貽貝粘附蛋白改性的樹脂-牙本質(zhì)粘接界面的抗蛋白水解性及粘接耐久性的研究.pdf

1、目的：當(dāng)代牙本質(zhì)粘接體系中，無論是酸蝕-沖洗類粘接劑抑或是自酸蝕粘接劑，所形成的混合層底部始終存在一層裸露的膠原纖維。裸露的膠原纖維在牙體內(nèi)源性的膠原酶的攻擊下發(fā)生降解，繼而引發(fā)樹脂-牙本質(zhì)的粘接強(qiáng)度及粘接持久性下降。本實(shí)驗(yàn)的目的在于探究貽貝粘附蛋白對膠原酶活性，牙本質(zhì)膠原降解以及牙本質(zhì)粘接微拉伸強(qiáng)度的影響，以期提高牙本質(zhì)粘接的耐久性。
　　方法：評價(jià)貽貝粘附蛋白對膠原酶活性的影響：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用Sensolyte? MMP通用型分光

2、光度試劑盒檢測膠原酶活性抑制程度。1mg/ml貽貝粘附蛋白與100U/ml VII型膠原酶（基質(zhì)金屬蛋白酶的代表類型之一）為實(shí)驗(yàn)組；GM6001（一種已知的人工合成的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑）與100U/ml VII型膠原酶為陽性對照組；蒸餾水與100U/ml VII型膠原酶為陰性對照組。每組分5個(gè)亞組（n=5）,充分反應(yīng)后加入檢測基底液，于412nm波長下進(jìn)行分光光度檢測，比較酶活性的抑制程度。
　　評價(jià)貽貝粘附蛋白對牙本質(zhì)膠原酶解

3、的抑制性：將30片人牙本質(zhì)片隨機(jī)分成三組（n=10）：貽貝粘附蛋白組，GM6001組，蒸餾水組。各組牙本質(zhì)片脫礦后分別于膠原酶溶液中溫育7天，取上清液檢測羥脯氨酸含量，評估膠原降解程度。
　　評價(jià)貽貝粘附蛋白對樹脂-牙本質(zhì)粘接強(qiáng)度的影響：取60個(gè)新鮮離體牙，暴露冠部牙本質(zhì)后，采用酸蝕-沖洗類粘接劑進(jìn)行樹脂-牙本質(zhì)粘接。根據(jù)酸蝕沖洗后預(yù)處理方式不同，隨機(jī)分成三組：貽貝粘附蛋白組，GM6001組，蒸餾水組。將粘接完成的試件制備成樹脂-

4、牙本質(zhì)粘接條，然后根據(jù)是否進(jìn)行冷熱循環(huán)(5°C和55°C，2500個(gè)循環(huán))及酶解反應(yīng)（3周，37°C）再將各組分成2個(gè)亞組，分別進(jìn)行樹脂-牙本質(zhì)粘接的即刻微拉伸檢測和老化處理后的微拉伸檢測。掃描電鏡觀察牙本質(zhì)段的拉伸斷面。另取兩個(gè)完整的未拉斷的樹脂-牙本質(zhì)粘接試件進(jìn)行粘接界面的掃描電鏡檢測。
　　結(jié)果：貽貝粘附蛋白組，GM6001組，蒸餾水組的膠原酶活性(nmol/min/mg)分別為20.22±0.93，29.11±1.17和3

5、1.39±0.52，三組間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.01）。各組牙本質(zhì)膠原降解量（羥脯氨酸釋放量μg/mL）分別為2.70±0.53，4.00±1.19和5.40±1.00，三組間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.01）。三組即刻微拉伸強(qiáng)度結(jié)果無顯著差異，但冷熱循環(huán)及酶解實(shí)驗(yàn)后，三組微拉伸結(jié)果(MPa)呈現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，分別為11.39±2.52,10.77±3.16和5.83±2.02(p<0.001)。掃描電鏡檢測結(jié)果與上述結(jié)果指標(biāo)相一致。即

6、刻粘接界面掃描結(jié)果顯示：貽貝粘附蛋白組的混合層中罕見裸露的膠原纖維，而GM6001組以及蒸餾水組可見少量膠原纖維。酶解反應(yīng)后的粘接界面掃描結(jié)果顯示：貽貝粘附蛋白組以及 GM6001組暴露的膠原纖維較蒸餾水組少，且蒸餾水組中的樹脂突牙本質(zhì)小管中存在較大的間隙。各組微拉伸后的斷面掃描電鏡檢測結(jié)果顯示：貽貝粘附蛋白組與GM6001組的拉伸斷面大多位于混合層頂端，牙本質(zhì)小管被樹脂突阻塞，而蒸餾水組的斷面多位于混合層基底部，大量牙本質(zhì)小管呈現(xiàn)空虛