2012cb966500 非整合人誘導性多能干細胞（ips）及相關技術用于β地中海貧血治療的研究

1、項目名稱：非整合人誘導性多能干細胞（非整合人誘導性多能干細胞（iPSiPS）及）及相關技術用于相關技術用于β地中海貧血治療的研地中海貧血治療的研究首席科學家：潘光錦潘光錦中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院康研究院起止年限：2012.12012.1至2016.82016.8依托部門：中國科學院中國科學院細胞庫。本研究擬對現(xiàn)有的胚胎干細胞培養(yǎng)技術進行改進：利用不同發(fā)育階段的IVF廢棄的胚胎（從桑椹胚到孵出的晚期囊胚

2、）分離的人ESC細胞進行均一性研究，尋找最優(yōu)化的細胞分離時間；通過對人源性的飼養(yǎng)層細胞及無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系進行優(yōu)化，建立安全、穩(wěn)定的人胚胎干細胞系技術平臺。并在此基礎上，建立不同突變類型β地中海貧血人胚胎干細胞株10株以上。非整合β地中海貧血病人iPS細胞與地貧胚胎干細胞比較性研究。對比研究地貧ES及iPS，建立其表觀遺傳和基因表達的數(shù)據(jù)庫。利用基因芯片及高通量DNA測序技術，對比檢測地貧iPS與ES在SNP，DNA甲基化(DNAmeth

3、ylation)，組蛋白修飾(HistoneModification)，外顯子序列(ExonSequencing)等方面的差異。全面評價iPS在全能性，表觀遺傳學，基因組完整性，相關功能性細胞分化的能力等，明確造血分化用iPS的全能性，安全性等應用標準。3、研究修復地貧、研究修復地貧iPSiPS的突變基因。探討和評價經(jīng)基因修復等操的突變基因。探討和評價經(jīng)基因修復等操作后作后iPSiPS的基因組及表觀遺傳的穩(wěn)定性，多能性及安全性等指標。建

4、的基因組及表觀遺傳的穩(wěn)定性，多能性及安全性等指標。建立多樣性的非整合地貧立多樣性的非整合地貧iPSiPS細胞庫。細胞庫。利用基因重組技術修復突變基因?；蛐迯秃骾PS基因組及表觀遺傳學穩(wěn)定性的研究。通過基因芯片的技術手段檢測基因修復后iPS的SNP，CNV等代表基因組穩(wěn)定性的指標。并進行外顯子測序(ExonSequencing)來確定有無重要基因發(fā)生突變等。利用CHIP結(jié)合高通量測序技術確定經(jīng)體外基因修復后的iPS在組蛋白修飾，DNA甲