溶菌酶

1、溶菌酶溶菌酶（lysozyme）又稱(chēng)胞壁質(zhì)酶（muraase）或N乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶（Nacetylmuraeglycanohydrlase），是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N乙酰胞壁酸和N乙酰氨基葡糖之間的β14糖苷鍵，使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽，使病毒失活。因此，該酶具有抗菌、消

2、炎、抗病毒等作用。1簡(jiǎn)介中文名稱(chēng)：溶菌酶中文同義詞：脆壁質(zhì)酶；雞蛋白；胞壁質(zhì)酶(N乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶)溶菌酶(雞蛋清)英文名稱(chēng)：Lysozyme簡(jiǎn)稱(chēng)LZM英文同義詞：REDUCEDLYSOZYMEWATERSOLUBLEMUCOPEPTIDEGLYCOHYDROLASEMUCOPEPTIDEGLYCOLHYDROLASEMUCOPEPTIDENACETYLMURAMOYLHYDROLASEMUCOPEPTIDENACETYLMURAM

3、OYLHYDROLASEGRADEIIIMUCOPEPTIDENACETYLMURAMOYLHYDROLASEGRADEVI:CHLIDEMURAASEMURAASEGRADEIII[1]CAS號(hào)：12650883EINECS號(hào)：2357473[2]分子式：無(wú)分子量：14000左右EINECS號(hào)：2357473相關(guān)類(lèi)別：發(fā)酵劑；Enzymes酶；生化試劑；生物化學(xué)品。分子結(jié)構(gòu)圖：3生產(chǎn)以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)

4、脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。4制備溶菌酶是采用生物工程技術(shù)進(jìn)行克隆、提取而制取它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無(wú)抗藥性。該酶廣泛存在于人體多種組織中，鳥(niǎo)類(lèi)和家禽的蛋清、哺乳動(dòng)物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對(duì)二硫鍵維持酶構(gòu)型，是一種堿性蛋白質(zhì)，其N(xiāo)端為賴(lài)氨酸，C端為亮氨

5、酸?？煞纸馊鼙谖⑶蚓?、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽(yáng)性菌。溶菌酶在等電點(diǎn)以下較廣泛的pH值范圍內(nèi)，分子帶正電荷，可吸附于弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上，洗脫后鹽析，可得溶菌酶沉淀，再進(jìn)行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹(shù)脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg724樹(shù)脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過(guò)夜。傾出上層蛋清，樹(shù)脂離心甩干，用

6、蒸餾水反復(fù)洗去黏附的卵蛋白，然后將樹(shù)脂裝入柱內(nèi)，用015molL、pH=65磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹(shù)脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉淀生成，冷處放置過(guò)夜。虹吸上層清液，沉淀吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀，然后裝入透析袋，在約5℃的條件下，對(duì)蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢