2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、食醋發(fā)酵中,醋酸菌不可避免地受到乙醇、乙酸以及高溫等環(huán)境因素的脅迫,會嚴重影響其發(fā)酵速率,發(fā)酵效率及其產量,同時也會增加生產成本。乙醇作為醋酸菌的發(fā)酵底物,不僅影響發(fā)酵效率、食醋產量,對醋酸菌自身的生長也會造成影響。本文嘗試利用分子生物學的方法,對常用的食醋釀造菌巴氏醋桿菌(Acetobacterpasteurianus)進行改造,成功構建出一株具有一定乙醇耐受性能的工程菌株。并對其進行了發(fā)酵性能檢測和代謝組學研究,為進一步探討乙醇耐受

2、機制及改造菌種提供了依據。
  據相關文獻報道編碼磷酸組氨醇氨基轉移酶的hisl基因與乙醇的耐受性相關。根據已公布的hisl基因序列的信息設計引物,以滬釀1.01菌株(AP)的基因組DNA為模板擴增出目的片段,構建了重組質粒,并導入到巴氏醋桿菌中成功構建了能夠耐受高濃度乙醇的工程菌株T1。在9%(v/v)乙醇濃度的發(fā)酵條件下,其醋酸產量達到37.66±1.51g/L,比原始菌株AP的產量(12.93±2.89 g/L)提高了191

3、.07%。
  利用基于氣相色譜-質譜聯用(GC/MS)的代謝組學,分析了工程菌株與原始菌株在高濃度乙醇發(fā)酵條件下的胞內代謝物變化,并對其乙醇耐受機制進行了初步探討。代謝組學分析結果表明,乙醇脅迫下T1細胞中碳代謝、脂代謝和氨基酸代謝相關物質含量發(fā)生了改變。在乙醇脅迫條件下,菌株的糖酵解途徑與三羧酸循環(huán)受到不同程度地抑制,但工程菌株T1在乙醇脅迫下仍能維持較高的乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶酶活,使其乙醇氧化產能途徑能很好地運行,為菌體提

4、供足夠的能量,維持細胞生長,來抵抗外界不利因素。同時菌體內合成了大量的脯氨酸、谷氨酸和海藻糖等細胞保護性物質,對菌體自身起到保護作用。乙醇脅迫下菌體中飽和脂肪酸的合成會受到抑制,不飽和脂肪酸含量增加,使得飽和脂肪酸/不飽和脂肪酸比值減小,表明乙醇濃度會改變細胞膜流動性。在乙醇脅迫下菌株T1能夠有效地調節(jié)自身脂肪酸的合成,減小膜的流動性。乙醇脅迫下T1細胞膜脂肪酸的調節(jié)主要是通過調節(jié)十六烷酸、十八烷酸和油酸的合成量。
  綜上所述,

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