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文檔簡介
1、急性肺損傷(ALI)的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,現(xiàn)在沒有特效的治療方案,間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)作為具有自我更新潛能和多向分化潛能等多功能的前體細(xì)胞,給ALI的治療帶來一條新思路。間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞特性和功能具有一定的可塑性,即隨所處微環(huán)境的不同而改變,致使其生物學(xué)功能在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中表現(xiàn)出復(fù)雜性和多樣性的特點(diǎn)。間充質(zhì)干細(xì)胞在急性肺損傷炎性環(huán)境下發(fā)揮什么樣的細(xì)胞特性和功能仍有待研究。
目的:
研究在炎性環(huán)境下的MSCs
2、發(fā)生自噬對急性肺損傷治療的影響。
方法:
(1)從寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院獲取健康胎盤,根據(jù)已建立的人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)的方法,培養(yǎng)鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞。
(2)應(yīng)用IL-1β、IL-6、IFN-γ和 TNF-α炎癥因子處理人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞,western blot檢測自噬標(biāo)記蛋白LC3I/II、Atg5和Atg7表達(dá)情況;同時(shí)觀察同等處理?xiàng)l件下間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖情況以及自噬抑制劑3-MA處理后的增殖
3、情況。
?。?)應(yīng)用western blot檢測凋亡標(biāo)志因子Caspase3、PARP1。
(4)利用博來霉素(BLM)制備小鼠急性肺損傷模型,尾靜脈注射感染si-NC和si-Atg7慢病毒的人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察發(fā)生自噬和不發(fā)生自噬的間充質(zhì)干細(xì)胞在小鼠急性肺損傷模型中的存活率;觀察間充質(zhì)干細(xì)胞干預(yù)后急性肺損傷小鼠的肺組織病理改變。
結(jié)果:
?。?)我們成功分離、培養(yǎng)了人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞。<
4、br> ?。?)炎癥因子IL-1β、IL-6、IFN-γ和 TNF-α可誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)生自噬;其中,IFN-γ和 TNF-α誘導(dǎo)的自噬抑制間充質(zhì)干細(xì)胞增殖;抑制IFN-γ和TNF-α誘導(dǎo)的自噬能夠恢復(fù)間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖。
?。?)IFN-γ、TNF-α誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)生自噬可導(dǎo)致其凋亡。
?。?)在博來霉素(BLM)誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷模型中,si-Atg7組較si-NC組,間充質(zhì)干細(xì)胞存活率更高,肺組織病理改善明
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