益生性乳酸菌的分離篩選及對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性肝損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、乳酸菌因其多種優(yōu)越的性能而被研究者關(guān)注。本研究首先從奶制品中分離乳酸菌，并根據(jù)乳酸菌的菌落形態(tài)特征、過氧化氫酶接觸試驗(yàn)以及革蘭氏染色試驗(yàn)對(duì)乳酸菌進(jìn)行初步鑒定。再利用16S rDNA序列分析、生理生化特性以及碳水化合物發(fā)酵試驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。然后通過人工胃液耐受力、膽鹽耐受力以及粘附能力試驗(yàn)進(jìn)行益生性乳酸菌的初步篩選。最后用篩選的6株乳酸桿菌灌胃小鼠，LPS/D-GalN誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷，通過觀察小鼠的體重、肝臟的病理變化及重量，檢測(cè)小

2、鼠外周血以及肝臟中AST與ALT的分泌量，肝臟與小腸中TNF-α與IL-6的表達(dá)量，研究這6株乳酸桿菌對(duì)LPS/D-GalN誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)效果。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴從奶制品中共分離出107株乳酸菌，屬于17個(gè)種。其中乳酸桿菌71株屬于9個(gè)種，乳酸球菌36株屬于8個(gè)種:Lactobacillus brevis、Lactobacillus paracasei subsp.paracasei、Lactobacillus

3、gallinarum、Lactobacillusfermentum、Lactobacillus reuteri、Lactobacillu helveticus、Lactobacillusplantarum subsp.argentoratensis、Lactobacillus delbrueckii、Lactobacillusdiolivorans、Pediococcus pentosaceus、 Enterococcus faecal

4、is、Leuconostocmesenteroides、Pediococcus acidilactici、Pediococcus.sp、Enterococcus.sp、Lactococcus.sp、Leuconostoc.sp。這17種乳酸菌中有88.3％為同型發(fā)酵乳酸菌，11.7％為異型發(fā)酵乳酸菌，部分菌株可以在低pH、高鹽、低溫、高溫的條件下生長。⑵對(duì)139株乳酸菌進(jìn)行耐人工胃液(pH=3.0)、耐膽鹽以及粘附Caco-2細(xì)胞的試驗(yàn)

5、，共篩選出6株具有較強(qiáng)耐受和粘附能力的的乳酸桿菌，它們分別是: L.paracasei subsp.paracasei WXD5、L.casei SXJ30、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD55、 L.plantarum subsp.argentoratenis WXD100、 L.subsp.argentoratenis WXD106、L.plantarum subsp.argentoraten

6、is WXD101。⑶研究WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30這6株乳酸菌對(duì)LPS/D-GalN誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷保護(hù)作用。⑷結(jié)果顯示，與模型組相比，灌胃乳酸菌WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30的小鼠肝臟病變程度得到不同程度的緩解，AST、ALT、IL-6以及TNF-α因子的表達(dá)量也顯著下降，且以灌胃乳酸菌WXD5保護(hù)效果最為明顯，可以為急性肝損傷的研究提供