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文檔簡介
1、骨湯中富含著微納米尺度的親水膠粒(Micro-/Nano-Particles,MNPs),因其營養(yǎng)與美味廣受大眾歡迎。而骨湯的營養(yǎng)學(xué)研究并不能等同于其功能性研究。為了探究骨湯中微納米膠粒的構(gòu)造對(duì)其生物活性的影響,本試驗(yàn)選擇了八種不同種類的乳化劑加入與不加入骨湯后進(jìn)行高速剪切乳化,制得豬骨湯乳液;運(yùn)用超濾分離與尺寸排阻色譜分離豬骨湯微納米膠粒,制得超濾微納米膠粒(UltrafiltrationMicro-/Nano-Particles,U
2、F-MNPs)與尺寸排阻色譜納米膠粒(SizeExclusion Chromatography Nano-Particles,SEC-NPs)。所得樣品均采用電子顯微鏡觀察其膠粒形態(tài),運(yùn)用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)表征其中膠粒特性。通過氧自由基吸收能力測定(ORAC法)、DPPH自由基清除率測定(DPPH法)以及鐵離子還原能力測定(FRAP法)三種經(jīng)典抗氧化方法測定樣品抗氧化值,對(duì)比骨湯乳液、骨湯微納米膠粒與原湯的抗氧化能力差異。觀察小鼠腹腔黏膜巨
3、噬細(xì)胞與UF-MNPs、SEC-NPs直接相互作用的情況,并測定隨后細(xì)胞膜電位變化以及膠粒對(duì)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷時(shí)的保護(hù)能力鑒定骨湯微納米膠粒的細(xì)胞生物活性。主要研究結(jié)果如下所示:
(1)豬骨湯經(jīng)超濾分離的UF-MNPs以及尺寸排阻色譜分離的SEC-NPs的平均粒徑分別為248±10nm與112±2.4 nm,它們表現(xiàn)為比原湯更好的溫度響應(yīng)且在堿性環(huán)境下更為穩(wěn)定,在分離過程中,存在著部分脂肪酸與氨基酸的損失。
(2)乳化
4、作用不僅改變了骨湯膠粒特性,如平均粒徑增大、膠粒數(shù)增加、表面電荷量增加,而且還改變了骨湯的流變特性,乳化后的骨湯順滑度提高,穩(wěn)定性增加,其中吐溫80、卵磷酯和酪蛋白乳化處理的骨湯穩(wěn)定性高于其他樣品。綜合考慮了8種添加劑的性質(zhì),最終選擇了β-環(huán)糊精、酪蛋白、卵磷酯、明膠、吐溫80這5種表面活性劑與骨湯復(fù)配乳化進(jìn)行進(jìn)一步的生物活性研究。
(3)乳化可以提升骨湯的抗氧化力,且在ORAC法與DPPH法中,高濃度乳化劑添加的骨湯乳液抗氧
5、化活性更高,而在FRAP法中則相反。三種抗氧化方法測定結(jié)果的差異主要由于抗氧化機(jī)制的不同以及在不同反應(yīng)條件下,骨湯膠粒的構(gòu)造不同。此外,UF-MNPs與SEC-NPs的抗氧化力比原湯低,其主要原因可能是膠粒構(gòu)造的改變以及一些抗氧化因子的流失。
(4)通過觀察可知當(dāng)UF-MNPs和SEC-NPs分別與腹腔巨噬細(xì)胞以1000/1的比例共同孵育時(shí),巨噬細(xì)胞能夠吞噬骨湯微納米膠粒,且對(duì)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞膜電位及線粒體氧呼吸作用不產(chǎn)生影響,
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