從生姜中篩選血清芳香酯酶激動劑組分.pdf

1、對氧磷酶（PON）是一種人體內重要的水解酶，其活性與心腦血管疾病、動脈粥樣硬化、癌癥、Ⅱ型糖尿病等多種疾病相關。生姜具有抗氧化、抗動脈粥樣硬化、降低膽固醇、增強免疫功能、止吐等多種藥理作用，常用于治療心血管疾病，增加冠脈血流量的作用。因而從生姜中篩選出PON1激動劑組分對于上述一些疾病預防及治療有著非常重要的研究和實際意義。
　　采用以9-（4-甲基苯氧羰基）-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸鹽作為底物的化學發(fā)光法評價中，在粗提液濃度為

2、5.00×10-6 g/L時血清空白組及生姜粗提液實驗組的反應動力學速率常數K分別為0.0064 min-1、0.0119 min-1，激動倍數為1.86。采用以乙酰苯酚為底物的紫外分光光度法評價時發(fā)現生姜粗提液激動活性在濃度為4.00×10-5 g/L時達到最大。生姜粗提液能激動血清PON1催化吖啶酯水解兩種評價方法的結論一致。
　　從生姜粗提液中依次萃取得到石油醚萃取液（PEE）、乙酸乙酯萃取液（EAE）、正丁醇萃取液（n-B

3、E），化學發(fā)光法評價時發(fā)現三種萃取液濃度為8.00×10-5 g/L時都對血清PON1有激動作用，其速率常數分別為0.0099 min-1、0.0081 min-1、0.0068 min-1，激動作用的大小為：PEE＞EAE＞n-BE。采用紫外分光光度法評價時發(fā)現三種萃取液都對血清PON1有激動作用，且激動作用隨著濃度的增大先增大后降低。在萃取液濃度為8.00×10-5 g/L時，激動作用的大小為：PEE＞EAE＞n-BE，該結果與化學

4、發(fā)光法測定相符合。
　　采用柱層析和薄層層析從乙酸乙酯萃取液中首次分離得到2個混合物（樣品1＃、樣品2＃）和純組分C（6-姜烯酚）、D、E（對香豆酸）、F（6-姜酚）。采用化學發(fā)光法評價時發(fā)現樣品1＃對血清PON1呈抑制作用，抑制作用隨著濃度的增大而增強。樣品2＃對血清PON1有激動作用，激動作用隨著濃度的增加先增加后減弱，在濃度為1.00×10-4 g/L時，激動作用最大，K=0.01519 min-1，激動倍數為2.44。因此

5、對樣品2＃進一步分離得到組分A和B（3-羥基-7-甲氧基黃酮）。由于組分A、D的量少，對其無法進行結構鑒定。
　　組分A、B、C對血清PON1有激動，激動作用都隨著濃度的增大先增大后減弱，在各組分濃度為1.00×10-4 g/L、2.00×10-6 g/L、1.00×10-5 g/L時激動作用達到最大，K值分別為0.0131min-1、0.0104min-1、0.0205min-1，激動倍數分別為2.05、1.63、3.20，激動

6、作用的大小為：組分C＞組分A＞組分B。組分D、E、F對血清PON1呈抑制作用，抑制作用隨著濃度的增大而增強。
　　采用紫外分光光度法時發(fā)現組分A、B、C對血清PON1呈激動作用，三種組分的激動作用都隨著濃度增大先增大后降低。在最佳的實驗濃度下，激動活性的大小為：組分A（0.80×10-5 g/L，70.60 U/L）＞組分C（6.00×10-5 g/L，64.79 U/L）≈組分B（6.00×10-5 g/L，64.59 U/L）

7、。
　　組分E、F對PON1呈抑制作用，在濃度小于4.00×10-4 g/L時，組分E的抑制作用大于組分F；在濃度大于4.00×10-4 g/L時，組分F對血清的抑制作用大于組分E。采用雙倒數圖判斷組分E、F的抑制類型，發(fā)現組分E和F為競爭性抑制，平均抑制常數分別為8.98 mmol/L、9.13 mmol/L，抑制作用強度為：組分F＞組分E。
　　采用化學發(fā)光法評價從石油醚萃取液中得到的組分M及組分N，發(fā)現組分M對血清PO