ABCG2在MPPa-PDT治療膠質(zhì)瘤敏感性研究中的作用.pdf

1、背景與目的：三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白G2(Adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member2,ABCG2)在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，可通過外排抗癌藥物參與腫瘤耐藥。本研究的目的旨在探討人膠質(zhì)瘤細(xì)胞對焦脫鎂葉綠酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester，MPPa)介導(dǎo)的光動力療法(photodynamic therapy, PDT)治療的敏感性

2、及其與ABCG2的關(guān)系。
　　方法：將處于對數(shù)生長期的U87，A172，SHG-44，U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞系，經(jīng)Mppa-PDT處理后，采用CCK-8法檢測細(xì)胞活性；流式細(xì)胞技術(shù)和Western Blot分別檢測四種細(xì)胞內(nèi)Mppa的含量及ABCG2的表達(dá)；PCR檢測四種細(xì)胞中耐藥相關(guān)蛋白（ABCG2，MDR,MRP1）的基因表達(dá)情況，篩選出對Mppa-PDT相對不敏感且ABCG2高表達(dá)的細(xì)胞系。將其隨機(jī)分為A組：單純光照組；B組：M

3、PPa-PDT組；C組：光照+煙曲霉毒素 C（Fumitremorgin C，F(xiàn)TC）組及 D組：Mppa-PDT+FTC組。經(jīng)上述分組處理后，采用CCK-8法檢測各組細(xì)胞活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞內(nèi)ROS的水平及未光照前各組細(xì)胞內(nèi)Mppa的含量。
　　結(jié)果：四種細(xì)胞對Mppa-PDT存在光能量依賴性，相同光能量照射處理后，A172細(xì)胞的細(xì)胞活性高于其他三種膠質(zhì)瘤細(xì)胞；MPPa與四種膠質(zhì)瘤細(xì)胞共同孵育12h后A172，S

4、HG-44細(xì)胞內(nèi)Mppa含量明顯低于U87，U251（P=0.0000）；A172細(xì)胞中ABCG2基因及蛋白表達(dá)水平明顯高于其他細(xì)胞系（P=0.0000）；FTC抑制A172細(xì)胞中的ABCG2后，F(xiàn)TC+Mppa組細(xì)胞內(nèi)Mppa含量明顯高于Mppa組（P＜0.0001）；D組ROS高于C組（P＜0.0001）；D組細(xì)胞的細(xì)胞活性比C組低（P＜0.001），凋亡率明顯高于C組（P＜0.001）。
　　結(jié)論：人膠質(zhì)瘤細(xì)胞A172對Mp