基于OATP1B1基因多態(tài)性研究丹參相關(guān)組分對(duì)氟伐他汀轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及其機(jī)制.pdf

1、背景：
　　氟伐他汀（Fluvastatin，F(xiàn)V）是臨床上廣泛使用的調(diào)血脂藥物，經(jīng)有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽1B1（organic anion transport polypeptide1B1，OATP1B1）轉(zhuǎn)運(yùn)入肝后發(fā)揮作用。OATP1B1基因多態(tài)性直接影響他汀類藥物的藥代動(dòng)力學(xué)過程，那么該基因多態(tài)性是否影響FV的轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)而改變其降血脂療效，確實(shí)值得探索。目前，我國(guó)臨床常以他汀類藥物聯(lián)合丹參制劑治療高脂血癥，并取得了很好的療效，雖然

2、兩藥合用的藥效學(xué)機(jī)制已有報(bào)道，但其涉及的藥物相互作用及其藥代動(dòng)力學(xué)機(jī)制尚不清楚。因此有必要基于OATP1B1基因多態(tài)性研究FV轉(zhuǎn)運(yùn)差異及合用丹參中相關(guān)組分對(duì)FV轉(zhuǎn)運(yùn)的影響與作用機(jī)制，為FV的個(gè)體化用藥治療及合用丹參制劑的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的：
　　基于OATP1B1基因多態(tài)性研究氟伐他汀轉(zhuǎn)運(yùn)差異及丹參中相關(guān)組分對(duì)FV轉(zhuǎn)運(yùn)的影響，探明其可能的提高降脂療效和降低藥物不良反應(yīng)的作用機(jī)制，為臨床個(gè)體化治療提供科

3、學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.考察攝取時(shí)間、藥物濃度對(duì)FV在OATP1B1*1a、OATP1B1*5與OATP1B1*15細(xì)胞中攝取轉(zhuǎn)運(yùn)的影響，確定 FV最佳攝取時(shí)間和底物濃度，比較三種基因型OATP1B1細(xì)胞中FV動(dòng)力學(xué)參數(shù)（Km、Vmax和CLint值），分析OATP1B1*5和*15突變對(duì)FV轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。
　　2.系列濃度的丹參中相關(guān)組分誘導(dǎo)不同基因型 OATP1B1-HEK293T細(xì)胞48h后，分別考察 FV攝

4、取量的變化，篩選3種可顯著影響FV在不同基因型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞中攝取的丹參組分。
　　3.設(shè)置陽性對(duì)照10μM利福平，系列濃度熊果酸、隱丹參酮和二氫丹參酮I誘導(dǎo)野生型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞48h，使用RT-qPCR、Western-blotting等技術(shù)手段檢測(cè)SLCO1B1 mRNA及OATP1B1蛋白表達(dá)水平，分析此3種組分影響FV轉(zhuǎn)運(yùn)的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1.FV在OATP1

5、B1*1a、*5及*15-HEK293T細(xì)胞模型中其動(dòng)力學(xué)參數(shù)Km(μM)與Vmax(pmol/mg protein·min-1)分別為17.59±2.33，8.57±0.42；12.52±1.43（P<0.5），4.42±0.21（P<0.5）及18.49±2.06，9.13±0.61；其CLint分別為0.49，0.36（P<0.5）及0.50。
　　2.系列濃度利福平、熊果酸、隱丹參酮和二氫丹參酮誘導(dǎo)不同基因型OATP1B1

6、-HEK293T細(xì)胞48h后，其對(duì)不同基因型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞中FV的攝取均有不同程度的促進(jìn)作用，且氟伐他汀的攝取速率隨著藥物濃度的升高呈遞增趨勢(shì)。丹參酮I高濃度時(shí)可抑制不同基因型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞中FV的攝取。丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛、丹酚酸B、丹參酮IIA對(duì)不同基因型OATP1B1-HEK293T細(xì)胞中FV的轉(zhuǎn)運(yùn)無明顯作用。
　　3.系列濃度熊果酸、隱丹參酮和二氫丹參酮I作用于野生型OATP1

7、B1細(xì)胞48h后均可誘導(dǎo)SLCO1B1 mRNA和OATP1B1蛋白的表達(dá)，并隨著藥物濃度的升高而增強(qiáng)。熊果酸的誘導(dǎo)作用最強(qiáng)，隱丹參酮次之，二氫丹參酮I誘導(dǎo)作用弱于10μM利福平。
　　結(jié)論：
　　1.與OATP1B1*1a-HEK293T（野生型）相比，OATP1B1*5-HEK293T對(duì)FV的轉(zhuǎn)運(yùn)活性略低，OATP1B1*15-HEK293T對(duì)FV的轉(zhuǎn)運(yùn)活性無明顯差異。
　　2.熊果酸、隱丹參酮和二氫丹參酮I對(duì)不同