進出口動物源性食品中三聚氰胺快速檢測方法—elisa編制說明

1、1《進出口動物源性食品中三聚氰胺快速檢測方法進出口動物源性食品中三聚氰胺快速檢測方法ELISA法》編制說明編制說明一、標準制定的任務來源及意義本標準的制定工作是由中華人民共和國國家認證認可監(jiān)督管理委員會提出并歸口，由北京出入境檢驗檢疫局研究起草，計劃編號為2008B184。本標準制定了進出口動物源性食品中三聚氰胺快速檢測方法ELISA法。三聚氰胺（英文名Melamine，CAS:108781，分子式C3N6H6）是一種用途廣泛的有機化工

2、原料，禁止在食品和動物食品中添加，但因其結構中含有多個氨基氮而被一些不法商販添加到植物蛋白中以提高蛋白的含量。其危害最早源于2007年3月美國發(fā)生的寵物貓、狗中毒死亡事件。經美國FDA證實，貓、狗死亡是寵物食品的原料受三聚氰胺污染，并指出其中小麥蛋白原料來自中國，由此引起了國內外對三聚氰胺的高度關注。三聚氰胺一方面可能殘留于食用動物組織，進而污染畜產品食品；另一方面，三聚氰胺也可以直接污染小麥、大米等谷物食品。無論何種污染途徑，都可能危

3、害人類健康、甚至造成人類中毒、死亡的危險。2008年9月16日，國家質檢總局公布了全國嬰幼兒配方奶粉22家生產企業(yè)的69批次產品檢出了含量不同的三聚氰胺的檢查結果，再次將三聚氰胺聚焦為食品安全檢測中的重要檢測對象。三聚氰胺在食品中的限量值，目前僅針對乳和乳制品。對于嬰幼兒配方奶粉限量值我國和香港地區(qū)、澳大利亞、新西蘭、加拿大以及歐盟都制定在1mgkg，美國沒有對嬰幼兒配方奶粉制定一個控制的限量；我國對其他乳和含乳15%的食品限量值為2.

4、5mgkg。三聚氰胺傳統(tǒng)的檢測方法有重量法、升華法，但方法檢測限不能滿足要求。近來發(fā)展起了色譜法。我國農業(yè)部發(fā)布《飼料中三聚氰胺的測定》公告，確定了飼料中三聚氰胺測定的農業(yè)行業(yè)標準NYT13722007，該標準采用高效液相色譜法（HPLC）和氣相色譜質譜聯用法（GCMS），HPLC法最低定量限為2mgkg，GCMS法最低定量限為0.05mgkg。2008年10月7號，國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局、國家標準化管理委員會批準發(fā)布了《原料乳與乳制

5、品中三聚氰胺檢測方法》（GBT223882008）國家標準，規(guī)定了高效液相色譜法、氣相色譜質譜聯用法、液相色譜質譜質譜法三種方法為三聚氰胺的檢測方法，檢測定量限分別為2mgkg、0.05mgkg和0.01mgkg。2008年10月15日，又發(fā)布了《原料乳中三聚氰3五、方法的主要技術指標1、方法檢測限研究建立的三聚氰胺直接競爭ELISA檢測方法，其標準溶液的線性范圍為20～500gL。經加標回收試驗，針對嬰兒奶粉和嬰兒豆奶粉的檢測限≤1.

6、0mgkg，液態(tài)奶及含乳巧克力、乳清粉、酸奶等含乳食品樣品經前處理及掩蔽劑稀釋后的檢測限≤2.5mgkg，均滿足目前三聚氰胺的安全限量標準（MRLs）的要求，即針對嬰幼兒為1.0mgkg和其他乳品和含乳制品為2.5mgkg。同時本方法還使用于肉類（雞、魚肉）、雞蛋和醬油。2、方法精密度嚴格按本標準所確定的操作程序，對三聚氰胺檢測進行了精密度的測試，分別以板內變異和板間變異表示。取六個含不同三聚氰胺濃度的實驗樣品，進行ELISA分析，每個

7、濃度實驗樣品作10個復孔，對測得抑制率（IC）進行分析，變異系數均＜10%。取六個不同濃度的三聚氰胺標準溶液，進行ELISA分析，每個濃度每天作兩次分析，綜合5天測得的抑制率（IC）吸光度值進行分析，變異系數均＜10%。3、方法準確度選擇10種不含三聚氰胺的樣品，分別添加三聚氰胺至樣品中3個不同含量水平，提取后采用直接競爭ELISA方法檢測，計算樣品加標回收率，以加標回收率表示檢測方法的準確度。結果顯示，回收率均在81128%之間（見表