腹主動脈瘤自身免疫損傷中cd439;cd2539;調(diào)節(jié)性t淋巴細胞功能缺陷的研究

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文腹主動脈瘤自身免疫損傷中CD4CD25調(diào)節(jié)性T淋巴細胞功能缺陷的研究姓名：尹鳴鏑申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：張健20090401少和／或功能的障礙都會引起自身免疫疾病，同時，F(xiàn) o x p 3 突變、缺失及表達下降也可以引起自身免疫性疾病。因此，本研究的目的是通過分析A A A 患者和健康人群外周血中T r e g 細胞數(shù)量、F O X P 3m R N A 和蛋白表達及C D 4 + C D 2 5

2、 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞的抑制功能來證實導致A A A 自身免疫損傷源于機體免疫系統(tǒng)上游的調(diào)節(jié)障礙，從而揭示A A A 發(fā)生發(fā)展的分子生物學基礎。實驗方法1 、采用流式細胞儀對A A A 患者外周血中C D 3 + 、C D 4 + 、C D 8 + 、C D 4 + C D 2 5 +調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞的數(shù)量進行分析及與正常人群的對照研究。2 、采用流式細胞儀對A A A 患者外周血中C D 4 + C D 2 5 + F O X P

3、 3 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞的數(shù)量進行分析及與正常人群的對照研究。采用W e s t e r n 蛋白質(zhì)印跡及R e a l t i m eP C R 技術進行F O X P 3蛋白、F O X P 3 m R N A 在A A A 患者外周血單個核細胞表達的分析。3 、通過對A A A患者外周血中C D 4 + C D 2 5 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞抑制C D 4 + C D 2 5 ‘T 淋巴細胞功能與正常人群外周血中C D 4 +

4、 C D 2 5 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞抑制C D 4 + C D 2 5 - T 淋巴細胞功能對比的分析，探討C D 4 + C D 2 5 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞在A A A 患者外周血中的功能障礙，同時探討它們的抑制功能與F O X P 3 表達相關性。實驗結(jié)果本試驗應用流式細胞儀( F A C S c a l i b u r , F A C S A r i a , B DB i o s c i e n c e s ) 分析2 2

5、 名A A A 患者和3 2 名健康對照者外周血C D 4 + C D 2 5 + 調(diào)節(jié)性T 淋巴細胞數(shù)量，進行比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，A A A 患者的C D 4 + C D 2 5 + T r e g 細胞占C D 4 + T 細胞的百分比( 均值4 - 標準差5 ．6 94 - O ．9 9 ％) 較健康對照組( 均值士標準差5 ．8 8 土1 ．5 5 ％；P > 0 ．0 1 ) 減少，但差異無統(tǒng)計學意義。采用流式細胞儀對人外周

6、I f l I ．C D 4 + C D 2 5 + T r e g 細胞進行分離純化，并對C D 4 + C D 2 5 + T 細胞純度進行鑒定， 純度大于9 5 ％。而A A A 患者的C D 4 + C D 2 5 + F O X P 3 + T r e g 細胞占C D 4 + T 細胞( 均值4 - 標準差2 ．4 54 - 0 ．5 7 ％) 比值明顯低于健康對照組( 均值士標準差3 ．6 9 a ：O ．8 2 ％；P