羊骨膠原蛋白酶解產(chǎn)物對去卵巢青春期大鼠垂體激素釋放的影響

1、1第三章 第三章 羊骨膠原肽和類固醇激素對去卵巢青 羊骨膠原肽和類固醇激素對去卵巢青春期大鼠垂體激素釋放的影響 春期大鼠垂體激素釋放的影響摘 要【目的】 【目的】本研究旨在研究羊骨酶解物（羊骨膠原肽）對去卵巢青春期大鼠類固醇誘導(dǎo)的催乳素和促黃體生成素分泌浪潮的調(diào)節(jié)作用?！痉椒ā?【方法】以6周齡陰道未開口的青春期雌性SD大鼠為實驗動物，實施雙側(cè)卵巢摘除手術(shù)，術(shù)后康復(fù)1周（第一組,Grp1）或3周（第三組,Grp3）后，進(jìn)行類固醇替代注

2、射處理（E+P）,第二組(Grp2)和第四組（Grp4）大鼠在康復(fù)1周或3周后類固醇替代的同時以灌胃的方式給予羊骨酶解物（E+P+ S），第五組大鼠（Grp5）卵巢切除之日便開始灌胃給予羊骨酶解物，在術(shù)后康復(fù)3周后進(jìn)行類固醇替代處理。類固醇替代方法為實驗第一天皮下注射17ß-雌二醇（50µg/kg，sc），第三天注射孕酮 (2.5 mg/kg, sc)。羊骨酶解物的灌胃劑量為1000mg/kg·d。所有大鼠

3、均在E+P處理組雌二醇注射后即服用羊骨酶解物后的第1、8、12、16、20、28、36天采集血樣，血樣通過在類固醇替代即實驗第二天手術(shù)植入的頸導(dǎo)管采集。通過放射免疫技術(shù)測定血樣中的促黃體素和催乳素濃度。 【結(jié)果】 果】試驗結(jié)果表明，除第二組大鼠（E+P+S，術(shù)后康復(fù)1周）的PRL浪潮外，羊骨酶解物對類固醇替代誘導(dǎo)產(chǎn)生的其他LH和PRL浪潮都產(chǎn)生影響，對LH浪潮起到增強(qiáng)（術(shù)后康復(fù)1周）或抑制（術(shù)后康復(fù)3周）作用；對PRL浪潮（第4組，術(shù)后

4、康復(fù)3周）則表現(xiàn)為抑制作用；但羊骨酶解物對第五組（Grp5）大鼠LH(第二組)和PRL（第四組)分泌的抑制作用弱于E+P+S處理組和?！窘Y(jié)論 結(jié)論】在摘除卵巢用類固醇替代處理的青春期大鼠中，羊骨酶解物對垂體激素LH和PRL的分泌產(chǎn)生影響；這種影響作用依賴于類固醇激素并受到性腺類固醇激素缺乏時間長短（卵巢摘除后康復(fù)時間）的調(diào)節(jié)；羊骨酶解物對LH和PRL分泌的調(diào)節(jié)可能通過不同的機(jī)理，作用于下丘腦則促進(jìn)或抑制LH的分泌，作用于垂體則抑制PRL

5、的分泌；可能是羊骨酶解物中高含量的精氨酸以及興奮性氨基酸（谷氨酸和天門冬氨酸）賦予了羊骨酶解物上述對垂體激素的調(diào)節(jié)功能；羊骨酶解物中可能含有雌激素樣的功能性生物活性肽；對上述推測需要進(jìn)一步實驗論證。關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞：羊骨膠原肽；促黃體素；催乳素；類固醇替代 ；去卵巢大鼠3modulation mechanisms of sheep bone collagen peptides for the secretion of LH and PRL

6、; The action on the hypothalamus promote or suppress the secretion of LH, and the action of the pituitary inhibit the secretion of PRL; The above regulatory roles might be conferred by the high amount of arginine and exc

7、itatory amino acids such as glutamate and aspartate contained in the sheep bone enzymatic lysates; and it is tempting to speculate that there might be estrogen-like functionally bioactive peptides in the mixture of sheep

8、 bone collagen peptides.Key words: sheep bone collagen peptides; luteinizing hormone; prolactin; steroid replacement; ovariectomized rats綜述部分 綜述部分1. 1. NO NO 對垂體激素分泌的影響 對垂體激素分泌的影響自從發(fā)現(xiàn) NO 是一種內(nèi)源性細(xì)胞信號分子以來，關(guān)于其產(chǎn)生及作用機(jī)理的研究迅速大量開

9、展。 NO 是一種內(nèi)源性的氣態(tài)神經(jīng)傳遞物質(zhì)（neurotransmitter），由 L-精氨酸在一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase NOS）的作用下形成(Bredt 1999)[1]，是 NO 合成酶氧化 L-精氨酸形成 L-citrulline 中的產(chǎn)物。有兩種類型的 NOS，一種是固有酶，即 Ca2+-鈣調(diào)蛋白-依賴性酶；另一種是誘導(dǎo)酶，非 Ca2+依賴性酶[2,3]。 固有性 NOS 位于下丘腦區(qū)域，

10、參與 LHRH 的釋放[3,4]，因此 NO 極有可能參與排卵前以及類固醇誘導(dǎo)的 LHRH 浪潮。不同的實驗結(jié)果都表明用 NMDA刺激 EAA 受體可促使 NO 釋放[5,6]，NO 或者使突觸后泡釋放神經(jīng)遞質(zhì)/神經(jīng)調(diào)節(jié)物，或者充當(dāng)一個倒退信使（a retrograde messenger）激發(fā)突觸前端進(jìn)一步釋放興奮性氨基酸。不同的刺激物可對 NO 合成酶的活性獨(dú)立調(diào)節(jié)。NO 一旦生成，便可與不同的金屬、硫醇（thiols） 、和氧結(jié)合