小鼠誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的建立及其分化研究.pdf

1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterGenerationofinducedpluripotentstemcellsanddifferentiationByXiangqianZhangSupervisor：ProfFuguangLiDepartmentofMicrobiologyandImmunologyBasicMedicineCollegeofZhengzh

2、ouUniversitySeptember2013摘要小鼠誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的建立及其分化研究研究生：張向前導(dǎo)師：李付廣教授鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室河南鄭州450001摘要樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcells，DC)屬于專職抗原遞呈細(xì)胞，其能攝取、；DHr、處理和遞呈抗原，并將后者攜帶的信息呈遞給T淋巴細(xì)胞，進(jìn)而引發(fā)一系列免疫應(yīng)答，其效率是所有該類細(xì)胞中最強(qiáng)的。DC參與多種病理生理過(guò)程，并具有強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)功能，因此以

3、DC為基礎(chǔ)的免疫治療己成為腫瘤治療的一種新模式。然而DC獲取困難，通過(guò)患者自體骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)和擴(kuò)增后獲取白體內(nèi)源性DC，技術(shù)操作困難，且患者難以承受，其療效目前尚有爭(zhēng)議，不適合臨床廣泛應(yīng)用。通過(guò)胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell，ESC)定向分化制備DC，則具有倫理學(xué)限制，而且所得DC并非自體細(xì)胞，存在免疫排斥的可能。誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(inducedpluripotentstemcells，iPSCs)技術(shù)的出現(xiàn)則

4、為臨床上DC的腫瘤免疫治療所需的種子細(xì)胞的制備提供了另一種新途徑。iPSCs是由體細(xì)胞誘導(dǎo)而成的干細(xì)胞，具有和ESC類似的發(fā)育多潛能性，在形態(tài)學(xué)、基因表達(dá)狀況和表觀遺傳修飾方面都與ESC十分相似。iPSCs的應(yīng)用價(jià)值在于獲得方法相對(duì)簡(jiǎn)單和穩(wěn)定，在技術(shù)上和倫理上都比其他方法更有優(yōu)勢(shì)，在再生醫(yī)學(xué)中起著非常重要的作用。鑒于此，本研究擬通過(guò)多因子重編程技術(shù)，誘導(dǎo)小鼠成熟體細(xì)胞為iPSCs，并利用免疫組織化學(xué)、熒光、擬胚體(EB)實(shí)驗(yàn)、RTPCR