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1、輔酶Ⅱ依賴(lài)性視黃醇脫氫/還原酶(NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase, NRDR)由位于染色體14q11.2的基因 DHRS4編碼,是短鏈脫氫還原酶(Short-chain dehydrogenase/reductase,SDR)家族的一員,參與細(xì)胞內(nèi)許多物質(zhì)的氧化還原反應(yīng)。NRDR具有很高的視黃醇氧化、視黃醛還原活性,能夠催化視黃醇和視黃醛轉(zhuǎn)換,參與維甲酸代謝,由于其活性依
2、賴(lài)于NADP(H)的存在,因此命名為NADP(H)依賴(lài)性視黃醇脫氫/還原酶。NRDR在哺乳動(dòng)物組織中分布廣泛,肝臟中表達(dá)水平比較高。
人NRDR能夠還原α-雙羰基化合物、芳香酮、對(duì)位苯醌及醛。而人NRDR對(duì)某些具有重要的生理功能物質(zhì)(如5α/β-3-酮雄甾烷、5β-3-酮孕甾烷、脫氧膽石酸、睪酮、5α-孕甾烷-3,20-二酮等)的還原活性提示,NRDR可能參與人類(lèi)重要的生理生化過(guò)程,其表達(dá)異??赡芘c某些疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)
3、。
NRDR是羰基還原酶(CR)家族的一員,CR催化NAD(P)H介導(dǎo)的羰基化合物還原為其相應(yīng)的二級(jí)醇。哺乳動(dòng)物組織中,CR以多種形式分布于細(xì)胞的線粒體、微粒體和/或細(xì)胞漿中。許多哺乳動(dòng)物的羰基還原酶屬于SDR家族。
人NRDR的mRNA5’端有兩個(gè)翻譯起始位點(diǎn)(translational initiation site,TIS),并且這兩個(gè)TIS位于同一個(gè)開(kāi)放閱讀框(Open Reading Frame,ORF)內(nèi)
4、,因此從理論上講,可以產(chǎn)生兩種翻譯產(chǎn)物:從第一個(gè)TIS開(kāi)始翻譯得到含有278個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),命名為NRDR278,其氨基(N)端含有27個(gè)氨基酸組成的線粒體定位信號(hào)(mitochondrial targeting signal,MTS),羧基(C)端含有由Ser-Arg-Lys三肽序列組成的1型過(guò)氧化物酶體定位信號(hào)(Peroxisome targeting signal type1,PTS1),理論分子量為29.5kDa;從第二個(gè)TI
5、S開(kāi)始翻譯則得到較小分子量的蛋白質(zhì)NRDR260,由于N端截短,導(dǎo)致其N(xiāo)端的MTS丟失,但由于閱讀框架并未漂移,因此保留了C端PST1,NRDR260的理論分子量為27.3kDa。我們的前期研究發(fā)現(xiàn),在正常人的肝臟組織,可以檢測(cè)到兩個(gè)條帶,而人肝細(xì)胞HL-7702中有三條帶,我們推測(cè)可能分別為NRDR278,NRDR260和NRDRB1,認(rèn)為NRDR260和NRDR278都有表達(dá),其中NRDR260表達(dá)比較高,組織中多為NRDR260。
6、我們認(rèn)為,兩個(gè)翻譯起始位點(diǎn)都可以起始翻譯,產(chǎn)生兩種不同分子量的NRDR。其亞細(xì)胞定位的分布機(jī)制可能因N端序列不同而不同。
由于NRDR的羧基末端存在PTS1過(guò)氧化物酶體定位信號(hào),生物化學(xué)技術(shù)和組織化學(xué)技術(shù)分析結(jié)果及蛋白信息庫(kù)注釋其為過(guò)氧化物酶體蛋白。我們通過(guò)線粒體、過(guò)氧化物酶體細(xì)胞器分離純化,并檢測(cè)其中NRDR的表達(dá),結(jié)合免疫熒光,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 NRDR雙定位于線粒體和過(guò)氧化物酶體。雙定位蛋白在不同的亞細(xì)胞組分中可能有相似或完
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