骨膠原蛋白酶解工藝及骨營養(yǎng)粉對(duì)大鼠補(bǔ)鈣功效的研究.pdf

1、為使畜產(chǎn)品生產(chǎn)中所產(chǎn)生的畜骨原料得到充分的利用，本研究以甘南牦牛骨為原料，經(jīng)高溫高壓蒸煮后磨漿，再利用木瓜蛋白酶對(duì)骨漿中骨膠原蛋白進(jìn)行酶法水解，以水解液中多肽含量和蛋白水解率為指標(biāo)，采用單因素和正交試驗(yàn)，確定了水解骨膠原蛋白的最佳工藝參數(shù)。將水解膠原蛋白后的骨漿，經(jīng)噴霧干燥后所得的骨粉配以酪蛋白磷酸肽和菊粉制成骨營養(yǎng)粉后，做大鼠的飼喂試驗(yàn)，以骨粉75%，酪蛋白磷酸肽5%，菊粉20%為試驗(yàn)一組；以骨粉75%，酪蛋白磷酸肽10%，菊粉15%

2、為試驗(yàn)二組；以同等鈣水平的碳酸鈣組為對(duì)照組。飼喂試驗(yàn)結(jié)束后采用原子吸收分光光度計(jì)對(duì)大鼠的骨鈣含量進(jìn)行分析；采用雙能X線骨密度儀測(cè)定大鼠骨密度增加情況；采用全自動(dòng)生化分析儀和電解質(zhì)分析儀測(cè)定大鼠血清生化指標(biāo)（堿性磷酸酶、甘油三酯、膽固醇以及K+、Na+、Cl-、Ca2+）。研究結(jié)果如下： 1、選擇木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶，對(duì)骨漿進(jìn)行酶解。結(jié)果表明三種酶水解液中肽含量分別為5.358、5.108、4.783mg/mL，水

3、解率分別為66.98%、63.85%、59.79%。由此可見木瓜蛋白酶水解能力優(yōu)于其他兩種酶，所以本試驗(yàn)中木瓜蛋白酶為優(yōu)選酶。 2、通過單因素試驗(yàn)確定了酶用量的范圍為2500～3500U/g蛋白質(zhì)，酶解時(shí)間為6～10h，反應(yīng)溫度為50～60℃，pH為5～7。 3、通過單因素試驗(yàn)和Lg（34）正交試驗(yàn)，篩選出木瓜蛋白酶水解牦牛骨膠原蛋白的最佳工藝參數(shù)：酶解溫度55℃、pH值為5、酶用量3500U/g、酶解時(shí)間6h。利用雙縮

4、脲法測(cè)定最優(yōu)條件下水解液中的肽含量為5.845mg/mL，蛋白質(zhì)水解率為73.06%。 4、飼喂試驗(yàn)表明，兩組大鼠生長發(fā)育正常。試驗(yàn)一組、二組大鼠平均日攝食量分別為13.57g/只、14.21g/只；三組大鼠體重增重分別為150.60g/只、142.83g/只、115.46g/只；試驗(yàn)組大鼠股骨重量、日攝食量及體重增加均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。 5、試驗(yàn)一組、二組大鼠骨密度分別比對(duì)照組高23.48%、20.00

5、%，差異極顯著（P<0.01）。大鼠股骨鈣含量分別比對(duì)照組高8.56%、5.79%，差異顯著（P<0.05），試驗(yàn)組的補(bǔ)鈣功效較明顯。 6、試驗(yàn)一組、二組血清中AKP和TG含量與對(duì)照組比較均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；CHO含量分別為2.090mmol/L、1.855mmol/L，試驗(yàn)二組顯著低于對(duì)照組（P<0.05），較對(duì)照組降低了9.82%。 7、試驗(yàn)一組、二組血清中鉀、鈉在各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），