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1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文Gfi1.2基因在斑馬魚內(nèi)耳的表達(dá)及順鉑的耳毒性研究姓名:岳文杰申請學(xué)位級別:博士專業(yè):臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:陳曉巍20090601A b s t r a c tO b j e c t i v e :O ) T o e s t a b l i s ha z e b r a i l s h m o d e lf o rt h e r e s e a r c h o f i n n e r e a r h a i rc
2、 e l ld a m a g e a n dd e t e c t t h e e x p r e s s i o n o fG i l 1 .2 i n e a c h s t a g eo fz e b r a f i s hi n n e r 掰d e v e l o p m e n t .( 2 ) T of i n dt h em e c h a n i s mo f t h ei n j u r yt oh a i rc
3、e l l sc a u s e db yo t o t o x i cd r u g s .M a t e r i a l sa n dM e t h o d s :( 1 ) C h o o s et h ez e b r a i s he m b r y o e so f4 .3 h p f .t 2 h p f .2 4 h p f , 4 8 h p f , u s e i n gt h e i n s i t u h y b
4、 r i d i z a t i o nt o e v a l u a t e t h ee x p r e e i o no fG i l l .2 .( 2 ) I n c u b a t et h ec m b r y o e so f4 8 h p f w i m c i s p l a t i no f0 .2 5 m M 、0 .5 0 m M 、0 .7 5 m M 、1 .0 0 m M 、1 .5 0 m Mf o r
5、8 h o u r s ,u s e i n g t h e I ns i t uh y b r i d i z a t i o n t oe v a l u a t et h ee x p r e e i o no f G i l 1 .2 o f t h ed i f f e r e n tc r n b r y o e s .( 3 ) I n c u b a t et h ee m b r y c e so f 4 8 h p
6、f w i t hc i s p l a t i no f 1 .0 0 r a M f o r4 h 、8 h 、1 2 h , u s e i n g t h e I ns i t uh y b r i d i z a t i o n t oe v a l u a t e t h ee x p r e e i o n o fG i l l .2o f t h e d i f f e r e n te m b r y o e s .R
7、 e s u l t s :( 1 ) T h ee x p r e s s i o no f G i l l .2 w a s d e t e c t e d a t e a c hs t a g eo f t h ec m b r y o e s .S t r o n ge x p r e s s i o nw a s d e t e c t e di nt h ei n n e re a r o f t h e4 8 h p f
8、c m b 巧o e s .( 2 ) l h el a r g e rd o s et h e c m b r y o e s w e r et r e a t e dw i t hc i s p l a t i n , t h ew e a k e r t h ee x p r e s s i o no f G i l l .2w a s .( 3 ) t h el o n g e rt i m e t h ec r n b r y
9、 o e s w e r et r e a t e d 、析t hc i s p l a t i n , t h ew e a k e r t h ee x p r e s s i o n o fG 6 1 .2 W a S .c o n c l u s i o n s :( 1 ) Z e b r a i l s h an e wm o d e l f o r t h e r e s o R r c h o f t h e e m b
10、 r y o n i cd e v e l o p m e n to ft h ev e r t e b r a t e s b e c a u s eo fi t s s h o r td e v e l o p m e n t a lc y c l e , R e l a t i v e l yi n e x p e n s i v ep n c e ) t r a n s p a r e n te m b r y o sa n d
11、S Oo n .I tb e c o m e so n e o ft h eb e s tm o d e la n i m a l s f o rr e s e a r c h i n gt h e d e v e l o p m e n t o f i n n e re a r a n d d e a f n e s sg e n e s .I t i ss h o w n i nt h i se x p e r i m e n t
12、t h a ti ti Sf e a s i b l et ou s e z e b r a i s ha sa a n i m a l m o d e l t oa c c e s s t h ed a m a g eo f t h eh a i rc e l l si n d u c e db yd r u g s ..( 2 ) G i l li s a t r a n s c r i p t i o n a lr e p r e
13、 s s o r .I th a s b c e 鋤s h o w n t h a ti tp l a y sa l li m p o r t a n tr o l ei nt h ed e v e l o p m e n to f i n n e re a r h a i rc e l l s i nm i c ew i mc o n t i n u e de x p r e s s i o n .T h i s e x p e r
14、i m e n ts h o w e dt h a tG i l l .2 ( h o m o l o g o u sg e n eo fG i l ) a l s oe x p r e s s e d i t s e l fi nt h e i n n e re a r o f z e b r a f i s ha n dc o u l d b e u s e da sa m a r k e r o fi n n e rc e l l
15、d a m a g e .( 3 ) T h e h a i rc e l ld a m a g e c a u s e d b y c i s p l a t i ni sd o s e —d e p e n d e n ta n dt i m e - d e p e n d e n t .K e y w o r d s : Z e b r a f i s h ,G f i l .2 ,i n n e re a r h a i r c
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