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1、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文菜用大豆離體再生與遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化研究StudyonOptimizationofPlantletsRegenerationGeicTransfmationSystemfVegetabletypeSoybean鐘燦二0一二年四月Abstract1、HighfrequencyplantregenerationofvegetabletypebeanTostudytheeffectofsterilizationearl
2、yculturedaysdifferentconcentrationsof6BAmediumfmulationsoninductionelongationofadventitiousbudsdifferentconcentrationofIBAonrootinginductionembryonictipsfromninevegetabletypesoybeanwereusedastheinitialexplants.Theresults
3、showedthattheoptimalsterilizationwasusing0.1%HgCl2f10min5%NaClOf5min.TheoptimaladventitiousbudsinductionfmulationwasMSB5basemediumwith3.0mgL16BAtheoptimalearlyculturedaysofembryonictipswas2d.Thecombinationof1.0mgL16BA0.1
4、mgL1NAAbenefitedtoproducemanyadventitiousbuds.Thecombinationof0.05mgL16BA0.1mgL1IBAbenefitedtotheelongationofadventitiousbuds.AmongthefourvarietiestheembryonictipsfromJiaoda05133isthebestonefregenerationwith90.86%ofadven
5、titiousbudsinductionrate4.65ofmeannumberofadventitiousbuds1.38cmofmeanlengthofadventitiousbudsafterculturef15d.Themediumof12MSB5isthebestmediumfrootinduction.Theaveragerootfrequencywas97%.Thesurvivalratewas95%whentransfe
6、rredtosoil.Theregeneratedplantletswithhealthyrootsgrewsuccessfullymatured.ThesesimplereproduciblehighfrequencyregenerationsystemsprovideabasisfgeictransfmationofcommonbeanwithAgrobacteriumtumefaciens.2、OptimizationofGeic
7、TransfmationSystemofEmbryonictipsinvegetabletypebeanToimproveAgrobacteriumtumefaciensmediatedtransfmationofembryonictipsofvegetabletypesoybeantheeffectofseveralfactsontransfmationefficiencywereexaminedbymeasuringtransien
8、texpressionlevelsofβglucuronidasethenumberofresistantexplants.Theresultshowthatcocultivationwith200umolL1ASisadvantagetoimprovetransfmationfrequencyCombination300mgL1Ticwith100mgL1Cefisgoodfbacteriostasismediumwithantiox
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