現(xiàn)48-72hpf為TMT暴毒的敏感窗口,而且10μM劑量下,即可引起胚胎100%的心包囊水腫畸形且無致死效應(yīng)。隨后用斑馬魚全基因微陣列分析TMT的毒性機(jī)制。48hpf期5D品系胚胎暴毒于10μMTMT和胚胎培養(yǎng)液對照組,于暴

3、毒后12h(60hpf)和24h(72hpf),抽提胚胎總RNA用于全基因微陣列分析。結(jié)果表明,在10μM劑量下于48-72hpf對斑馬魚進(jìn)行暴毒,有1,402個基因發(fā)生顯著變化(p<0.05);如果變化倍數(shù)>2,變化基因數(shù)為444個。qRT-PCR定量分析微陣列檢測到的27個基因發(fā)現(xiàn),qRT-PCR和微陣列檢測的結(jié)果是一致的,且大量基因的實(shí)際變化(q-PCR)倍數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于微陣列中的基因變化倍數(shù),如arf3和arf5兩個基因在微陣列中檢

4、測結(jié)果分別為表達(dá)升高29倍和14倍,而q-PCR結(jié)果則分別為1938倍和1523倍。斑馬魚胚胎整體原位雜交進(jìn)一步分析arf3,arf5和atf3三個基因的表達(dá),發(fā)現(xiàn)TMT暴毒后顯著增加了這些探針的染色,進(jìn)一步定位和驗(yàn)證了微陣列中變化的基因。IngenuityPathwayAnalysis(IPA)分析TMT微陣列結(jié)果表明,TMT暴毒對斑馬魚胚胎的毒性效應(yīng)涉及神經(jīng)行為毒性.心血管毒性,生殖毒性,代謝毒性,以及癌癥,細(xì)胞凋亡和內(nèi)分泌紊亂等。

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