色米酚類物質(zhì)調(diào)節(jié)脂質(zhì)生成與積累的機理研究.pdf

1、色米即有顏色的糙米，是特種水稻的一種。色米以其獨具特色的口味、五彩繽紛的顏色以及豐富的營養(yǎng)日益受到人們的青睞。營養(yǎng)成分中富含多種對人體有益的維生素及微量元素。另外，色米中含有的酚類物質(zhì)賦予了色米較強的抗氧化性。同時，有關(guān)色米減肥的研究也有相關(guān)報道，但其抑制脂肪生成和積累的機理還沒有得出定論。
　　該課題的目的是研究七種不同品種的色米提取物中酚類物質(zhì)的抗氧化性物質(zhì)基礎(chǔ)以及抑制脂質(zhì)生成與積累的作用機理。以間充質(zhì)干細胞為模型進行成脂分化

2、，闡述其潛在的調(diào)節(jié)脂質(zhì)生成和積累的機理，利用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)(Realtime-PCR)研究脂肪細胞與脂代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響，用來確定色米是否具有治療或預(yù)防肥胖的功效。
　　本實驗主要包括三大部分。第一部分對原料色米進行提取，測定提取物中總酚含量和黃酮含量以及其抗氧化活性，采用多種自由基體系如DPPH·自由基、ABTS+自由基及超氧自由基O2-·的清除能力。結(jié)果表明總酚含量和黃酮含量越高的品種，具有越強的抗氧化能力，具

3、體表現(xiàn)在其清除自由基的能力。色米中總黃酮對總酚有一定的貢獻，二者均對其抗氧化活性有很大的貢獻，三種自由基間也存在較高的相關(guān)性。
　　第二部分利用紫外分光光度法對提取物酚類物質(zhì)進行全波長掃描以及高效液相色譜法進行成分分析。結(jié)果顯示酚類物質(zhì)是其抗氧化的物質(zhì)基礎(chǔ)，主要有沒食子酸、兒茶素、阿魏酸，香草酸以及咖啡酸等。
　　第三部分利用C3H10T1/2-Clone8間充質(zhì)干細胞進行體外研究，以確定色米提取物抑制脂肪形成過程的作用，對

4、誘導(dǎo)分化后的細胞形成的內(nèi)脂滴進行油紅O染色和量化法，Realtime-PCR測定與脂代謝相關(guān)基因(PPARγ，C/EBPα，F(xiàn)abp4，AdipoQ，Plin1)mRNA的表達量，分析脂肪的分化程度。結(jié)果表明:添加色米提取物處理后的實驗組，其細胞脂代謝相關(guān)基因表達與陽性對照組相比均出現(xiàn)不同程度的下調(diào)，樣品處理組各基因表達水平與酚類含量趨勢一致;利用蛋白質(zhì)印記法(Western Blot)對成脂分化所必需的過氧化物酶體增殖劑激活受體PPA